刘建
- 作品数：12 被引量：16H指数：3
- 供职机构：宁夏医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金宁夏回族自治区自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 结核分枝杆菌H37Ra感染的THP-1细胞TGF-β1、Smad2、Smad3、TNF-α、IL-6 mRNA表达变化被引量：4
- 2022年
- 目的观察结核分枝杆菌H37Ra在不同感染复数及不同感染时间感染的THP-1细胞内TGF-β1/Smad2、3信号通路活化以及炎症因子TNF-αmRNA、IL-6 mRNA的表达变化,明确TGF-β1/Smads经典信号通路的激活程度是否与结核分枝杆菌感染的细菌量有关以及在结核分枝杆菌感染后的哪个时间阶段发挥主要作用。方法培养THP-1巨噬细胞及结核分枝杆菌H37Ra,建立H37Ra在相同时间点(感染24 h)不同感染复数(MOI=0、1、10、100)和在MOI=10,不同感染时间点(T=0 h、6 h、12 h、24 h)感染THP-1细胞的感染模型;用qRT-PCR检测不同感染复数及不同感染时间THP-1细胞中TGF-β1 mRNA、Smad2 mRNA、Smad3 mRNA、TNF-αmRNA、IL-6 mRNA。结果H37Ra感染24 h时,与空白对照比较,当MOI=1、10、100时,TGF-β1 mRNA的相对表达量先升高后降低,在MOI=10时表达最高(P<0.05);Smad2 mRNA的相对表达量降低(P<0.05);Smad3 mRNA相对表达量升高(P<0.05);TNF-αmRNA和IL-6 mRNA表达变化趋势基本一致,在MOI=1、10时升高不明显(P>0.05),MOI=100时升高(P<0.05)。H37Ra MOI=10时,随感染时间(T=6 h、12 h、24 h)延长,TGF-β1 mRNA的相对表达量呈现升高趋势(P均<0.05);Smad2 mRNA的相对表达量呈降低趋势(P<0.05);Smad3 mRNA相对表达量呈先升高后降低趋势,在T=6 h最高(P<0.05);TNF-αmRNA和IL-6 mRNA表达变化趋势基本一致,呈先升高后降低趋势,在T=12 h时最高(P<0.05)。结论相同感染时间,随着MOI值增加,结核分枝杆菌H37Ra感染的THP-1巨噬细胞中TGF-β1 mRNA表达先上调后降低,Smad2 mRNA表达下调,Smad3 mRNA表达上调,TNF-αmRNA、IL-6 mRNA相对表达量在MOI=100时升高;MOI=10时,随着感染时间延长,结核分枝杆菌H37Ra感染的THP-1巨噬细胞中TGF-β1 mRNA相对表达量升高,Smad2 mRNA表达下调,Smad3 mRNA表达先升高,6 h后降低,TNF-αmRNA和IL-6 mRNA表达早期上调,12 h后降低。结核分枝杆菌感染的细菌量与TGF-β1/Smads经典信号通路的激活程度有关,结核分枝杆菌感染后的
- 王立楠李艳宁刘建屈昱良郭乐杨宗强杨宗强
- 关键词：白细胞介素6
- 宁夏地区病毒性脑炎中新发博尔纳病病毒感染的研究
- 2010年
- 目的 研究宁夏地区新发博尔纳病病毒（BDV）在病毒性脑炎患者中的感染状况,分析病毒株的核酸序列、编码的氨基酸序列和病毒株的系统发生.方法 套式反转录实时荧光定量PCR检测60例病毒性脑炎患者血液标本;并对前期课题组检测的59例病毒性脑炎患者中BDV p24阳性样本和本实验PCR检测阳性标本使用ELISA法检测其对应脑脊液中p40抗体,对阳性标本进行连接测序,应用MEGA和DnaSP4.0软件对测序结果与国外标准株He/80、H1766、strain V等的核酸和氨基酸序列对比分析,构建病毒基因的系统发生树.结果 PCR检测119份血标本,发现有12份标本BDV p24阳性,阳性检出率为10.08%,7份BDV p40检测阳性,阳性率为5.88%;ELISA检测脑脊液核蛋白抗体,有2份阳性,阳性检出率为1.68%.基因聚合分析显示,7份BDV阳性的核酸序列中有6份与德国马源性的He/80株同源性达100%,1份仅有1个碱基发生同义突变;转录后的氨基酸对比分析显示,7份与He/80株完全一致;重构的基因系统发生树中可见宁夏病毒性脑炎患者BDV核苷酸序列与国外标准株形成一个中国（宁夏）-德国-日本的混合支系.结论 宁夏地区病毒性脑炎患者中可能存在BDV感染,其发生可能与动物的密切接触相关,病毒在种系发生中与德国马源性He/80株有极高的同源性,推断病毒有可能从国外传入本土,不排除病毒株变异的可能.
