钟玉环
- 作品数：11 被引量：56H指数：5
- 供职机构：军事医学科学院毒物药物研究所更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生理学更多>>
- 补骨脂素和异补骨脂素在大鼠和人肝微粒体的酶促动力学被引量：7
- 2015年
- 目的研究中药有效成分补骨脂素和异补骨脂素的细胞色素P450(CYP)酶促动力学特征,比较其结构和种属差异,为体内药代动力学特征的预测提供科学依据。方法建立补骨脂素和异补骨脂素的液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)检测方法,在优化人和大鼠肝微粒体孵育体系和评价体外代谢稳定性的基础上,进行了代谢稳定性和酶促动力学研究,应用非线性回归法计算最大反应速率(V_(max))和米氏常数(K_m)。结果应用建立的LC-MS/MS检测方法,补骨脂素、异补骨脂素在肝微粒体孵育液中定量范围为0.1~50.0μmol·L^(-1),线性关系良好,精密度和准确度等满足检测要求。体外代谢稳定性研究显示,当底物浓度为1μmol·L^(-1),蛋白浓度为0.5 g·L^(-1),孵育40 min内,补骨脂素和异补骨脂素在大鼠和人肝微粒体呈线性消除,体外半衰期分别为74.5,95.0,74.5和173.3 min。补骨脂素在大鼠和人肝微粒体中的V_(max)分别为:(1.140±0.080)μmol·min-1·g-1蛋白,(0.620±0.060)μmol·min-1·g-1蛋白;K_m分别为(12.9±0.3)μmol·L^(-1)和(7.4±1.3)μmol·L^(-1)。异补骨脂素在大鼠和人肝微粒体中的V_(max)分别为(0.251±0.012)μmol·min-1·g-1蛋白和(0.103±0.014)μmol·min-1·g-1蛋白;K_m分别为:(3.0±0.4)μmol·L^(-1)和(3.4±0.7)μmol·L^(-1)。结论补骨脂素和异补骨脂素的CYP酶促动力学特征及代谢稳定性具有一定的种属和结构差异,在大鼠两者基于CYP酶的代谢清除过程可能相似。而在人体,异补骨脂素的CYP代谢清除可能慢于补骨脂素,导致药代动力学特征的差异。
- 阳海鹰钟玉环陈琳李桦庄笑梅
- 关键词：补骨脂素异补骨脂素肝微粒体细胞色素P450酶系统
- 芥子气血浆代谢产物作为毒剂早期诊断的暴露标志物
- 目的 本研究旨在建立同时检测血浆中芥子气代谢产物的定量方法、通过研究血浆毒物动力学过程,评价血浆代谢产物作为芥子气早期暴露标志物的可行性.方法 应用LC-MS/MS技术建立并验证同时检测大鼠血浆中芥子气代谢产物硫二甘醇(...
- 李春正钟玉环谢剑炜李桦
- 关键词：芥子气代谢产物液质联用
- 同时定量检测水胺硫磷和水胺氧磷的液相色谱-串联质谱法及应用被引量：1
- 2012年
- 目的建立同时测定大鼠全血中水胺硫磷及其活性代谢产物水胺氧磷的液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）分析方法,用于毒代动力学研究中血药浓度的测定。方法采集大鼠全血样品后即刻用4倍体积冰冷乙腈沉淀蛋白。待测物用Zorbax SB C18柱（2.1 mm×50 mm,1.8μm）分离,以含有0.1%甲酸的水和甲醇为流动相系统进行梯度洗脱。采用ESI源正离子多反应监测模式分析,水胺硫磷、水胺氧磷和内标三唑磷的定量离子对分别为m/z 231→121、274→215和314→162。结果水胺硫磷和水胺氧磷在5μg/L～5 mg/L浓度范围内线性良好,最低定量限为5μg/L,回收率在63.1%～77.8%的范围内,准确度和精密度符合生物样品的检测要求。大鼠静脉注射3 mg/kg水胺硫磷后,水胺硫磷在血中很快下降,消除半衰期为22.2 min。活性代谢产物水胺氧磷的生成也较快,10～15 min达到（257.91±42.00）ng/ml的平均峰值,消除半衰期为17.6 min。水胺硫磷和水胺氧磷的AUC0~t分别为（528.62±49.15）和（191.11±33.23）h.μg/L。结论本研究首次建立了同时定量测定大鼠全血中水胺硫磷和水胺氧磷的LC-MS/MS分析方法,方法的专属性好、灵敏度高,适用于水胺硫磷及水胺氧磷在大鼠体内的毒物代谢动力学研究。
