顾红兵 作品数:23 被引量:55 H指数:4 供职机构: 江苏大学附属人民医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 江苏省自然科学基金 镇江市科技支撑计划(社会发展)项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
上皮细胞间质样转化相关基因在胃癌组织中的表达及其相互关系 2011年 目的:研究上皮细胞间质样转化(epithelial to mesenchymal transition,EMT)的相关基因在胃癌组织中的表达及相互关系。方法:用实时定量PCR方法检测23例胃癌患者癌及癌旁组织中介导EMT发生的转录因子Slug、Twist以及E-钙黏附蛋白(E-cadherin)的表达情况,并分析胃癌组织这三者间的相互关系。结果:23例胃癌患者的大多数胃癌组织中Slug、Twist和E-钙黏附蛋白的表达均高于癌旁组织,但差异无统计学意义(P均>0.05);胃癌组织中Slug与Twist之间呈显著的正相关(r=0.56,P<0.01);而E-钙黏附蛋白与Slug、Twist的表达无相关性(r=0.03,P>0.05;r=-0.09,P>0.05)。结论:Slug、Twist可能是胃癌发生过程中的重要分子,两者之间的相互作用可能是胃癌发生的重要环节。 陶洋 王梅 顾红兵 彭秀娟 赵崇晖 徐会涛 陈瑜 钱晖关键词:SLUG TWIST E-钙黏附蛋白 胃癌 实时定量PCR检测胃癌组织miR-20a及初步应用 被引量:1 2012年 目的建立检测人胃癌组织中miR-20a的实时荧光定量PCR方法。方法建立miR-20a标准曲线,评价该法检测的线性范围及灵敏度;对标准质粒扩增产物进行熔解曲线分析和琼脂糖凝胶电泳检测以分析该法的特异性。取高、中、低3份不同浓度的标准质粒进行批内和日间变异系数(CV)的检测,分析该法的重复性。收集70例胃癌患者手术切除的癌组织和对应的癌旁组织,定量检测组织中miR-20a的表达水平。结果构建的实时荧光定量PCR法的灵敏度为101copies/μL,扩增的线性范围为101~109copies/μL;扩增产物的熔解曲线峰和电泳片段特异;3份不同浓度标准质粒定量检测的批内CV分别为6.33%、4.74%、5.89%,日间CV分别为9.45%、6.29%、7.48%。定量结果显示75.7%(53/70)胃癌组织中miR-20a的表达高于癌旁组织,差异有显著性(Z=-4.427,P<0.01)。结论建立的实时荧光定量PCR检测miR-20a的方法准确、快速、灵敏、特异,可用于胃癌组织中miR-20a的检测。 王梅 王胜 顾红兵 钱晖 许文荣关键词:微小RNA 实时荧光定量PCR 胃癌 BMP7基因检测在结直肠癌和胃癌诊断中的意义 被引量:4 2009年 目的建立检测骨形态发生蛋白7(BMP7)基因的实时荧光定量RT-PCR法,探讨BMP7对结直肠癌、胃癌的诊断意义。方法构建BMP7基因的标准质粒,建立RT-PCR,real-time RT-PCR等方法检测并比较BMP7基因在21例胃癌组织、19例结直肠癌组织与对应癌旁组织中的表达水平,用免疫组织化学验证BMP7的蛋白水平差异。结果建立的BMP7检测法稳定和准确;19例结直肠癌中16例(84.2%)癌组织表达的BMP7基因显著高于对应的癌旁组织(P<0.05)。21例胃癌组织中11例(52.4%)癌组织表达高于对应癌旁组织,但无显著差异(P>0.05)。