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陈莎娜

作品数：8 被引量：3H指数：1
供职机构：重庆医科大学检验医学院更多>>
发文基金：重庆市自然科学基金国家自然科学基金留学人员科技活动项目择优资助经费更多>>
相关领域：医药卫生生物学更多>>

合作作者

文献类型

  • 7篇期刊文章
  • 1篇学位论文

领域

  • 8篇医药卫生
  • 1篇生物学

主题

  • 7篇细胞
  • 7篇白血
  • 7篇白血病
  • 5篇髓系
  • 5篇白血病细胞
  • 3篇髓系白血病
  • 3篇细胞分化
  • 3篇急性
  • 3篇急性髓系
  • 3篇分化
  • 3篇白血病细胞分...
  • 2篇代谢
  • 2篇糖代谢
  • 2篇糖酵解
  • 2篇突变
  • 2篇酵解
  • 2篇基因
  • 2篇AKT
  • 2篇表型
  • 2篇表型特征

机构

  • 8篇重庆医科大学

作者

  • 8篇陈莎娜
  • 7篇张伶
  • 7篇王娟
  • 4篇谭诗
  • 4篇鲜敬荣
  • 4篇全静
  • 4篇张慧娟
  • 3篇陈先春
  • 3篇张帅帅
  • 3篇覃凤娴
  • 2篇贺金刚

传媒

  • 3篇中国细胞生物...
  • 2篇第三军医大学...
  • 1篇重庆医科大学...
  • 1篇吉林大学学报...