- 王振海刘建谢鹏
- 关键词：BORNA病病毒反转录聚合酶链反应酶联免疫吸附测定
- 宁夏地区牛脑组织博尔纳病病毒的感染状况
- 2010年
- 目的分析宁夏地区牛脑组织博尔纳病病毒(Borna disease virus,BDV)的感染状况,探讨阳性基因扩增片段与德国马源性标准病毒株He/80同源性。方法采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、荧光定量巢式逆转录酶聚合酶链反应(FQ-nRT-PCR)分别检测宁夏地区145例健康牛脑组织中BDVp40、BDVp24基因片段,对BDVp24阳性扩增产物进行基因序列测定,并应用BLAST和DNAsist 5.0软件对测序结果进行分析。结果 145例牛脑组织中4例BDVp40、BDVp24均阳性,阳性率为2.759%,且阳性BDVp24片段的核苷酸序列与He/80同源性最高,所编码氨基酸序列相同。结论宁夏地区牛脑组织中可能存在动物源性BDV的自然感染,阳性BDV p24核苷酸序列与He/80具有高度同源性,所编码的氨基酸序列相同。
- 杨娟刘建王振海
- 关键词：博尔纳病病毒
- 脊柱结核和布氏杆菌性脊柱炎的血常规差异分析被引量：1
- 2020年
- 目的:比较脊柱结核与布氏杆菌性脊柱炎血常规常用参数的差异.方法:选取宁夏医科大总医院脊柱骨科2013年1月~2019年1月经病原学检查或病理证实的脊柱结核病患者、布氏杆菌性脊柱炎患者的临床资料,将其分为结核组与布病组,比较两组患者血常规中白细胞总数(WBC)、中性粒细胞相对值(NEUT%)、中性粒细胞绝对值(NEUT#)、淋巴细胞相对值(LYM%)、淋巴细胞绝对值(LYM#)、嗜酸性粒细胞相对值(EOS%)、嗜酸性粒细胞绝对值(EOS#)、红细胞计数(RBC)、血红蛋白含量(HGB)、血小板计数(PLT)之间的差异.结果:结核组NEUT%、EOS%、PLT较布病组高,LYM%、LYM#较布病组低,差异均具有统计学意义(P<0.05);两组间其余指标差异无统计学意义(P>0.05).按性别分组后:结核组男性RBC、HGB、NEUT%、EOS%较布病组高,LYM%、LYM#较布病组低(P<0.05);结核组女性NEUT%、EOS%较布病组高,LYM%、LYM#较布病组低(P<0.05).按年龄分组后:年龄<40岁,结核组相比布病组NEUT%高而LYM%低(P<0.05);年龄40~59岁,结核组相比布病组NEUT%、EOS%、EOS#高而LYM%、LYM#低(P<0.05);年龄≥60岁,结核组相比布病组NEUT%高,而LYM%、LYM#低(P<0.05).结论:①脊柱结核和布氏杆菌性脊柱炎患者血常规某些参数存在差异,可能为二者的鉴别诊断提供依据;②脊柱结核较布氏杆菌脊柱炎血常规NEUT%高、LYM%低,且不受性别和年龄的影响,具有鉴别诊断价值.