- 魏霞钟玉环原梅谢剑炜李桦
- 关键词：水胺硫磷液相色谱-串联质谱法毒物代谢动力学
- 大鼠稳态脑分布模型评价药物的血脑屏障通透性被引量：2
- 2015年
- 目的建立大鼠稳态脑分布模型用于评价安替比林、阿替洛尔和ZZB系列新药候选化合物的稳态脑分布和血脑屏障通透性。方法大鼠静脉推注负荷剂量的药物后恒量输注使血药浓度达到稳态,取血和脑组织样品,LC-MS/MS定量测定血浆和脑组织药物浓度,计算稳态脑血比值(Kp值)。在Caco-2单层细胞体外模型上评价受试药物的双向跨膜通透性,计算表观通透系数(Papp)。结果安替比林和阿替洛尔分别为已知的血脑屏障易通透和难通透药物。安替比林的平均稳态脑分布浓度为(2561±125)ng/g,Kp值为0.93±0.04。阿替洛尔则分别为(20.1±0.8)ng/g和0.015±0.002。安替比林的Kp值约为阿替洛尔的60倍。ZZB系列化合物的结构相似,但Kp值的差异较大,从0.044到6.41,并与Caco-2细胞模型的Papp值不相关。结论建立的大鼠稳态脑分布模型可快速形成稳态血浆浓度,适用于药物血脑屏障通透程度的评价,方法简单、可靠且经济。
- 原梅阳海鹰钟玉环庄笑梅李桦
- 关键词：血脑屏障通透性稳态
- 超高效液相串联质谱法同时定量检测6个细胞色素P450酶探针代谢产物被引量：7
- 2013年
- 应用超高效液相色谱-质谱联用技术(LC-MS/MS),建立了同时定量测定6个细胞色素P450酶(CYP)探针代谢产物的方法。用甲醇和乙腈混合溶剂沉淀肝微粒体孵育液中的蛋白,在ZORBAX-C18色谱柱(100 mm×4.6 mm,3.5μm)上,以5 mmol/L甲酸铵和0.1%甲酸-乙腈为流动相,梯度分离待测物。在串联质谱正离子多反应监测模式下定量检测待测物。方法学验证结果表明,6个代谢产物在1.0～1000.0μg/L的范围内均呈良好的线性关系(r2>0.994);定量限为1μg/L;方法的日内和日间精密度(RSD)均小于12%;加标回收率为92.8%～104.4%;不同储存条件下样品稳定性实验的浓度偏差(RSD)小于10%。人肝微粒体活性测定的结果显示CYP1A2和CYP3A4的酶活性最强,分别为(466.1±32.1)和(694.3±11.7)pmole/(mg.min),与最低的CYP2C19酶活性分别相差27.7和41.3倍。本方法简便、快速、灵敏,适用于大量化合物CYP酶诱导和抑制评价的酶活性测定。
- 沈国林钟玉环原梅庄笑梅李桦
- 关键词：细胞色素P450酶代谢产物液相色谱-质谱联用肝微粒体
- 补骨脂酚大鼠体内药代动力学研究
- 补骨脂酚是中药补骨脂中重要活性成分之一,其药理及毒理学研究较为深入,但药代动力学研究很少,且给药剂量远远高于临床剂量,主要原因是补骨脂酚检测难度较大.本研究应用灵敏的柱前衍生化结合UHPLC-MS/MS方法定量测定补骨脂...
- 钟玉环庄笑梅原梅沈国林李桦
- 关键词：补骨脂酚药代动力学
- 补骨脂素和异补骨脂素对体外细胞色素P450酶活性的抑制和诱导作用被引量：18
- 2012年
- 目的探讨补骨脂素(PSO)和异补骨脂素(IPSO)对细胞色素P450(CYP)活性的抑制和诱导作用。方法将人肝微粒体或鼠肝微粒体与PSO或IPSO以及CYP特异性探针底物共孵育30 min,分别以非那西丁O-脱乙基、甲苯磺丁脲4-羟基化、美芬妥因-4-羟基化、右美沙芬O-脱甲基化和咪达唑仑1'-羟基化为同工酶CYP1A2,CYP2C9,CYP2C19,CYP2D6(大鼠2D2)和CYP3A4(大鼠3A1/2)代谢活性的标志,用HPLC-MS/MS法检测相应代谢产物的生成量并计算相应的IC50值,评价PSO和IPSO对5种CYP同工酶的潜在抑制作用。将PSO和IPSO或阳性诱导剂与"三明治"培养大鼠肝原代细胞共孵育72 h后,再加入CYP探针底物孵育1 h,检测相应代谢产物的生成量,与阳性诱导剂组比较,评价二者对CYP1A和CYP3A的诱导作用。结果 PSO和IPSO对人肝微粒体和鼠肝微粒体的CYP1A2均有较强的抑制作用,在人肝微粒体中的IC50值分别为0.17和0.13μmol·L-1;在鼠肝微粒体中的IC50值分别为0.47和0.36μmol·L-1。二者对人肝微粒体的CYP2D6也有中等强度的抑制作用,IC50值分别为3.59和9.51μmol·L-1。PSO和IPSO 100μmol·L-1可分别将大鼠肝细胞的CYP3A活性提高1.18和0.96倍,有一定的诱导作用。结论 PSO和IPSO能显著抑制CYP1A2酶活性,对CYP3A有一定的诱导作用。