免疫组织化学在蛋白水平上证实了肿瘤组织和癌旁组织中BMP7的表达水平差异。结论成功建立了检测BMP7的实时荧光定量PCR方法,BMP7基因可作为结直肠癌检测的新靶点。 钱晖 谢颖 彭秀娟 顾红兵 曹慧玲 许晓蒙 王梅 张玲 陶洋 许文荣关键词:骨形态发生蛋白7 实时荧光定量PCR 结直肠癌 循环miR-17-5p/20a在胃癌预后预测和化疗疗效监测中的应用研究 目的:探讨分析循环miR-17-5p/20a在胃癌患者血浆中表达的临床意义以及在胃癌患者预后预测及化疗疗效监测中的应用价值。材料与方法:收集65例胃癌患者术前、16例术后和6例复发患者血浆标本。采用Real-timeRT... 王梅 顾红兵 张斌 史云燕 赵崇晖 钱晖 朱伟 许文荣文献传递 IL-1和IL-6在脊髓损伤大鼠神经细胞中的表达及其动态变化 被引量:7 2010年 目的探讨SD大鼠脊髓损伤部位神经细胞中IL-1和IL-6表达的动态变化及其意义。方法采用ELISA法检测大鼠脊髓组织匀浆内IL-1、IL-6含量;用免疫荧光双标记技术,在荧光显微镜下观察脊髓组织切片中IL-1、IL-6在脊髓神经细胞内的表达及其与神经丝蛋白(NF)共定位情况。结果①脊髓损伤后,IL-1、IL-6除在胶质细胞表达外,在脊髓神经细胞也有较强表达,且明显高于正常对照组;此外,假手术组也明显高于正常对照组。②ELISA检测结果表明:脊髓损伤组细胞因子IL-1和IL-6在脊髓损伤后1h内就迅速升高,至第6h达到第一个高峰,而后下降,而假手术组在第12h达第一个高峰;至第1d后损伤组和假手术组都逐渐升高,至第5d达到第二个高峰,第7d后稍下降,但仍高于正常对照组。结论脊髓损伤后,脊髓组织内神经胶质细胞和神经细胞均能表达大量的细胞因子IL-1、IL-6,参与机体炎症反应,推测脊髓灰质内的神经细胞可能具有调节脊髓损伤局部炎症反应的生物学功能。 庄志 顾红兵 朱灿宏关键词:脊髓损伤 神经元 胶质细胞 IL-1 IL-6 脉氧液对失血性休克动物的治疗作用 被引量:1 2004年 目的 观察脉氧液对失血性休克动物的治疗作用。方法 采用Wiggere改良法制作休克模型。将40只健康家兔随机分成复方乳酸钠治疗组(A组)和脉氧液复方乳酸钠治疗组(B组)。监测平均动脉压升幅、动脉血氧分压(PaO_2)、血液流变学等主要参数的变化。结果 两组比较,抗休克60min后,B组PaO_2增加值明显高于A组(P<0.01),血小板聚集率显著降低(P<0.05),平均动脉压升幅明显高于A组(P<0.05)。结论 脉氧液对失血性休克有较好的治疗效果,能提高动脉血氧分压,降低全血粘度和血小板聚集率。 袁登玉 郦剑云 王洪 宗白鹭 顾红兵 王法春关键词:失血性休克 家兔 动脉压 Tim4基因定量检测方法的建立及在消化道肿瘤中的初步应用 被引量:2 2009年 目的:建立T细胞免疫球蛋白及黏蛋白域分子4(T cells immunoglobu lin-and muc in-dom ain-contain ing mole-cu le 4,Tim4)基因表达的实时荧光定量PCR(实时RT-PCR)的检测方法,探讨Tim4基因在消化道肿瘤中的表达差异。方法:构建包含Tim4基因片段的标准质粒,通过RT-PCR,实时RT-PCR等检测并比较Tim4基因在37例胃癌组织、19例结直肠癌组织与对应癌旁组织中的表达水平。结果:建立的Tim4基因定量检测方法准确可靠;在37例胃癌组织中,26例癌旁组织Tim4基因表达量高于对应癌组织(26/37),且在26例癌旁组织高表达的样本中,18例(69.2%)胃癌癌旁组织与癌组织表达比率大于2;在19例结直肠癌中12例癌旁组织表达高于对应的癌组织(12/19),其中癌旁组织高表达率(大于2)为75.0%(9/12)。