年份

  • 4篇2014
  • 3篇2013
  • 1篇2012
共 8 条 记 录，以下是 1-8
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排序方式：
干细胞标志Musashi2基因RNAi腺病毒载体的构建及鉴定
2013年
目的:构建人干细胞标志分子Musashi2(Msi2)RNAi腺病毒载体,并检测其在膀胱癌细胞株BIU87中的干扰效果及对细胞增殖的影响。方法:将2对干扰片段msi2-1和msi2-2及阴性对照scramble片段克隆入pSES-HUS穿梭载体,经酶切鉴定及测序后,将测序正确的克隆经PmeⅠ酶切后与pAdeasy-1骨架质粒在BJ5183菌内重组,重组质粒经PacⅠ酶切后转染入293A细胞,进行腺病毒的包装和扩增。Real-time PCR和Western blotting法分别检测腺病毒感染BIU87细胞后Msi2的mRNA和蛋白表达水平,MTT实验检测干扰Msi2对BIU87细胞增殖的影响。结果:成功将干扰片段和scramble片段克隆入pSES-HUS穿梭载体,构建出pAdeasy-1-pSES-HUS-msi2和pAdeasy-1-pSES-HUS-scramble重组腺病毒载体并包装扩增出腺病毒。与scramble组比较,msi2-1和msi2-2组的Msi2mRNA和蛋白表达水平均明显下降(P<0.05)。干扰Msi2后,BIU87细胞增殖能力下降(P<0.05)。结论:成功构建Msi2RNAi腺病毒载体,其可有效抑制膀胱癌细胞株BIU87内Msi2的表达并抑制细胞增殖。
张慧娟谭诗陈莎娜王娟覃凤娴陈先春张伶
关键词：RNA干扰腺病毒载体
干扰核仁磷酸蛋白对人白血病OCI／AML3细胞凋亡的影响及其机制
2014年
目的:探讨抑制核仁磷酸蛋白(nucleophosmin,NPM)1基因对人白血病细胞凋亡的影响及相关机制。方法:将空载慢病毒p GIPZ和NPM干扰慢病毒sh NPM分别感染携带NPM1突变的OCI/AML3白血病细胞株以及对照白血病细胞株HL60。采用q RT-PCR、Western blot和免疫细胞化学法检测白血病细胞的sh NPM组以及Mock和p GIPZ组细胞及NPM1 A型突变(NPM1-m A)基因和蛋白的表达,流式细胞仪和瑞氏染色法观察OCI/AML3的sh NPM组以及Mock和p GIPZ组细胞凋亡情况,q RT-PCR和Western blot检测OCI/AML3的sh NPM组以及Mock和p GIPZ组凋亡相关蛋白(Bax/Bcl-2)和p-ERK信号分子表达;流式细胞仪检测丝裂原活化蛋白激酶/胞外信号调节激酶信号通路抑制剂(PD98059)处理后OCI/AML3的sh NPM组以及Mock和p GIPZ组细胞凋亡率的改变。结果:干扰NPM1明显抑制OCI/AML3细胞株NPM1-m A的m RNA水平(F=20.078;P=0.000,PMock vs.sh NPM=0.001,Pp GIPZ vs.sh NPM=0.003,PMock vs.p GIPZ=0.333)和蛋白水平,伴有胞质NPM突变蛋白表达明显减弱;干扰NPM1能明显上调OCI/AML3细胞凋亡率(F=25.236,P=0.000,PMock vs.sh NPM=0.001,Pp GIPZ vs.sh NPM=0.001,PMock vs.p GIPZ=0.729),同时光镜下观察到干扰组细胞出现凋亡小体等凋亡形态学特征。此外,干扰NPM1可上调OCI/AML3细胞中促凋亡分子Bax的蛋白和m RNA表达(F=7.649,P=0.000;PMock vs.sh NPM=0.015,Pp GIPZ vs.sh NPM=0.015,PMock vs.p GIPZ=0.984)、下调抗凋亡分子Bcl-2的蛋白和m RNA表达(F=5.190,P=0.000;PMock vs.sh NPM=0.034,Pp GIPZ vs.sh NPM=0.029,PMock vs.p GIPZ=0.909);干扰NPM1能明显下调p-ERK的表达,PD98059抑制剂阻断MAPK通路可促进OCI/AML3细胞凋亡(F=25.643,P=0.007)。结论:NPM1突变基因在白血病细胞抗凋亡特性中发挥重要作用,潜在的分子机制可能与ERK信号分子及Bax/Bcl-2表达有关。
王娟陈莎娜全静贺金刚张帅帅鲜敬荣张伶
关键词：白血病基因突变凋亡
探讨髓系白血病细胞的糖酵解表型及其调控机制
第一部分探讨髓系白血病细胞的糖酵解表型特征　　为探讨髓系白血病细胞的糖酵解表型特征，利用葡萄糖和乳酸试剂盒分别检测5株白血病细胞培养上清液中的葡萄糖消耗(G)和乳酸生成含量(L)，计算L/G比值来评估糖酵解水平。利用定量...
陈莎娜
关键词：髓系白血病糖代谢表型特征
探讨髓系白血病细胞株糖酵解表型特征被引量：1
2014年
探讨髓系白血病细胞株的糖酵解表型特征及其潜在的调控机制。葡萄糖试剂盒和乳酸试剂盒分别检测5株白血病细胞培养上清液中的葡萄糖消耗(G)和乳酸生成含量(L),计算L/G比值来评估糖酵解水平;定量PCR检测糖酵解相关基因GLUT、MCT1 mRNA表达;CCK8法检测细胞体外增殖能力;Western blot检测AKT蛋白磷酸化水平。结果显示,KG1a和K562细胞体外培养24 h后的L/G比值分别为1.78和1.71,接近糖酵解表型时L/G为2的比值,同时这两株细胞高表达糖酵解相关基因GLUT1和MCT1 mRNA。低糖(0.5 mmol/L)、中糖(5 mmol/L)、高糖(10 mmol/L)处理KG1a和K562细胞40 h后,两株细胞的增殖能力、葡萄糖消耗和乳酸生成随葡萄糖浓度增加而增强,高糖组增加更为显著(P<0.05)。相反,若糖酵解抑制剂2-DG(0,5,10 mmol/L)处理白血病细胞40 h后,两株细胞的增殖能力及糖酵解代谢水平随2-DG浓度增加而降低,高浓度2-DG组(10 mmol/L)降低更为显著(P<0.05)。此外,AKT抑制剂低浓度(5μmol/L)短时间(12 h)处理后能抑制白血病细胞AKT蛋白磷酸化水平,同时降低细胞的葡萄糖消耗和乳酸生成(P<0.05)。该研究提示髓系白血病细胞具有高糖酵解表型,AKT可能参与调控白血病的糖代谢过程,这有助于阐明白血病的能量代谢特征以及为白血病的靶向抗代谢治疗奠定基础。
