高音
- 作品数：9 被引量：308H指数：6
- 供职机构：北京大学生命科学学院蛋白质工程及植物基因工程国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家教育部博士点基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学自动化与计算机技术更多>>
- 耐旱植物厚叶旋蒴苣苔BDN1脱水素基因的克隆及表达特性分析被引量：59
- 2000年
- 根据已知植物脱水素基因的保守区域设计引物，采用ＲＴ－ＰＣＲ方法从耐旱植物厚叶旋蒴苣苔的总 ｃＤＮＡ中扩增出一个 ５００ ｂｐ的与植物脱水素基因同源的序列．结合 ５’ＲＡＣＥ获得了植物脱水素基因家族一个新成员ＢＤＮ１的全长ｃＤＮＡ（１１４８ ｂｐ）．Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交分析表明，ＢＤＮ１基因在厚叶旋蒴苣苔基因组中以单拷贝形式存在．Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交结果表明，该基因的表达受干旱、寒冷及ＡＢＡ的诱导．推测该基因与厚叶旋蒴苣苔的耐旱特性有关．
- 赵恢武刘晗于海源胡鸢雷高音林忠平李振宇
- 关键词：耐旱植物脱水素基因克隆
- Cre重组酶结构与功能的研究进展被引量：8
- 2002年
- Cre loxP定位重组系统来源于噬菌体P1 ,由Cre重组酶和loxP位点两部分组成。在Cre重组酶的介导下 ,设定的DNA片段可以被切除 ,可以发生倒位 ,亦可造成定点的整合。由于其作用方式高效简单 ,Cre loxP定位重组系统已在特定基因的删除、基因功能的鉴定、外源基因的整合、基因捕获及染色体工程等方面得到了有效的利用 ,在转基因的酵母、植物、昆虫、哺乳动物的体内外DNA重组方面成为一个有力的工具。这里就Cre重组酶的结构。
- 王立霞王勇胡鸢雷高音林忠平
- 关键词：CRE重组酶LOXP位点
- 用于植物的铜诱导基因表达系统的改进(英文)被引量：2
- 2003年
- 铜诱导基因表达系统已被用于植物转基因表达的时空调控。它由两部分构成:(1)组成型或器官专一性表达的acel基因编码铜反应性的转录因子;(2)融合启动子控制下的目的基因,融合启动子由含ACE1结合位点的金属反应元件(MRE)连接CaMV 35S(-90-+8)启动子组成。本实验测试了来自酵母金属硫蛋白基因5',调控区的两个不同的ACE1结合区域在转基因烟草(Nicotiana tabacum L.cv.W38)中的效果。结果表明,与MRE(-148--105)相比,使用MRE(-210--126)的铜诱导系统效率增加50％到100％。在植物生物技术中使用这一系统控制基因性状是很有潜力的。
- 彭向雷钟瑾梁斌胡鸢雷高音林忠平
- 关键词：转基因烟草
- 食物过敏原数据库的建立和使用被引量：14
- 2000年
- 倪挺李宏胡鸢雷高音张宏誉林忠平
- 关键词：过敏性疾病转基因食物
- cre基因在大肠杆菌中的表达及表达蛋白活性的检测
- 2002年
- Cre重组酶来自噬菌体P1,可以识别特异的loxP位点的DNA序列 ,并进行专一性的剪切和拼接。利用PCR技术将cre基因克隆至原核表达载体pET 2 9a ,在大肠杆菌BL2 1(DE3)得到了高效表达。采用DEAE 5 2柱层析的方法对表达蛋白进行了纯化。体外生物学活性检测表明 ,表达蛋白对含有同向loxP位点的质粒有切割活性。
- 王立霞张珠强胡晓倩胡鸢雷高音林忠平
- 关键词：CRE基因大肠杆菌CRE重组酶基因表达
- 菠菜磷酸丙糖转移蛋白在烟草中正义及反义表达及其对碳水化合物转运的影响被引量：1
- 2000年
