仇凯
- 作品数：24 被引量：66H指数：5
- 供职机构：第四军医大学西京医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 原发性肝癌组织中β-G基因的表达及意义
- 目的:探讨原发性肝癌组织中β-G 基因表达及其意义。方法:采用免疫组化,免疫荧光和原位杂交等方法对54例原发性肝癌,51例癌旁肝硬化组织及10例正常肝组织进行检测。结果:β-G 在原发性肝癌及癌旁组织中的表达明显高于正常...
- 戴辉窦科峰李开宗陈勇侯小娟仇凯陈志南易军
- 关键词：原发性肝癌免疫组化原位杂交
- 文献传递
- 单克隆抗体F(ab’)_2片段2种纯化方法的建立及比较被引量：7
- 1998年
- 建立纯化（mAb）F（ah’）2片段的有效方法．方法：在pH5．5环境下，用DTT激活木瓜酶，在没有DTT存在下消化抗人肝癌mAbHAb18IgG1，37℃，反应8h，然后分别用SephacrylS-200（1cm×65cm）凝胶过滤柱和DEAE-Sepharose-FF（2cm×18cm）阴离子交换柱纯化．结果：经SDS-PAGE（100g／L）电泳测定，2种方法纯化的F（ah’）2片段的纯度分别为81％和94．6％，纯化周期为2h和50min，得率为49％和53％，经间接免疫荧光法测定F（ab’）2片段的免疫活性均为1∶12000，比消化前IgG的1∶16000略有损失．结论；DEAE-Sehparose-FF阴离子交换一步法是在FPLC上建立的较SephacrylS-200凝胶过滤法更为有效的F（ab’）2片段纯化方法，该方法在F（ah’）2片段的纯度、活性、产率方面均优于文献报道．
- 刘成刚陈志南边惠洁米力仇凯曲萍
- 关键词：单克隆抗体纯化木瓜蛋白酶
- 两株新的抗肝细胞肝癌单克隆抗体的制备及特异性鉴定被引量：12
- 1994年
- 以外科手术切除的肝癌标本制备的细胞悬液和新建株的肝癌细胞为免疫原。籍多重免疫途经致敢ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，经２０次融合，从近１０，０００个融合孔中，筛选出两株（ＨＡｂ２５，ＨＡｂ２７）肝癌单克隆抗体，在９４例肝癌、１４１例其他肝病组织，２６种正常组织，１２９例各组织系统的肝外恶性肿瘤组织上做了交叉反应。除ＨＡｂ２７与毛细胆管有弱的反应外，两株抗体与肝癌组织结合的阳性率高（８３．１５％，８５．１１％），仅与少数消化道肿瘤有交叉．１３１Ⅰ标记抗体进行放射免疫显像，最佳显像时间为７２ｈ，瘤／肝、瘤／血比值分别为５．０７～６．８４、１．２６～２．１３，可望为肝癌导向药物研究，提供新的载体。
- 胡川闽刘彦仿陈志南隋延仿仇凯徐力青
- 关键词：肝细胞癌肝肿瘤单克隆抗体
- 转染﹀G基因HHCC细胞在裸鼠体内的转移特性被引量：1
- 2000年
- 目的 利用转染 βG基因的 HHCC细胞构建裸鼠转移模型 .方法 将 HHCC细胞和转染 βG基因 HHCC细胞体外培养 ,观察细胞形态结构 ,流式细胞仪测定细胞周期 ,并采用裸鼠脾脏种植法对转βG基因 HHCC细胞的转移特性进行研究 .接种后 6 0 d,收集转移灶 ,常规制备光镜片 ,HE染色 .结果 转染βG基因 HHCC细胞内多见颗粒性物质 ,微绒毛及突起增多 ,溶酶体增多 ,内质网及核糖体丰富 ,糖元颗粒堆积 ,某些细胞出现变性、坏死 .转 βG基因 HHCC和 HHCC相比较 ,其细胞周期发生明显改变 ,S期细胞增多 (P<0 .0 5 ) ,G2期细胞减少 (P<0 .0 5 ) ;裸鼠脾脏种植后 6 0 d,发现实验组出现广泛转移在肝、肾、肠系膜淋巴结的肉眼可见的转移灶 ,而对照组仅出现肝内播散 .结论 转染βG基因可增强
- 金昌德施新猷仇凯李六金
- 关键词：肝癌细胞株HHCC肿瘤转移
- 介绍一种新的在体冠状动脉定量缺血的模型
- 心肌缺血的动物模型文献上介绍有几种方法:(1)结扎冠状动脉;(2)用栓子选择性造成冠状动脉栓塞;(3)通电造成栓塞或用药物造成冠状动脉痉挛;(4)采用冠状动脉狭窄器与电磁流量计联合作用等。这些方法死亡率高、条件严格、难度...
