陈小玲
- 作品数：129 被引量：397H指数：13
- 供职机构：北京市农林科学院畜牧兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市自然科学基金北京市科技新星计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生化学工程更多>>
- 胸膜肺炎放线杆菌apxIC基因插入失活突变株构建及免疫原性分析被引量：2
- 2007年
- 胸膜肺炎放线杆菌是引起猪传染性胸膜肺炎(APP)的呼吸道病原菌,其分泌的Apx毒素是最重要的毒力因子之一。为构建APP突变弱毒菌株,在apxIC基因下游XhoI酶切位点处插入氯霉素抗性基因(Chlr)制备转移载体,通过电转化导入APP血清10型参考菌株(D13039)进行同源重组,筛选获得apxIC基因插入突变菌株D13039C-Chlr。该突变菌株特性鉴定结果表明其溶血活性完全丧失,可正常增殖和分泌ApxI毒素,连续10次传代后基因组中插入的Chlr基因可稳定遗传,利用5个剂量(2×108CFU^2×106CFU)对每组3只小鼠腹腔攻毒结果显示突变菌株毒力较母源菌株降低至少100倍以上,将突变菌株作为弱毒活疫苗经滴鼻途径免疫仔猪后利用APP血清1型(4074)和血清10型(D13039)菌株攻毒进行免疫原性鉴定,结果显示血清1型攻毒后非免疫组4头仔猪全部死亡而免疫组4头中死亡2头,非免疫组肺损伤指数(34.4)显著高于免疫组(17.5),血清10型攻毒后非免疫组肺损伤指数(17.5)也高于免疫组(10.5),同时鼻拭子和肺组织样品的细菌重分离数及PCR检测阳性数非免疫组也明显高于免疫组,表明突变菌株作为弱毒活疫苗对仔猪具有一定的交叉免疫保护力。该突变菌株的构建为鉴定ApxI毒素活性及研制具有交叉保护活性的APP弱毒活疫苗奠定了基础。
- 徐福洲史爱华陈小玲杨兵王金洛
- 关键词：胸膜肺炎放线杆菌突变
- 两株牛源荚膜A群脂多糖3型多杀性巴氏杆菌的分离鉴定被引量：2
- 2017年
- 用北京、山东两奶牛场疑似牛出败的病死牛组织感染小鼠,小鼠死亡后取组织染色镜检、接种血清TSA和麦康凯培养基,分离到2株疑似多杀性巴氏杆菌,命名为Pm1和Pm2。经细菌培养特性及形态检验、多杀性巴氏杆菌种特异性PCR、荚膜A、B血清群特异性PCR、脂多糖基因分型PCR、荚膜A群透明脂酸抑制试验鉴定其为荚膜血清A群、脂多糖3型多杀性巴氏杆菌。将Pm1和Pm2回归小鼠证明有强毒力。本试验为国内荚膜A群多杀性巴氏杆菌的流行病学研究增添了一些新数据。
- 李霄阳陈小玲何后军李永清
- 关键词：多杀性巴氏杆菌
- 用间接ELISA检测鸡血清中传染性鼻炎抗体被引量：6
- 1994年
- 用间接ＥＬＩＳＡ检测鸡血清中传染性鼻炎抗体陈小玲，陈葵，张培君，龚玉梅（北京市农林科学院畜牧兽医研究所１０００８１）鸡传染性鼻炎（ＩＣ）是由副鸡嗜血杆菌（Ｈｐｇ）引起的鸡上呼吸道传染病。国内外用于诊断和检测免疫水平的血清学方法主要有玻板凝集试验（ＡＧ...
