马丽娟
- 作品数:21 被引量:119H指数:7
- 供职机构:宁夏医科大学第二附属医院更多>>
- 发文基金:国际科技合作与交流专项项目国家高技术研究发展计划宁夏回族自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生化学工程农业科学生物学更多>>
- 赖氨酰氧化酶对胃癌细胞迁徙能力的影响被引量:5
- 2008年
- 目的研究赖氨酰氧化酶(LOX)对胃癌细胞迁徙能力的影响。方法培养两株胃癌细胞,用Real-Time PCR法检测其LOX的表达量;通过体外Transwell小室迁徙实验比较两株胃癌细胞在不同浓度β-氨基丙腈(BAPN)作用下迁徙能力的变化。结果两株胃癌细胞中均有LOX的表达,当BAPN浓度是0.2和0.3 mmol/L时,胃癌细胞的体外迁徙能力受到抑制。结论LOX可能通过增强肿瘤细胞的迁徙能力而促进肿瘤的转移。
- 王玉巧韩梅侯晓丽马丽娟
- 关键词:赖氨酰氧化酶HGC-27SGC-7901迁徙胃肿瘤
- 鼠疫F1-V融合蛋白在大肠杆菌中的高效表达及鉴定被引量:11
- 2004年
- 目的通过构建pET-11c-F1-V融合表达质粒,从而获得具有免疫原性的融合蛋白。方法克隆鼠疫耶尔森氏菌(Yersinia pestis)的F1基因和V基因,然后将F1基因和V基因分别连接到pGEM-T载体上,经测序正确后再将F1基因和V基因连接到pET-11c原核表达载体上,构建pET-11c-F1-V融合表达质粒,并转化到BL21(DE3)大肠杆菌中,进行PCR及双酶切鉴定,筛选阳性克隆,通过IPTG诱导F1-V表达,经SDS-PAGE检测表达产物,通过Western-Blot检测重组蛋白的免疫原性。结果测序结果显示F1基因的碱基序列与Gene-bank(X 61996)完全一致,V基因的碱基序列与Gene-bank(M 26405)相比在564 bp处有一同义突变;SDS-PAGE在Mr约58 000处出现一条蛋白条带,经薄层扫描分析目的蛋白条带约占全菌体蛋白的25%左右,主要以可溶性蛋白形式存在;Western-Blot显示重组蛋白具有免疫原性。结论成功地构建了pET-11c-F1-V融合表达质粒,并且在大肠杆菌中获得了高效表达,表达的蛋白具有免疫原性。
- 黄顺军王希良李名扬罗德炎阳幼荣马丽娟
- 关键词:鼠疫耶尔森氏菌基因克隆基因表达
- 布氏杆菌pCDNA3.1-L7L12核酸疫苗的构建及其免疫学评价被引量:29
- 2004年
- 目的 获得布氏杆菌保护性抗原L7 L12重组蛋白及pCDNA3.1 L7 L12重组质粒 ,并比较其诱导特异性免疫应答的能力。方法 PCR扩增布氏杆菌核蛋白L7 L12基因分别构建至原核表达载体PET32a(+)和真核表达载体pCDNA3.1(+)中 ;pET32a L7 L12重组质粒转化BL2 1(DE3) ,所表达蛋白经SDS PAGE、免疫印迹分析、纯化后免疫小鼠 ;pCDNA3.1 L7 L12重组质粒配以GM CSF同时肌肉注射免疫小鼠 ,3次免疫后测定免疫功能进行免疫效果的评价。结果 ELISA、Westernblot检测到免疫鼠体内有特异性抗体产生 ,蛋白苗所诱导的抗体效价远远高于DNA疫苗 ;通过淋巴细胞增殖实验、细胞因子和CD分子测定表明DNA疫苗以诱发TH1 型免疫为主。结论 所构建的布氏杆菌DNA疫苗和蛋白苗均具有诱导特异性细胞和体液免疫应答的能力 ,DNA疫苗诱导产生的细胞免疫反应强于蛋白苗 ,可作为潜在的布氏菌新型疫苗 。
- 曾政王英赵光宇周华于三科韩岳罗德炎马丽娟王希良
- 关键词:布氏杆菌DNA疫苗
- 小儿腹痛与幽门螺杆菌感染的临床分析与治疗被引量:1
- 2006年
- 目的探讨小儿再发性腹痛(RAP)与幽门螺杆菌(HP)感染的相关性和治疗效果。方法对RAP患儿进行血清HP抗体检测,明确是否合并HP感染,阳性者予以HP根除治疗。结果117例RAP患儿中,HP-IgG抗体阳性者61例,阳性率52%。治疗后,显效率为40.6%,总有效率84.4%。结论小儿RAP在排除肠炎及其它外科疾病后,应该检测HP,阳性者给予H2受体拮抗剂、抗HP及胃黏膜保护剂等联合治疗。
- 马桂霞金少娟马丽娟
- 关键词:小儿腹痛幽门螺杆菌
- 更昔洛韦与利巴韦林治疗小儿毛细支气管炎56例疗效比较被引量:1
- 2006年
- 目的比较更昔洛韦与利巴韦林对小儿毛细支气管炎的临床疗效。方法将108例患儿分为治疗组(56例)和对照组(52例),分别使用更昔洛韦和利巴韦林抗病毒治疗,两组对症支持治疗相同。结果治疗组56例有效率为91%;对照组52例,有效率为55.7%,有统计学意义(P<0.01)。结论更昔洛韦对小儿毛细支气管炎疗效优于利巴韦林。
- 马桂霞马丽娟
- 关键词:更昔洛韦毛细支气管炎疗效
- SARS-CoV抗原的纯化与鉴定被引量:1
- 2005年
- 目的纯化灭活SARS-CoV为研制马抗SARS-CoV免疫球蛋白提供抗原.方法将灭活的SARS-CoV悬液超滤浓缩,用Sepharose 4 Fast Flow分子筛和阴离子交换柱层析纯化,用高效液相色谱、SDS-PAGE和电镜观察测定抗原的纯度.结果将01、02和03三批SARS-CoV悬液分别进行11.2倍、12.5倍和25.0倍超滤浓缩,抗原的回收率依次为48.6%、46.3%和55.6%,凝胶过滤层析后抗原的回收率依次为81.6%、79.3%和86.0%.再经阴离子交换梯度层析进一步提高了抗原的纯度和浓度,蛋白的比活性由纯化前的0.11U/μg增加到1.44U/μg.电镜下观察到SARS-CoV抗原颗粒完整,呈圆形或椭圆形状,直径在80~120 nm之间.SDS-PAGE显示主要条带位于Mr43 000~66000之间,经质谱扫描分析确定该成分为Mr46 000.高效液相层析法分析抗原纯度为97.0%.马抗SARS-CoV免疫球蛋白中和抗体效价在1:6 400~1:12 800之间.结论本研究为制备高效价的马抗SARS-CoV免疫球蛋白奠定了基础.