- 刘建李勇爱王立楠王辉林剑文师志云牛宁奎
- 关键词：脊柱结核布氏杆菌性脊柱炎血常规
- 宁夏绵羊脑组织博尔纳病病毒的自然感染状况被引量：3
- 2010年
- 目的了解宁夏地区绵羊脑组织博尔纳病病毒(Borna disease virus,BDV)的自然感染情况,并分析其与德国马源性标准病毒株He/80的同源性。方法应用荧光定量巢式逆转录PCR(FQ-nRT-PCR)和RT-PCR分别检测宁夏地区163例绵羊脑组织中BDV p24、BDV p40基因片段,并对BDV p24阳性扩增产物进行测序,与国外标准病毒株进行比较。结果 163例绵羊脑组织中6例BDV p24、BDV p40均阳性,阳性率为3.68%(6/163)。测序后经基因序列比对,本实验检测阳性BDV p24片段的核苷酸序列与He/80同源性为100%。结论宁夏地区绵羊脑组织中可能存在动物源性BDV的隐性感染,阳性BDV p24核苷酸序列与He/80具有高度同源性。
- 赵莉刘建王振海
- BDV核蛋白在少突胶质细胞内表达定位的基础研究
- 2010年
- 目的 研究博尔纳病病毒核蛋白在转染的少突胶质细胞（oligodendroglial cell,OL）内的表达定位及其对细胞活性的影响.方法 应用RT-PCR检测转染细胞内BDVp40的基因片段,应用激光共聚焦显微镜和Western blot的方法观察核蛋白在细胞内的表达定位.应用MTT方法观察核蛋白对OL活性的影响.结果 在转染BDVp40基因片段的荧光表达质粒的OL内检测到BDVp40的基因片段;激光共聚焦显微镜提示核蛋白存在于细胞质和细胞膜中;Western blot的结果显示在细胞膜蛋白中存在核蛋白,而在细胞质中未检测到该蛋白;MTT法检测BDV核蛋白对OL活性具有明显的抑制作用.结论 通过研究转染的OL内稳定表达了BDV核蛋白,并将其定位在细胞的结构蛋白中,尤其在细胞膜中含量更为丰富,说明其可能在细胞的信号转导或介导病毒感染人胞过程中发挥关键作用.BDV核蛋白对OL的活性有抑制作用,这可能是BDV导致中枢神经系统损伤的机制之一.
- 王振海刘建谢鹏
- 关键词：博尔纳病病毒核蛋白少突胶质细胞
- 宁夏地区人畜BDVp24基因系统发生树构建和序列分析被引量：3
- 2010年
- 目的了解宁夏及其周边地区博尔纳病病毒（BDV）的感染状况和基因特征及其种系发生来源。方法采用巢式反转录实时荧光定量聚合酶链反应（FQ—nRT-PCR），检测119例病毒性脑炎（VE）患者和其密切接触的患病或健康牛205头、绵羊978只及脑血管病患者46例、多发硬化患者13例的外周血单核细胞BDVp24片段，检出的阳性序列连同前期检出的宁夏绵羊、VE患者和抑郁症患者阳性BDVp24基因序列与GenBank中5个国家7个动物种属29例BDVp24基因序列进行比对，分析其核苷酸和氨基酸序列的同源性，重新构建基因系统发生树。结果23例阳性检测标本连同3例前期检测序列基因聚合分析显示核苷酸之间的同源相似度为96．5％-100．0％，氨基酸的同源相似度为95_3％～100．O％。与德国马源性标准株HE80同源相似度较高。构建基因的系统发生树发现宁夏绵羊、VE患者和抑郁症患者同德国马和绵羊、奥地利马都各自形成了独立的支系，其余样本形成混合支系，其中宁夏的vE患者、牛、绵羊同德国马、日本绵羊形成德国-中国宁夏-日本混合支系。结论宁夏及其周边地区人和动物BDV的感染，存在区域源性BDV独立株和国外传人基因保守株的多源状态。
- 刘建柳英王振海谢鹏
- 关键词：博尔纳病病毒病毒性脑炎绵羊
- 宁夏地区绵羊博尔纳病病毒自然感染状况研究被引量：1
- 2010年
