冉宇靓
- 作品数：125 被引量：348H指数：10
- 供职机构：中国医学科学院肿瘤医院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 单克隆抗体库技术筛选分离食管癌血管内皮功能性膜蛋白
- 背景与目的肿瘤的生长和转移依赖于血管的生成,抑制肿瘤血管生成是一种极具优势的肿瘤治疗新策略。由于内皮细胞是肿瘤新生血管形成的关键环节和“物质基础”,而且其基因组稳定,不易因突变产生耐药性,因此已成为抗肿瘤血管生成治疗肿瘤...
- 胡东周转张遇山冉宇靓胡海遇珑娄晋宁杨治华
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- 细胞质膜表面抗原的单克隆抗体及其用途
- 本发明涉及一种新的可与人食管癌细胞天然膜抗原结合的单克隆抗体，及其生产的杂交瘤细胞系，以及该抗体在制备可用于治疗人食管癌转移的药物中的应用。该单克隆抗体可与具有转移能力的人食管癌细胞系EC-9706细胞膜表面的天然抗原结...
- 杨治华冉宇靓胡海
- 文献传递
- 高转移肺癌细胞株的建立及其肿瘤干细胞生物学特性被引量：1
- 2017年
- 目的研究高转移肺腺癌细胞株的肿瘤干细胞生物学特征。方法肺腺癌细胞系A549接种裸鼠皮下成瘤后,取肺的转移灶,通过机械分离法获取肺转移细胞,体外扩大培养后,再次接种裸鼠。如此反复接种裸鼠,获得稳定肺转移的细胞株A549-V13。采用无血清悬浮培养及PKH26染色确定A549-V13存在肿瘤干细胞。流式细胞术(FACS)检测和分选A549和A549-V13中肿瘤干细胞标志物CD133的表达并进行体内外生物学特征实验。结果建立稳定高转移A549-V13细胞株。无血清悬浮培养A549-V13,7天后形成的球形细胞团中存在单个PKH26阳性细胞。FACS检测显示,与A549中CD133^+细胞相比,高转移A549-V13细胞株中CD133^+细胞的表达比例显著提高4.85倍。A549-V13中CD133^+细胞具有更强的自我更新能力,侵袭能力提高1.42倍,耐药能力也显著增强,其IC50提高1.26倍,A549-V13的CD133^+细胞在裸鼠皮下接种2×10~2个细胞3月致瘤4/6,而接种2×10~2个A549的CD133^+细胞3月才致瘤2/6。结论建立高转移肺癌细胞株A549-V13,伴随CD133^+细胞表达比例的增加,其体内外生物学功能显著增强。
- 遇珑舒雄刘军孙力超杨治华冉宇靓
- 关键词：人肺癌细胞肿瘤干细胞CD133CD90
- 抗人VEGF165人/鼠嵌合抗体的构建及其真核高效表达
- 肿瘤新生血管形成与肿瘤的生长和转移密切相关,近年来通过抑制肿瘤新生血管形成来治疗肿瘤及肿瘤转移的抗血管疗法倍受重视.血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)...
- 冉宇靓
- 关键词：血管内皮生长因子中和抗体嵌合抗体真核细胞
- MAGE-3基因的表达检测和重组MAGE抗原的制备及其应用被引量：4
- 2002年
- 目的克隆MAGE-3基因并检测其在人食管癌组织中的表达情况；重组表达MAGE-1和MAGE-3抗原，用于食管癌的治疗性蛋白疫苗的免疫原性研究。方法RT-PCR法检测了MAGE-3在人食管癌组织中的表达情况。采 用DNA重组技术将MAGE-1和MAGE-3全长cDNA 克隆至pET30a(+)载体上，转化大肠杆菌BL21(DE3)，IPTG诱导表达，经SDS-PAGE 和 wes-tern blot鉴定后，制备其可溶性蛋白，研究其对人T细胞增殖能力的影响。结果MAGE-3基因 在食管癌组织中的表达率为50%（15/30）；在30例相应癌旁正常组织中未见表达。成功获得了MAGE-1和MAGE-3可溶性蛋白；人 T细胞能够对自身抗原递呈细胞加工处理的MAGE-1和MAGE-3蛋白产生应答。结论MAGE-1和MAGE-3蛋白可能是用于食管癌免疫治疗的免疫原性较强的靶抗原。
- 彭良平刘海燕冉宇靓王贵齐杨治华