- 王跃民仇凯臧益民朱妙章
- 文献传递
- 肝癌细胞内逆转录病毒介导β-葡萄糖醛酸苷酶基因的表达被引量：2
- 2000年
- 目的 建立高表达 β-葡萄糖醛酸苷酶 (β- Glu)的肝癌细胞株 .方法 采用脂质体介导法 ,将重组逆转录病毒表达载体 p DOR- βG转染肝癌细胞 ,G418筛选出阳性克隆 ,用免疫组化法、酶组织化学法、原位杂交法及酶活性测定等方法观察 β-Glu表达情况 .结果 共获得 4株转染阳性克隆 ,其中 F1,H4为 β- Glu高表达克隆 .免疫组化法发现转染细胞 β- Glu免疫阳性物质主要分布于胞质及胞核内 ,酶组织化学法观察转染细胞酶活性产物主要集中于胞质中 ,且转染细胞较非转染细胞呈色深 .原位杂交法观察阳性杂交信号于胞质及胞核 ,甚至核仁中 ,且在转染细胞中杂交信号增强 .结论 通过转入人β-Glu基因可以建立 β- Glu肝癌高表达模型 .该模型的建立 ,既可用于观察β- Glu前体药物的基因治疗效果 ,也能观察β-
- 仇凯陈志南刘彦仿曲萍金晶胡沛臻朱晓慧徐力青
- 关键词：肝细胞癌前体药物
- 微量免疫法制备兔抗PHA-L抗血清及PHA-L顺行追踪给药条件的探讨
- 1988年
- 将PHA-L(Phaseolus Vulgaris-Leucoagglutinin,植物血凝素L)导入中枢神经系统特定部位,在可能投射区作免疫组化染色,可取得理想的顺行标记结果。我们用Vector实验室产PHA-抗原,根据微量免疫法免疫家兔,获得了效价较好的兔抗PHA-L抗血清。成年雄性新西兰纯种兔三只,脚掌皮下注入Freund完全佐剂,待触及鼠膝部或腘窝淋巴结肿大成黄豆至蚕豆大小时,将与Freund不完全佐剂混匀成油色水状态的PHA-L抗原0.1ml注入每例动物肿大之淋巴结。一个月后于每例动物背部皮下多点注入抗原。又一个月重复注射。注射后12天耳缘静脉采血,用琼脂双扩法测抗血清效价,三例动物中,有一例动物效价为1∶32—1∶64。第14天颈动脉放血,分离血清。
- 顾桂宝鞠躬段晓勤张遐仇凯王伯沄
- 关键词：免疫法免疫技术PHA-L抗血清给药
- β-葡萄糖醛酸苷酶基因对人膀胱癌T24细胞的转染及表达
- 2002年
- 目的 探讨 β 葡萄糖醛酸苷酶 (βG)基因对人膀胱癌T2 4细胞的转染及表达的可行性。方法 采用基因工程技术构建带 βG基因的真核表达载体 ,利用脂质体介导法在体外将 βG基因导入人膀胱癌T2 4细胞 ,利用mRNA打点杂交、原位杂交、免疫组织化学、Westernbloting方法检测βG基因的转录和表达情况。 结果 成功克隆出含人 βG基因全长的真核表达载体 pcDNA3 .1 βG ,以阳离子脂质体LipofectAMINE为载体将βG基因转染T2 4细胞后 ,经 40 0mg/L的G41 8筛选后可形成抗性克隆 ;βG基因打点杂交和原位杂交结果显示转基因细胞中有 βGmRNA的高表达 ;免疫组织化学和Westernbloting证实转基因细胞中有 βG蛋白的强阳性高表达。
- 秦卫军陈宝琦王禾邵国兴仇凯陈志南
- 关键词：膀胱癌T24细胞基因转染基因表达
- 弱激光刺激对小鼠免疫系统的影响被引量：11
- 1995年
- 我们研究了连续激光和不同频率的斩波激光照射对小鼠免疫系统的影响。实验结果表明，不同方式的激光刺激均能提高小鼠的免疫机能，而且在相同的照射时间下，斩波激光的效果要大于连续激光。
- 龙开平段新民杨继庆张建保杨春智仇凯施新猷
- 关键词：激光疗法激光免疫系统
- 原发性肝癌组织中β-G基因的表达及意义
- 2001年
- 为探讨原发性肝癌组织中 β G基因的表达及其意义 ,采用免疫组化、免疫荧光和原位杂交等方法对5 4例原发性肝癌组织、其中的 5 1例癌旁肝硬化组织及 10例正常肝组织进行检测。结果发现 ,β G在原发性肝癌及癌旁组织中的表达明显高于正常组织 ,伴转移患者癌旁组织表达高于癌组织 ;临床资料证实 β G表达与肝癌的转移和分化密切相关 ,而与肿瘤的大小、有无包膜、AFP水平、组织类型、是否并发乙肝等无关。提示 β
- 戴辉窦科峰李开宗陈勇侯小娟仇凯陈志南易军
- 关键词：肝肿瘤免疫组织化学肿瘤转移基因表达