- 张松乐田光周华张良艳王东勇阳幼荣马丽娟王希良
- 关键词:SARS-COV超滤纯化
- 马抗SARS-CoV免疫球蛋白制备的研究
- 2004年
- 用纯化灭活的SARS-CoV抗原免疫马匹,采集血浆加入S/D灭活/去除病毒,用硫酸铵盐析沉淀提取抗SARS-CoVIgG,再经胃酶切、柱超滤等工艺制备马抗SARS-CoV免疫球蛋白。研制的马抗SARS-CoV免疫球蛋白制品中和抗体效价达1∶6400以上、F穴ab'雪2纯度在90%以上。建立了高效、稳定、效果好的马抗SARS-CoV免疫球蛋白生产工艺,为SARS的治疗和预防提供了可靠的保证,也为传统抗血清的更新换代提供了技术平台。
- 田光刘士山阳幼荣马丽娟赵光宇王希良
- 关键词:抗SA免疫球蛋白灭活中和抗体铵盐
- 胃癌细胞基质金属蛋白酶-2、9的表达及对细胞迁移的影响被引量:6
- 2010年
- 目的研究基质金属蛋白酶-2、9(matrix metalloproteinase-2、9,MMP-2、9)在胃癌细胞株HGC-27和SGC-7901的表达及对细胞迁徙转移的影响。方法采用Real-time PCR检测MMP-2、9 mRNA的含量;以ELISA检测培养上清液中MMP-2、9的相对浓度;通过明胶酶谱法测定培养上清液中的MMP-2、9比活。用Transwell小室迁徙实验、同质黏附和异质黏附实验比较两株细胞体外迁徙黏附能力。结果HGC-27中MMP-2和MMP-9 mRNA含量高于SGC-7901。HGC-27上清液MMP-2、9相对浓度均高于SGC-7901,且MMP-2比活高于SGC-7901,两株细胞MMP-9比活相近。HGC-27穿膜细胞数和异质黏附细胞数高于SGC-7901,同质黏附细胞数低于SGC-7901,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论迁徙和异质黏附能力较强、同质黏附能力较弱的胃癌细胞HGC-27的MMP-2、9表达较强,提示MMP-2、9高表达可能促进胃癌细胞迁徙转移。
- 侯晓丽韩梅王玉巧马丽娟
- 关键词:基质金属蛋白酶胃癌细胞迁徙
- β-氨基丙腈抑制赖氨酰氧化酶对小鼠免疫功能的影响被引量:1
- 2008年
- 目的观察β-氨基丙腈(β—Aminopropionitrile,BAPN)抑制赖氨酰氧化酶(lysyloxidase,LOX)后小鼠免疫功能的变化。方法选用18~22g的正常ICR小鼠,以β-氨基丙腈100mg/ks连续灌胃10d。处死后检测小鼠胸腺重、脾重、巨噬细胞吞噬功能;采用绵羊红细胞作为抗原,检测小鼠抗体生成细胞功能;采用MTT法检测小鼠脾淋巴细胞对ConA刺激的转化能力。结果以β-氨基丙腈抑制LOX活性,明显降低小鼠胸腺/体重比值;巨噬细胞吞噬率及吞噬指数均下降;小鼠抗体生成细胞数减少;ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖能力减弱。结论β-氨基丙腈抑制赖氨酰氧化酶可减弱小鼠免疫功能。
- 侯晓丽韩梅马丽娟
- 关键词:赖氨酰氧化酶免疫功能小鼠
- 同型半胱氨酸检测在糖尿病肾病中的临床意义被引量:11
- 2010年
- 目的探讨同型半胱氨酸在糖尿病肾病发生发展中的临床意义。方法选择151例2型糖尿病患者,并根据尿白蛋白排泄率及血肌酐水平将其分为单纯糖尿病组、早期糖尿病肾病组、临床糖尿病肾病组和肾衰竭组。42例健康体检者为正常对照组,检测其血同型半胱氨酸水平。采用SPSS13.0统计软件进行分析。结果各组血浆同型半胱氨酸水平比较,糖尿病肾病组显著高于单纯糖尿病组,并随糖尿病患者肾脏损害程度的加重而升高,各组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论高同型半胱氨酸血症与糖尿病患者出现肾脏损害程度相关,血浆同型半胱氨酸水平有望成为糖尿病肾病病情监测的有效指标。
- 杨秀莲马丽娟温晓燕
- 关键词:同型半胱氨酸2型糖尿病糖尿病肾病