- 关键词：MAGE-1MAGE-3重组蛋白T淋巴细胞免疫原性研究
- 识别肺癌上调表达的膜蛋白单抗抑制肺癌生长被引量：3
- 2010年
- 目的:分析研究抗肺癌24H7单抗的体内外功能,并初步鉴定其识别的抗原蛋白,为肺癌靶向治疗提供候选抗体药物及靶标。方法:采用活细胞免疫荧光及流式细胞荧光检测单抗与多种肺癌细胞的反应;应用CCK-8法和裸鼠体内成瘤实验鉴定单抗对肺癌细胞体外增殖及体内肿瘤生长的影响;同时采用免疫组化检测该单抗识别抗原在肿瘤及癌旁正常组织中的表达差异;免疫亲和层析纯化抗原。结果:活细胞免疫荧光及流式荧光结果显示24H7单抗识别抗原在12种不同肺癌细胞系膜上均有阳性表达;体外增殖及动物体内治疗实验显示该单抗在体外能抑制肺癌细胞的增殖,并在体内显著抑制肿瘤的生长,其抑制率达73.74%(P<0.01);免疫组化结果表明该单抗的靶抗原在肺腺癌组织中的表达较癌旁正常显著上调;免疫亲和层析显示靶抗原的分子量约为170 KD。结论:抗肺癌单抗24H7能够在体内外抑制肺癌的生长,其靶抗原可表达于肺癌细胞的膜上,且在肺腺癌组织上调表达,可能是一个肺腺癌靶向治疗的新靶标。
- 杨薇薇遇珑孙力超孙立新李江伟杨治华冉宇靓
- 关键词：肺癌膜蛋白功能性单克隆抗体
- 人肺腺癌A549细胞系干细胞样细胞的培养检测及其抗顺铂能力的研究被引量：1
- 2011年
- 目的:从人肺腺癌A549细胞系中培养获得含干细胞样细胞的球细胞(Sphere细胞),检测相关标志物表达及其对顺铂的耐药性。方法:采用含特定生长因子的无血清培养基诱导A549细胞的Sphere细胞形成,用亲脂荧光染料标记技术和免疫荧光法检测Sphere细胞中干细胞的存在,用流式细胞术检测干性标志物CD133,OCT4,CD56,CD117在Sphere细胞中的表达,用CCK8法检测顺铂处理后A549细胞及Sphere细胞的耐药性,并计算IC50。结果:A549细胞的Sphere细胞中含不对称分裂的干性标志物阳性细胞,且多种干性标志物表达比例升高,对顺铂耐药性也显著提高(P<0.05)。结论:人肺腺癌细胞系A549细胞在特定培养条件下可形成富集了干细胞样细胞的Sphere细胞,并对顺铂的抵抗能力增强。
- 马晓雯刘彤孙力超刘军杨治华冉宇靓
- 关键词：人肺腺癌细胞A549细胞顺铂耐药性
- 抑制消减杂交分离肿瘤血管生成相关基因被引量：4
- 2005年
- 为获得肿瘤血管生成相关基因 ,以便为抗血管形成治疗肿瘤的新策略提供有价值的靶位 ,采用人新鲜的肝癌、肺癌组织匀浆活化人脐静脉内皮细胞 (HUVEC) ,并构建了cDNA表达文库 .利用抑制消减杂交 (SSH)获得活化HUVEC高表达的基因片段 ,放射标记后筛选文库 .获得的阳性克隆进一步进行差异杂交筛选 ,去除假阳性 .共获得了 177个阳性克隆 ,对其中 74个克隆进行序列分析 ,发现它们代表 32个基因 ,其中多个与肿瘤血管生成相关 ,1个为与细胞色素c氧化酶亚单位Ⅲ同源的新基因 ,2个为功能未知的假定蛋白基因 .研究结果表明 ,用肿瘤组织匀浆模拟肿瘤内环境活化HUVEC ,并通过比较活化前后基因表达谱的差异可以分离到肿瘤血管生成相关的基因 .
- 刘海燕胡东冉宇靓遇珑孙立新刘军张新宇杨治华
- 关键词：脐静脉内皮细胞CDNA表达文库抑制消减杂交
- 一种抗食管癌血管内皮细胞的单克隆抗体
- 本发明涉及一种新的可与人食管癌组织的血管内皮细胞天然膜抗原及被人食管癌组织的血管内皮细胞分泌到细胞基质中的天然抗原结合的单克隆抗体，及其生产的杂交瘤细胞系，以及该抗体在制备可用于治疗人食管癌生长及转移的药剂中的应用。该单...
- 杨治华冉宇靓胡海
- 文献传递
- 一种抗DERLIN‑1人源化抗体的制备
- 本发明涉及一种抗DERLIN‑1人源化抗体的制备，进一步，本发明涉及一种抗癌细胞表面表达的DERLIN‑1蛋白的人源化抗体，编码该抗体的多核苷酸，包含该多核苷酸的表达载体以及含有所述表达载体的宿主细胞，以及它们在制备用于...
- 杨治华冉宇靓孙力超
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