刘德铮
- 作品数：14 被引量：51H指数：4
- 供职机构：北京生物制品研究所更多>>
- 发文基金：卫生部临床学科重点项目广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生化学工程更多>>
- 百日咳毒素亚基基因的克隆与表达及其重组亚基的免疫学特性被引量：1
- 1998年
- 目的从百日咳包特杆菌ＣＳ株中克隆百日咳毒素（ＰＴ）及其各亚基的基因，并探讨在昆虫细胞中表达百日咳毒素亚基基因片段的可能性及表达产物的生物学特性。方法采用ＰＣＲ技术进行克隆，并通过限制性内切酶和Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ进行分析鉴定。利用重组杆状病毒技术，在昆虫细胞Ｓｆ９中表达各亚基基因，并通过免疫荧光实验进行分析鉴定，通过ＥＬＩＳＡ实验进行重组蛋白的免疫学特性评价。结果获得百日咳毒素及其各亚基的基因，并在昆虫细胞中表达了重组亚基。经体外聚合后的各重组亚基混合物与抗天然完整ＰＴ免疫血清的反应性和诱生特异性抗ＰＴ抗体的能力都明显高于各重组亚基单体混合物，含有Ｓ１重组亚基混合物诱生特异性抗ＰＴ抗体水平又明显高于不含Ｓ１重组亚基混合物的水平。说明百日咳毒素亚基单体仅具有很弱的诱生特异性抗ＰＴ抗体的能力，且抗完整ＰＴ的抗血清对百日咳毒素亚基单体也缺乏很好的识别作用。结论百日咳毒素诱导产生特异性抗体的能力依赖于聚合体的空间构型，而且其主要抗原决定簇位于聚合体的Ｓ１亚基上。
- 韩峰刘德铮肖詹蓉项金忠张鹏飞
- 关键词：百日咳百日咳毒素疫苗
- 无细胞百日咳疫苗效力国家参考品的建立
- 1998年
- 采用罐培养百日咳CS菌株，培养物经硫酸铵两段盐析、浸提后，再经蔗糖密度梯度离心，收集以FHA．PT为主的百日咳菌保护性抗原，经福尔马林解毒，制备成原液。该原液按照中国和日本的生物制品规程检定合格后，加入保护剂，稀释至18μgPN／ml，分装冻干制备成无细胞百日咳疫苗效力参考品。以JNIH3和JNIH－6参考品为标准，按照日本规程的小鼠脑腔攻击法标定其效力单位。根据14次效力试验所得的结果和日本NIH标定的结果，该批疫苗效力国家参考品的效力单位定为15PIU／ml。
- 候启明梁亚文张路民雷殿良肖詹蓉刘德铮杨景芳张嘉铭
- 关键词：百日咳疫苗参考品
- 应用戊二醛对百日咳抗原进行解毒的研究
- 1990年
- 本文报道应用戊二醛对百日咳保护性抗原解毒,并研究解毒条件与毒性及免疫原性的关系。在百日咳保护性抗原或无细胞百日咳菌苗的制造中,应用0.05%戊二醛(GA)于20℃作用4～6小时,再加入0.15～0.2%赖氨酸继续作用2小时,可以得到最佳解毒效果。用于制造无细胞百日咳菌苗符合菌苗检定要求,经37℃存放1个月后未见毒性逆转现象发生。
- 刘德铮肖詹蓉李万臣王兴宇赵宝明
- 关键词：戊二醛
- 提取百日咳保护性抗原的简易方法
- 1989年
- 用蓝色琼脂糖 CL—6B 做亲和吸附凝胶,仅用一步简单操作即可将1相百日咳菌在液体培养基中产生的 FHA 和 PT 抗原全部提纯出来。用 cs 菌株和 Tohama 菌株所得的提取物中,具有全部 FHA 和 PT 的生物学活性,共总抗原提取量二者没有区别,但 Tohama 菌株提取物的毒性略高于 cs 菌株。提取物中内毒素含量极微,未查出有凝集原存在。本方法为简化无细胞百日咳菌苗的研制过程提供了有利条件。
- 刘德铮赵宝明李万臣
- 关键词：PT
- 蛋白质溶液中内毒素污染去除方法研究进展被引量：1
- 1994年
- 蛋白质溶液中内毒素污染去除方法研究进展张景迎，刘德铮（生物化学教研室北京卫生部生物制品研究所）细菌内毒素（ＥＴ）是Ｇ－菌细胞壁内的、性质非常稳定的：具有生物学活性的脂质－糖复合物（ＬＰＳ）。ＥＴ广泛存在于化学制剂、生物制剂和药物，甚至ＤＮＡ重组产物中...