- 陈小玲陈葵张培君龚玉梅
- 关键词：鸡病ELISA传染性鼻炎
- 猪传染性胸膜肺炎的流行现状和防制措施被引量：69
- 2001年
- 陈小玲杨旭夫朱士盛
- 关键词：传染性胸膜肺炎防制
- 猪的胸膜肺炎放线杆菌、多杀性巴氏杆菌和副猪嗜血杆菌复合PCR检测方法的建立被引量：22
- 2005年
- 在已经建立猪胸膜肺炎放线杆菌(APP)、猪多杀性巴氏杆菌(PM)、副猪嗜血杆菌(HPS)的单项PCR诊断方法的基础上,通过对扩增条件的优化,成功地建立了APP、PM、HPS的复合PCR实验室诊断方法,利用一次PCR反应,即可同时扩增出APP的342bp、PM的457 bp 和HPS 的821 bp 的特异性片段。该复合PCR 能同时检测到100 个每种细菌或50 pg 的APP 或HPS 的DNA和500 pg的PM的DNA。该三重复合PCR的敏感性同已报道的单PCR 一致。该方法的建立对临床上进行这3 种疾病的鉴别诊断和混合感染的检测都具有重要意义。
- 米丰泉陈小玲王翠敏赵玉军王凤强
- 关键词：猪胸膜肺炎放线杆菌猪多杀性巴氏杆菌副猪嗜血杆菌复合PCR
- 鸡传染性鼻炎流行病学调查(II)被引量：15
- 2001年
- 利用鸡传染性鼻炎 PCR试剂盒和阻断 ELISA试剂盒 ,对 2 9份菌株、1 36份临床样品和 1 0 1 9份血清进行了检验和分析 ,结果 PCR阳性率为 36.4% ,A型阳性率为 1 0 .3% ,C型阳性率为 6.4%
- 张培君陈小玲苗得园宋程龚玉梅
- 关键词：鸡传染性鼻炎流行病学调查PCR阻断ELISA
- 禽网状内皮组织增生病病毒囊膜蛋白基因的克隆及其原核表达被引量：4
- 2006年
- 以本实验室保存的REV毒株为模板,采用RT_PCR技术扩增了REV env部分基因,长为939 bp,并进行亚克隆到pMD18_T质粒载体上,连接、转化、鉴定后得到阳性重组质粒pET_env,将目的片段进行序列分析,结果表明,该REV的env基因与已发表的SNV株、中国HA9901株以及A株同源性均达94%以上,推导的氨基酸同源性为94%以上。将该基因片段与原核表达载体pET_32a重组,并将重组质粒转化至宿主菌BL21中,用IPTG诱导表达,对表达的蛋白用SDS_PAGE电泳,免疫印迹和薄层凝胶扫描分析,表达产物与理论推理一致;免疫印迹结果证明,表达的env蛋白可被REV阳性血清所识别。
- 瞿晓兰王宏俊陈小玲章振华
- 关键词：禽网状内皮组织增殖病病毒ENV基因克隆原核表达
- 胸膜肺炎放线杆菌ApxIC基因插入突变株的构建及生物学特性研究
- 根据发表的ApxIA基因序列(U05042)设计1对引物,用于自胸膜肺炎放线杆菌血清10型基因组DNA中扩增ApxIC基因,经克隆测序分析后在ApxIC基因下游Xho位点处插入氯霉素抗性基因,构建成功用于转化的重组质粒p...
- 徐福洲陈小玲杨汉春杨兵王金洛
- 关键词：胸膜肺炎放线杆菌同源重组
- 文献传递
- PCR技术用于病原微生物的血清型鉴定研究进展被引量：2
- 2001年
- PCR技术已被广泛应用于各种病原细菌及病毒的检测 ,而且已从用于鉴定病原微生物的种属发展到血清型及微生物株间差异的鉴定。作者综述了有关血清分型的 PCR研究进展 。
- 宋程陈小玲
- 关键词：PCR病原微生物血清型鉴定
- 牛源多杀性巴氏杆菌主要荚膜群和脂多糖基因型两组三重PCR检测方法被引量：2
- 2022年
- 为掌握国内牛源多杀性巴氏杆菌流行的主要荚膜群及脂多糖基因型,建立了检测多杀性巴氏杆菌(Pm)及其A、B荚膜群的三重PCR(PmAB-3PCR)以及检测3个脂多糖基因型的三重PCR(LPS-3PCR)方法,检验了其特异性和敏感性,用感染Pm小鼠的组织和人工污染Pm的牛鼻拭子样品进行了临床模拟检验,并对30株P m进行了PCR检测和传统血清学分型比较。结果显示:PmAB-3PCR特异性好,PmAB-3PCR和LPS-3PCR的DNA检测限分别为10~100 pg和1 ng,二者对菌液的检测限分别为200~2000 CFU和2000~20000 CFU。模拟临床样品PmAB-3PCR检测结果与细菌分离结果100%一致。PmAB-3PCR与琼扩试验的符合率为84%,二者检出的阳性率分别为88%和72%,差异不显著(P>0.05);LPS-3PCR与琼扩试验的符合率为60%,检出的阳性率分别为90%和50%,差异显著(P<0.05)。结果表明,建立的两组三重PCR方法准确高效且重复性好,可取代常规血清学方法用于国内牛巴氏杆菌病的诊断、流调和疫苗株筛选。
- 李霄阳许建刘文晓章振华徐福洲陈小玲李永清
- 关键词：三重PCR琼脂扩散试验
