韩玲
- 作品数：8 被引量：18H指数：2
- 供职机构：同济医科大学实验医学研究中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金卫生部科学研究基金卫生部科技专项基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 不同修饰型反义寡核苷酸抑制癌基因表达生物学效应的初步观察
- 1999年
- 比较了两种不同的反义寡核苷酸抑制ＨＬ－６０细胞ｃ－ｍｙｃ癌基因表达的效应。二者有相同的碱基序列，但有不同的修饰方式，即全硫代修饰及卟啉修饰；另外还合成了两种非修饰型的反义和错义寡核苷酸作为对照。ＭＴＴ细胞增殖实验、ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ的Ｄｏｔｂｌｏｔ检测、ｃ－ｍｙｃ蛋白的免疫组化检测等结果显示卟啉修饰的寡核苷酸除了具有明显的的特异性抑制基因表达的效果外。
- 韩玲杨渝珍陈春莲杨渝珍
- 关键词：反义寡核苷酸癌基因化学修饰生物学效应
- 寡核苷酸的卟啉化学修饰及其产物纯化的研究被引量：2
- 1998年
- 为探索寡核苷酸的修饰方法,合成了一种卟啉修饰的反义寡核苷酸并对其抑制c-myc靶基因表达的效果进行了初步探索。利用卟啉的1-羟基苯并三氮唑活性酯可将卟啉基团直接修饰在商品化的寡核苷酸片断上。用聚丙烯酰胺凝胶电泳结合红外、紫外测定完成寡核苷酸偶合物的鉴定。与其他类似研究相比,此法简便易行,具有较宽的应用范围。
- 吴蒙夏淑贞杨渝珍韩玲
- 关键词：寡核苷酸反义技术卟啉类C-MYC基因化学修饰
- 人脾贴壁细胞中TNFα转换酶cDNA的克隆以及LPS对其表达的影响被引量：2
- 2000年
- 根据ＴＮＦα转换酶（ＴＮＦα ｃｏｎｖｅｒｔｉｎｇ ｅｎｚｙｍｅ，ＴＡＣＥ）ｃＤＮＡ序列和 ＴＡＣＥ分子结构特征设计并合成引物，采用逆转录 ＰＣＲ（ＲＴ－ＰＣＲ）技术，首次从健康人脾贴壁细胞中扩增出 ＴＡＣＥ ｃＤＮＡ解整合素结构片段（ｄｉｓｉｎｔｅｇｒｉｎ ｄｏ－ｍａｉｎ），并用大肠杆菌脂多糖（ＬＰＳ）刺激人脾贴壁细胞，观察其对 ＴＡＣＥ ｍＲＮＡ表达的调节作用。结果表明：不同健康人脾贴壁细胞中均存在 ＴＡＣＥ ｍＲＮＡ的自然表达，并且 ＬＰＳ对该表达具有上调作用，其上调程度与 ＬＰＳ刺激时间呈正比关系。
- 王开富韩玲杨渝珍李鸣真陆付耳
- 关键词：CDNA大肠杆菌脂多糖RT-PCR
- 血清sIL─2R水平变化与免疫相关性疾病的关系
- 1996年
- 对１７６例肿瘤或自身免疫性疾病患者及１５６例正常人血清可溶性白细胞介素Ⅱ受体（ｓＩＬ－２Ｒ）含量进行测定。结果表明，血清ｓＩＬ－２Ｒ水平的改变与器官移植排斥反应的发生，与肿瘤、肾病综合征或喘息性支气管炎等自身免疫性疾病的发生、发展都有相关性。血清ｓＩＬ－２Ｒ可以作为衡量机体免疫状态的辅助指标。
- 杨渝珍姜汉英韩玲杨萍廖永芳吴衡生刘文利祝爱霞
- 关键词：免疫性疾病SIL-2R移植免疫
- 用ELISA鉴定原核细胞中IL-2-PE40的表达产物被引量：1
- 1998年
- 外源基因在原核细胞中表达产物的鉴定,是衡量重组DNA技术构建表达是否成功的重要标志之一。目前最常用的是Western blot门技术,此法可以分离出蛋白质特异性条带,但需经电泳转移和固相免疫检测等步骤,比较繁琐,耗费大。我们在进行IL-2-PE40融合蛋白表达效率的研究时,摸索了用ELISA来鉴定原核表达产物(包涵体或可溶性蛋白)的技术条件,取得较好效果,现介绍如下;
- 毕美霞韩玲杨渝珍
- 关键词：原核细胞ELISA
- 白细胞介素2-重组毒素对活化T淋巴细胞的靶向杀伤效应
- 1999年
- 利用ＰＣＲ－Ｃｌｏｎｉｎｇ技术和ＤＮＡ重组技术，构建了两类ＩＬ－２－ＰＥ４０＇嵌合基因的表达载体，分别由ＩＰＴＧ和温度（４２℃）诱导表达。在对表达产物进行了酶切位点和片段大小、电泳迁移率、分子量的初步鉴定后，又对融合蛋白的白细胞介素２（ＩＬ－２）和ＰＥ４０＇组分的抗原性进行了ＥＬＩＳＡ鉴定。从菌体蛋白中初步分离纯化了重组毒素，并测定其对细胞表面表达ＩＬ－２受体的活化Ｔ淋巴细胞的靶向杀伤效应及对混合淋巴细胞反应的抑制作用。结果表明，ＩＬ－２－ＰＥ４０＇融合蛋白确实对ＩＬ－２Ｒ＋细胞具有明显的靶向杀伤效应并呈剂量依赖关系，与对照组相比，随着保温时间的延长（６、２４、４８ｈ），杀伤效应趋于增强（Ｐ＜０．０５）。混合淋巴细胞培养结果显示，该融合蛋白对单相和双相反应均有不同程度的免疫抑制作用（Ｐ＜０．０１）。
- 杨渝珍毕美霞舒平韩玲
- 关键词：重组毒素白细胞介素2靶向杀伤T细胞
- 一种快速筛选和鉴定重组体的方法——改良菌落PCR被引量：8
- 1998年
- 在对DNA片段进行亚克隆的实验中,阳性重组子的筛选是鉴定外源DNA是否插入载体的重要步骤。常用的方法有两种:一是在含抗生素的平皿上挑取转化生长的单菌落,经液体培养基扩大培养后,提取质粒,再经酶切或PCR扩增鉴定;另外,还可以用菌落原位杂交的方法进行初筛。这两种方法虽然可靠,但是步骤复杂繁琐,而且后一种方法还存在污染问题。我们在构建重组毒素表达载体时,摸索出了一种改良的菌落PCR扩增筛选法,既准确又简易,现介绍如下。
- 毕美霞韩玲杨渝珍
- 关键词：PCR扩增分子克隆重组子
- 基质金属蛋白酶活性测定的改良底物胶电泳法被引量：6
- 2000年
- 基于ＳＤＳ－聚丙烯酸胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）的原理和技术方法，介绍一种改良的明胶－聚丙烯酰胺凝胶电泳方法（Ｇｃｌａｔｉｎ－ＰＡＧＥ），简称底物胶电泳法，用于测定能够水解明胶的基质金属蛋白酶类（ＭＭＰｓ）的水解活性。该方法简便实用，将底物胶中明胶浓度从 １０ ｇ／Ｌ降至 ２ ｇ／Ｌ，并将分子质量标准浓度提高至≤４０μｇ／孔，较好地解决了实验过程中所遇到的有关分子质量鉴定的难题。
- 丁廷波杨渝珍韩玲王开富王震
- 关键词：基质金属蛋白酶电泳聚丙烯酰胺凝胶