- 张景迎刘德铮
- 关键词：蛋白质溶液内毒素污染去除法
- 无细胞百白破疫苗加强免疫的安全性和免疫原性研究被引量：12
- 1995年
- 经无细胞百白破（APDT）或全细胞百白破疫苗（WPDT）基础免疫的儿童，一年后分三个组，进行加强免疫，观察其安全性和有效性。结果表明：APDT组和W．APDT组的局部和全身反应低于WPDT组，而且差异显著（P＜0．05）；抗-PT和抗-FHA的水平明显高于WPDT组（P＜0．01）。加强免疫后抗体增长的程度与基础免疫所用疫苗类型无关。三个试验组皆能产生高滴度的白喉和破伤风抗体。
- 侯启明梁雅文张路民秦进才周云冲杨景芳陈爽张嘉铭项美娟王安乾李万臣肖詹荣刘德铮赵金锁凌国荣
- 关键词：疫苗无细胞百白破百日咳白喉破伤风
- 去除百日咳菌抗原溶液中内毒素的简易方法被引量：1
- 1992年
- 本文通过层析条件的选择,建立了一种新的去除百日咳菌抗原溶液中内毒素(ET)的简易方法——DE_(62)离子交换柱层析。此法的ET去除率为99.9％,蛋白回收率>90％,DE_(62)的最大ET结合能力>6.5mg/ml膨胀胶。此外。DE_(62)具有交换容量大、流速快及再生效果好等优点。
- 张景迎刘德铮
- 关键词：内毒素血凝素
- 无细胞百白破疫苗加强免疫一年后的血清抗体水平被引量：2
- 1996年
- 用无细胞百白破疫苗（DTPa）和全细胞百白破疫苗（DTPw）分别进行基础免疫，再用DTPa或DTPw加强免疫，一年后对免疫儿童进行了血清抗体检测。结果各类抗体均较加强免疫后一个月明显下降，3个组中抗—FHA虽有所下降，但均在保护水平以上（＞20EU／ml），抗—PT抗体只有DTPa组大于20EU／ml。3个组中的大多数儿童的百日咳凝集抗体均＜1：320，而抗白喉类毒素（抗—DT）、抗破伤风类毒素（抗—TT）抗体均在保护水平以上。
- 肖詹蓉侯启明杨景芳李万臣项美娟梁亚文张路民周云冲傅惠兰凌国荣赵金锁陈爽李立申文生刘德铮
- 关键词：无细胞百白破疫苗血清抗体水平生物制品
- 无细胞百日咳菌苗的简易制备方法及其检定
- 1993年
- 报道一种简易制备无细胞百日咳菌苗(APV)的方法。SDS—PAGE证实抗原纯度高;免疫小鼠血清ELISA滴度高。此外,小鼠毒性、家兔热原及效力试验显示制得菌苗均符合规程要求。本方法是一种可行的候选方法。
- 张景迎刘德铮
- 关键词：百日咳丝状血凝素疫苗
- 百日咳毒素的分子生物学研究进展
- 1996年
- 韩峰刘德铮张鹏飞
- 关键词：疫苗分子生物学