- 目的探讨中国宁夏地区绵羊博尔纳病病毒(Borna disease virus,BDV)的自然感染状况,并分析比较中国宁夏地区绵羊自然感染BDVp24基因序列与国外人和动物来源BDV分离株及其标准株StrainV和He/80的同源性。方法采用巢式逆转录荧光定量PCR(FQ-nRT-PCR技术)检测了中国宁夏地区268例绵羊PBMCs中BDVp24基因片段,对阳性标本FQ-PCR产物进行基因序列测定,测序结果应用BLAST软件以及DNAsist5.0软件对测序结果分析,与国外人与动物来源的BDV分离株以及标准株StrainV和He/80进行序列比较。结果268例中4例绵羊外周血BDVp24基因片段阳性,阳性率为1.49%;测序分析结果表明,宁夏地区绵羊感染的BDVp24的核苷酸序列与马源性病毒株H3575同源性最近,同源性为98.84%(85/86),与标准株StrainV和He/80同源性为94.19%和100%。并且它们编码的氨基酸序列相同。结论宁夏地区绵羊中可能存在动物源性的BDV自然感染,该地区感染的BDVp24核苷酸序列与马源性病毒株H3575、标准株StrainV和He/80存在高度的同源性,其感染来源可能相同亦或存在相互之间感染的可能。
- 刘建马彦王振海谢鹏
- 关键词：BORNA病病毒
- 脊柱结核和布鲁氏菌性脊柱炎患者外周血生化常规指标、ESR及CRP的水平变化及临床意义被引量：4
- 2021年
- 目的分析脊柱结核(STB)与布鲁氏菌性脊柱炎(BS)患者外周血生化常规指标、红细胞沉降率(ESR)及C反应蛋白(CRP)的水平变化和临床意义。方法选取宁夏医科大学总医院2013年1月至2019年1月住院行手术治疗的STB及BS患者共539例为研究对象,其中STB患者350例为STB组,BS患者189例为BS组。比较两组生化常规指标[血氯、清蛋白(ALB)、球蛋白、胆固醇(CHOL)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)]、CRP及ESR水平,比较两组不同年龄段、男性与女性患者上述指标水平。结果STB组AST、ALT、ALP水平低于BS组,ALB水平高于BS组,差异均有统计学意义(P<0.05)。年龄≤40岁患者中,STB组ALT水平低于BS组,差异均有统计学意义(P<0.05);年龄>40~60岁患者中,STB组ALB水平高于BS组,ALT水平低于BS组,差异均有统计学意义(P<0.05);年龄>60岁患者中,STB组ALT水平低于BS组,CHOL水平高于BS组,差异均有统计学意义(P<0.05)。男性患者中,STB组ALT、AST及ALP水平均低于BS组,ALB水平高于BS组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论BS与STB患者外周血AST、ALT、ALP、ALB水平存在差异,且与年龄和性别有一定关系,可能在BS与STB的鉴别诊断、疗效评估等方面具有一定的临床应用价值。
- 李勇爱刘建王辉林剑文王立楠师志云牛宁奎
- 关键词：脊柱结核红细胞沉降率
- 博尔纳病毒在宁夏的人和动物感染的检测被引量：3
- 2010年
- 目的对临床VE患者以及其本人接触动物的检测,探讨BDV在宁夏地区的感染状况及感染机制,并分析BDV核酸和转化后的氨基酸序列,构建病毒种系发生的来源。方法应用巢式逆转录酶聚合酶链反应结合荧光定量PCR检测患者及其接触的动物的外周血单核细胞的p24和p40基因片段。对检测阳性标本进行连接测序,应用MEGA和DnaSP4.0软件对测序结果同国外的标准株HE80、H1766、strainV等进行核酸和氨基酸序列对比分析,并构建病毒基因的系统发生树。结果在60例VE患者及其接触的710绵羊中,PCR检测发现有3例阳性,阳性检出率5%;9头绵羊阳性,阳性检出率为1.27%。基因聚合分析显示人和动物BDV的核酸序列和编码氨基酸序列与德国马源性的HE80株同源性高达100%,重构基因系统发生树可见宁夏VE患者和牛羊BDV核苷酸序列与国外的标准株形成宁夏-德国-日本的混合支系,同时宁夏绵羊BDV序列也形成了一个独立的支系。结论宁夏地区人和牛羊存在BDV的自然感染,并且人的感染存在动物源性,其传染途径很可能是呼吸道的传播可能引起脑炎的非特异性的临床症状,病毒在种系发生中与德国马源性HE80株有极高的同源性,病毒可能由国外引入本土,不排除病毒株变异的可能,人和绵羊之间存在相互传染的可能。
- 刘建马彦张颖王振海谢鹏
- 关键词：博尔纳病毒