- 钟玉环沈国林原梅刘万卉李桦
- 关键词：异补骨脂素药物相互作用微粒体
- 同位素稀释-高效液相色谱-质谱联用技术检测大鼠血浆中的芥子气水解产物被引量：3
- 2012年
- 应用同位素稀释-高效液相色谱-质谱联用技术(LC-MS/MS),建立了同时定量检测血浆中芥子气水解代谢产物硫二甘醇(TDG)和二羟乙基亚砜(TDGO)的方法。应用甲醇和乙腈混合溶剂沉淀染毒大鼠血浆中蛋白,采用ZORBAX-C18色谱柱(100 mm×3.0 mm,3.5μm),以5 mmol/L甲酸铵-甲醇梯度洗脱分离待测物。以d8-TDG为内标,在正离子多反应监测模式下定性和定量分析TDG和TDGO。方法学验证结果表明,TDG在5～800μg/L和TDGO在0.5～80.0μg/L范围内均呈良好的线性关系(r2>0.991),定量限分别为5和0.5μg/L,加标回收率在101%～118%之间,方法的日内和日间精密度(RSD)均小于10%。对SD大鼠(n=6)采用皮下注射方式进行染毒后采样测定,代谢动力学参数计算结果显示,TDG和TDGO的达峰时间(tmax)分别为30和60 min,峰值浓度(cmax)为(1724±227)μg/L和(301±115)μg/L,血浆浓度-时间曲线下面积(AUC)为(3286±249)μg.h/L和(1010±363)μg.h/L。
- 李春正陈佳钟玉环钟玉绪谢剑炜李桦
- 关键词：芥子气毒代动力学
- 补骨脂素与非那西丁的药-药相互作用及机制研究
- 补骨脂素是呋喃香豆素类化合物,在许多中药和天然药物中存在。文献报道,该类化合物与CYP酶的相互作用非常复杂,极易导致代谢性药-药相互作用的发生。本课题以非那西丁作为探针底物,研究补骨脂素对CYP1A2酶的体内外抑制作用及...
- 庄笑梅钟玉环沈国林李桦
- 关键词：补骨脂素非那西丁药物-药物相互作用
- 欧前胡素和异欧前胡素对人和大鼠肝微粒体细胞色素P450酶活性的抑制作用被引量：15
- 2013年
- 欧前胡素(IM)和异欧前胡素(ISOIM)是伞形科常用中药的主要有效成分,在临床上广泛应用。该文研究了IM和ISOIM对人和大鼠肝微粒体细胞色素P450酶(CYP)活性的抑制作用,并评价它们的相互作用潜能。在体外将系列浓度的IM和ISOIM与人和大鼠肝微粒体孵育30 min,以非那西丁、安非他酮、甲苯磺丁脲、S-美芬妥英、右美沙芬和咪达唑仑为CYP探针底物,应用LC-MS/MS定量检测各探针底物的代谢产物生成量,计算得到的IC50,评价两药对人肝CYP1A2,2B6,2C9,2C19,2D6,3A4酶,以及大鼠肝CYP1A2,2B6,2D2,3A1/2酶的抑制活性,并对抑制强度进行分级。在人肝微粒体中,IM和ISOIM对6个CYP同工酶均有不同程度的抑制作用。它们是1A2和2B6的强抑制剂,抑制1A2的IC50分别为0.05,0.20μmol.L-1;抑制2B6的IC50分别为0.18,1.07μmol.L-1。两药还是2C19的中等抑制剂,以及2C9,2D6,3A4的弱抑制剂。在大鼠肝微粒体中,IM和ISOIM是1A2的中等抑制剂,IC50分别为1.95,2.98μmol.L-1。它们分别是2B6的中等和弱抑制剂,IC50为6.22,21.71μmol.L-1。两药还是2D2,3A1/2的弱抑制剂。结果表明IM,ISOIM对人肝CYP酶有广泛的抑制作用,它们是CYP1A2和2B6酶的强抑制剂,临床用药时应注意因CYP酶抑制引起的相互作用。
- 曹艳钟玉环原梅李桦赵春杰
- 关键词：欧前胡素异欧前胡素细胞色素P450酶肝微粒体