陈莎娜鲜敬荣王娟贺金刚全静张帅帅张伶
关键词：髓系白血病糖代谢糖酵解AKT
MicroRNA-10b通过调控锌指蛋白KLF4阻滞白血病细胞分化
2013年
探讨microRNA-10b(miR-10b)通过调节锌指蛋白Krüppel-like factor 4(KLF4)的表达对急性白血病细胞分化的影响。Real-time PCR及Western blot分别检测不同分化程度的白血病细胞系中miR-10b与KLF4的表达;1,25-二羟基维生素D3(1,25D3)诱导人白血病细胞系HL60向单核系分化,检测此过程中miR-10b及KLF4的表达变化;利用体外合成的寡核苷酸(miR-10b mimics)转染HL60细胞,瑞氏–吉姆萨染色观察1,25D3诱导后细胞分化形态学的改变;流式细胞术检测单核细胞表面标志CD14的表达。结果显示,miR-10b在分化早期的KG-1a细胞中表达最高,在分化晚期的U937、THP-1细胞中表达最低(P<0.01),而KLF4的表达与之相反;1,25D3诱导HL60向单核系分化过程中,miR-10b表达呈时间依赖性降低,KLF4表达则逐渐增高;HL60细胞中过表达miR-10b后可抑制1,25D3诱导的细胞分化形态特征的改变及CD14的表达(P<0.05)。提示miR-10b通过负调控KLF4的表达阻滞白血病细胞HL60单核系的分化。
谭诗张慧娟王娟陈莎娜全静鲜敬荣张伶
关键词：MIR-10BKLF4急性髓系白血病细胞分化
人干细胞标志Musashi2在急性髓系白血病细胞分化中的表达变化被引量：1
2013年
目的探讨人干细胞标志Musashi2(Msi2)在佛波酯(phorbol myristoyl acetate,PMA)诱导急性单核白血病细胞株THP-1分化过程中的表达变化。方法 PMA作用THP-1细胞0、6、12、24 h后,倒置显微镜下观察THP-1细胞形态学改变,计算分化细胞百分数;流式细胞仪检测THP-1细胞表面分化抗原CD11b的表达;定量PCR和Western blot检测Msi2的基因及蛋白表达水平;定量PCR检测Msi2下游信号分子Numb的mRNA水平;定量PCR和Western blot检测Numb下游分子Notch1的mRNA和蛋白表达水平。结果 PMA处理24 h后可诱导THP-1细胞出现巨噬细胞样分化表型,实验组分化细胞的百分比显著高于未处理组(P<0.05)。同时24 h组CD11b表达量(59.30±8.70)较未处理组(0.32±0.08)显著增加(P<0.05)。实验组白血病细胞经PMA处理24 h后,Msi2的mRNA和蛋白相对表达量分别为(0.33±0.08)和(0.50±0.01),显著低于未处理组(P<0.05);PMA处理12 h后Numb的mRNA相对表达量为(2.92±0.33),较未处理组明显升高(P<0.05);而PMA处理24 h后Notch1的mRNA和蛋白相对表达量分别为(0.31±0.03)和(0.23±0.01),较未处理组显著下降(P<0.05)。结论干细胞标志Msi2表达随THP-1细胞分化而下降,Msi2-Numb-Notch1通路可能参与白血病细胞的分化调控。
张慧娟谭诗陈莎娜王娟覃凤娴陈先春张伶
关键词：分化佛波酯THP-1细胞
胞质NPM1突变蛋白与AKT的相互作用及其对急性髓系白血病细胞增殖的调控被引量：1
2014年
目的探讨细胞质中核仁磷酸蛋白A型突变体(NPM1 mutant A,NPM1 m A)与AKT的相互作用,观察NPM1 m A联合AKT对白血病细胞增殖的影响。方法免疫共沉淀实验观察胞质蛋白NPM1 m A与AKT的相互作用。通过RNA干扰技术抑制NPM1突变阳性的OCI/AML3白血病细胞株中NPM1突变蛋白的表达。不同浓度AKT抑制剂(AKT INHIBITORⅣ,AKTⅣ)处理白血病细胞抑制磷酸化AKT蛋白表达。CCK-8法检测细胞体外增殖能力。结果胞质NPM1 m A能够与内源性的AKT蛋白相互结合。干扰NPM1后,OCI/AML3细胞中NPM1 m A和野生NPM1蛋白表达明显下降(P<0.05),白血病细胞的体外增殖能力亦明显降低(P<0.05)。AKTⅣ处理后,白血病细胞体外增殖较未处理细胞显著下降(P<0.05)。若NPM1沉默合并AKTⅣ处理,则OCI/AML3细胞干扰组体外增殖明显降低(P<0.05)。结论在NPM1突变的白血病细胞中,胞质NPM1 m A能够与AKT相互结合,并参与调控白血病细胞的增殖。
全静张帅帅鲜敬荣王娟陈莎娜张伶
关键词：白血病AKT增殖
核仁磷酸蛋白基因突变对K562白血病细胞分化的影响
2012年
核仁磷酸蛋白基因(nucleophosmin,NPM1)突变在急性髓系白血病的发生发展中发挥着重要作用,而与白血病分化阻滞的关系尚未完全阐明。为探讨NPM1基因突变对白血病细胞体外分化的影响,将携带NPM1 A型突变(NPM1-mA)的表达质粒载体pEGFPC1-NPM1-mA转染白血病K562细胞系,构建稳定表达NPM1-mA蛋白的细胞株(K562 mA),同时设立野生型NPM1转染组(K562 wt)、空载体转染组(K562 C1)和未处理组(K562)为对照。利用豆蔻酰佛波醇乙酯(PMA)诱导各组细胞分化,瑞氏–吉姆萨染色观察细胞分化的形态改变,计算诱导分化率;相差显微镜计数贴壁细胞数量;流式细胞术分析细胞表面分化抗原CD41的表达。结果显示,PMA作用72 h后,与对照组相比,K562 mA组细胞的诱导分化率及贴壁细胞数明显降低(P<0.05);同时,CD41的表达受到显著抑制(P<0.01)。提示NPM1基因突变能够阻滞白血病细胞系K562的体外分化。
谭诗张慧娟王娟陈莎娜覃凤娴陈先春张伶
关键词：白血病细胞分化K562细胞系
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