- 以菠菜 (SpinaciaoleraceaL .)为材料 ,取幼叶分离mRNA ,反转录合成cDNA ,以cDNA第一链为模板 ,通过PCR扩增 ,获得菠菜磷酸丙糖转移蛋白 (Triosephosphatetranslocator,TPT)cDNA目的片段。对其进行序列分析 ,结果表明 ,分离的目的片段核苷酸序列与文献报道相比同源率为 99 9% ,只有 1个碱基发生改变。将得到的菠菜tptcDNA与CaMV 35S启动子和NOS 3′终止子融合 ,分别构建了正义及反义表达载体。通过根癌土壤杆菌(Agrobacteriumtumefaciens)介导转化烟草 (NicotianatabacumL .) ,在含有卡那霉素的抗性筛选培养基上再生的植株经PCR及Southern杂交检测 ,证明tpt基因已整合到烟草基因组上 ,菠菜丙糖磷酸转移蛋白基因导入烟草后使叶绿体中TPT的含量表现出明显差异 ,并导致烟草光合作用产物分配的变化 ,表现在叶绿体中淀粉含量的改变。
- 刘晗赵恢武陈杨坚胡鸢雷高音林忠平
- 关键词：转基因植物碳水化合物
- 干旱诱导性启动子驱动的海藻糖-6-磷酸合酶基因载体的构建及转基因烟草的耐旱性被引量：138
- 2000年
- 通过PCR程序克隆拟南芥 (Arabidopsisthaliana (L .)Heynh .)的干旱诱导性启动子Prd2 9A及来自酿酒酵母(SaccharomycescerevisiaeHansen)的海藻糖_6_磷酸合酶基因 (TPS) ,并将它们组成可在植物中表达的载体RT。通过根癌土壤杆菌 (Agrobacteriumtumefaciens (SmithetTownsend)Conn)LBA44 0 4介导 ,获得转基因烟草 (NicotianatabacumL .)。Southern分析表明TPS基因已经整合到烟草基因组中。Northern分析表明TPS基因的表达受干旱胁迫的诱导。转基因烟草的形态发生多种改变 ,包括变矮 ,茎变细 ,叶子呈柳叶状 ,腋芽明显 ,同时耐旱性得到增强。
- 赵恢武陈杨坚胡鸢雷高音林忠平
- 关键词：TPS转基因
- 果实专一性启动子驱动ipt基因在番茄中的表达及其对番茄果实发育的影响被引量：79
- 2002年
- 用PCR方法获得了番茄果实专一性启动子（2A12）和农杆菌（C58）Ti质粒上的ipt矿基因.分别构建由2A12驱动下的gus和ipt基因的植物表达载体,并使两种嵌合基因经农杆菌介导转入番茄品种“中蔬4号”的基因组中.GUS组织化学活性分析表明,2A12启动子具有严格的果实表达专一性.2A12驱动ipt基因在番茄中表达,使得果实中细胞分裂素的含量增加,最终导致果实中种子发育的停滞和胎座组织的增厚,并形成无籽番茄果实,同时转基因番茄果实成熟进程受阻且果实采后的储藏保鲜时间延长了1～2周.进一步分析发现,转基因番茄坐果率和产量均有不同程度的增加,虽然可溶性糖含量略有降低,但果实中干物质和粗蛋白含量有所增高.
- 毛自朝于秋菊甄伟郭俊毅胡鸢雷高音林忠平
- 关键词：番茄果实发育IPT基因细胞分裂素植物表达载体
- 转基因马铃薯中病原诱导GO基因的表达及其对晚疫病的抗性被引量：38
- 2000年
- 利用 ＰＣＲ技术从黑曲霉（Ａｓｐｅｎｇｉｌｌｕｓ ｎｉｇｅｒ）中扩增并克隆了葡萄糖氧化酶（ｇｌｕｃｏｓｅ ｏｘｉｄａｓｅ，简称ＧＯ）基因，并将马铃薯病原诱导型启动子（Ｐｒｎｌ－１基因启动子）与其融合构建了植物表达载体ｐＣＡＭＧＯ．经农杆菌介导转化获得了转基因植株，Ｓｏｕｔｎｅｒｎ杂交显示葡萄糖氧化酶基因已经整合进马铃薯基因组．该基因的表达及所引起的Ｈ_２Ｏ_２的生成由淀粉－ＫＩ的显色反应得到证实．用马铃薯晚疫病 Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ ｉｎｄｓｔａｎｓ复合生理小种侵染，结果表明：转基因马铃薯中病原诱导型启动子可受马铃薯晚疫病病原的诱导；获得的转基因植株对晚疫病的抗性水平各不相同，多数表现发病时间推迟和病征明显减弱，其中４株表现明显抗性，１株形成过敏性病斑表现高度抗性．表明病原诱导型启动于驱动ＧＯ基因的表达在抗植物真菌病基因工程中具有很好的应用前景。
- 甄伟陈溪梁浩博胡鸢雷高音林忠平
- 关键词：转基因马铃薯晚疫病抗性