结论:成功建立了检测Tim4基因的实时RT-PCR方法,Tim4基因在结直肠癌和胃癌的癌组织中表达呈低趋势,这为深入探讨Tim4基因与肿瘤的关系提供了实验基础。 钱晖 彭秀娟 许晓蒙 顾红兵 王梅 徐会涛 陶洋 徐三荣 许文荣关键词:实时荧光定量RT-PCR 结直肠癌 汉防己甲素联合塞来昔布在逆转白血病细胞耐药中的作用及机制研究 目的:探讨汉防己甲素联合塞来昔布在逆转白血病细胞耐药中的作用以及潜在作用机制。
方法:噻唑蓝(MTT)比色法检测汉防己甲素联合塞来昔布对K562细胞的细胞毒作用;采用流式细胞技术(FCM)检测各处理组细胞内的药... 顾红兵关键词:汉防己甲素 塞来昔布 白血病 文献传递 PCR-SSCP检测白血病患者C/EBPζ基因突变方法学建立 被引量:1 2012年 目的建立一种快速、批量筛查白血病患者骨髓C/EBPζ基因外显子突变的多聚酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)分析方法。方法用Bio-Rad iCycler梯度PCR仪对25μL PCR反应体系中的Mg++、Taq酶等浓度及反应条件进行优化,并用2%琼脂糖电泳检验产物质量。在此基础上,再对中性聚丙烯酰胺凝胶浓度、上样缓冲液种类、上样量、上样次数及相隔时间、PCR产物稀释倍数、电压、电泳温度等因素进行探讨。同时比较80个健康体检者外周血与20个胸外科良恶性肿瘤患者肋骨骨髓DNA的PCR-SSCP图谱。结果 25μL PCR反应体系中的Mg++、Taq酶浓度分别为1.5~2.0mM和1.0~1.5U,退火温度为54℃~57℃时PCR扩增效率高;应用8%~10%非变性聚丙烯酰胺凝胶,低离子强度(LIS)上样缓冲液,PCR产物稀释4~5倍,上样量为5~10μL,同一块凝胶相隔0.5~1.0小时可上样2次产物,电压为320V挂冰,室温或4℃电泳5~7小时,SSCP分析可得到较为满意的图谱。80例健康体检者外周血与20例正常肋骨骨髓DNA的C/EBPζ基因图谱相同。结论可以用正常体检者外周血DNA代替正常肋骨骨髓DNA行SSCP分析,作为C/EBPζ基因突变检测的对照图谱,两次上样的PCR-SSCP方法节约了试剂、时间、人力,可用于快速大量筛查白血病患者C/EBPζ基因突变。 程旻 陶洋 丁金国 顾红兵关键词:SSCP 白血病 促甲状腺激素在不同化学发光分析系统间的对比分析和偏倚评估 被引量:3 2010年 目的用电化学发光分析仪Cobas e601和化学发光分析仪贝克曼ACCESS-2两种检测系统测定促甲状腺激素(TSH),并对其进行方法对比与偏差评估。方法依据美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)EP9-A2文件方案,每天选取临床样本8份,分别用Cobas e601和ACCESS-2两分析系统进行测定,5 d共测定40个样本,以Cobas e601分析系统为比较方法,ACCESS-2分析系统作为实验方法,对检测结果进行对比分析和偏倚评估。结果Cobas e601和ACCESS-2测定TSH的检测结果高度相关(r值为0.987),两种检测方法无统计学意义(P>0.05)。结论Cobas e601和强生ACCESS-2两种检测系统测定TSH结果基本一致,可以接受。 丁金国 姚冬明 房玉珠 顾红兵关键词:TSH 偏倚评估