刘晓佳
- 作品数：7 被引量：10H指数：2
- 供职机构：桂林医学院附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金桂林市科学研究与技术开发项目广西壮族自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- LMP1瞬时过表达对鼻咽癌CNE2细胞迁移的影响被引量：1
- 2014年
- 目的 :探讨潜伏膜蛋白1(latent membrane protein 1,LMP1)瞬时过表达对鼻咽癌CNE2细胞迁移的影响及其可能的作用机制。方法 :成功构建重组真核表达载体pEGFP-C1-LMP1,并将其瞬时转染至CNE2细胞,激光共聚焦显微镜下观察LMP1在CNE2细胞中的定位,Transwell法检测LMP1对CNE2细胞迁移和侵袭能力的影响,实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测LMP1和Ras相关C3肉毒素底物1(Ras-related C3 botulinum toxin substrate 1,Rac1)mRNA及蛋白的表达。结果 :pEGFP-C1-LMP1成功转染至CNE2细胞后,可见LMP1主要表达于细胞膜和部分细胞质中,CNE2细胞的侵袭和迁移能力明显低于转染空载体的对照组(P<0.05),CNE2细胞中LMP1 mRNA及蛋白的表达水平明显高于转染空载体的对照组(P<0.01),而Rac1 mRNA及蛋白的表达水平明显低于转染空载体的对照组(P<0.05)。结论 :LMP1瞬时过表达可抑制鼻咽癌CNE2细胞的迁移,这一作用可能与Rac1表达下调有关。
- 刘晓佳谭宁闫亓徐宾徐伶俐曾思恩
- 关键词：鼻咽肿瘤肿瘤浸润RAC1潜伏膜蛋白1
- 潜伏膜蛋白1基因真核表达载体的构建及其在鼻咽癌细胞中的表达
- 2014年
- 目的:构建真核细胞中表达潜伏膜蛋白1(LMP1)基因的增强荧光表达载体,观察其在鼻咽癌细胞中的表达。方法:从鼻咽癌C15细胞中获取编码LMP1的cDNA片段,经双酶切亚克隆到pEGFP-C1质粒载体,构建pEGFP-C1-LMP1真核表达载体。重组质粒经双酶切和测序鉴定,利用脂质体介导的方法将pEGFP-C1-LMP1体外瞬时转染鼻咽癌CNE2细胞,激光共聚焦显微镜观察LMP1的表达及其细胞内定位。结果:重组载体经SalⅠ和BglⅡ双酶切后,行琼脂糖凝胶电泳,可见1条与理论预测值一致的目的条带。DNA序列鉴定证实插入片段与GenBank提供的序列一致。将pEGFP-C1-LMP1瞬时转染鼻咽癌细胞株CNE2后,LMP1基因表达产物定位于细胞膜和细胞质中。结论:成功构建LMP1真核表达载体,并可在鼻咽癌CNE2细胞株中表达。
- 刘晓佳谭宁田晶曾思恩
- 关键词：鼻咽肿瘤潜伏膜蛋白1重组质粒瞬时转染
- 莲心碱对膀胱癌细胞T24增殖及其周期的调控被引量：2
- 2014年
- 目的通过莲心碱作用于膀胱癌细胞T24,研究其对膀胱癌细胞T24增殖的影响。方法使用不同浓度的莲心碱处理膀胱癌细胞T24,通过CCK-8实验及克隆形成实验,检测莲心碱对细胞增殖的影响;对细胞进行PI染色后,使用流式细胞仪,检测莲心碱对T24细胞周期的影响;通过实时定量PCR,检测莲心碱作用后T24细胞的p21基因mRNA的改变。结果莲心碱对膀胱癌细胞T24增殖有明显的抑制作用,各剂量组(1.562 5、3.125 0、6.250 0、12.500 0、25.000 0μg/mL)与甲醇对照组差异有统计学意义(P<0.05),并呈剂量依赖性;细胞周期检测结果显示,莲心碱将T24细胞阻滞在S期;实时定量PCR检测结果显示,莲心碱提高T24细胞p21基因的mRNA。结论莲心碱对膀胱癌细胞T24具有增殖抑制并将其阻滞在S期,该作用机制可能与p21表达上调有关。
- 闫亓张天禹谭宁徐宾徐伶俐刘晓佳
- 关键词：莲心碱膀胱肿瘤细胞增殖细胞周期P2
- 鼻咽癌患者中血清has-miR-19b的特异性表达及其分子通路初探被引量：1
- 2013年
- 目的:比较血清has-miR-19b在鼻咽癌患者与非癌人群以及鼻咽癌患者放化疗前后的表达差异,探讨其作为鼻咽癌临床诊断潜在分子标记物的意义;同时对has-miR-19b的靶基因SOCS1进行检测,为以后鼻咽癌的分子靶向治疗提供依据。方法:收集鼻咽癌患者、鼻咽癌患者放化疗后、非癌人群血清各30例,通过荧光定量PCR(RT-PCR)技术检测血清has-miR-19b的表达情况,同时通过免疫组化技术检测SOCS1在鼻咽癌患者与非癌人群鼻咽部组织蜡块中的表达情况。结果:(1)与非癌人群相比,血清has-miR-19b在鼻咽癌患者中有明显增高的趋势(P<0.05),鼻咽癌患者放化疗前后,has-miR-19b表达差异无统计学意义。(2)SOCS1在30例非癌人群鼻咽部组织中,有25例呈阳性表达,而在鼻咽癌组织中均呈阴性表达。has-miR-19b与SOCS1存在相关性(r=-0.573,P<0.05)。结论:(1)血清has-miR-19b可能作为鼻咽癌临床诊断的潜在分子标记物。(2)has-miR-19b可能通过调节靶基因SOCS1来调控鼻咽癌的发生。
- 曾思恩肖胜军王喜悦刘晓佳刘勤
- 关键词：鼻咽肿瘤
- LMP1瞬时过表达对鼻咽癌CNE2细胞迁移的影响及其作用机制的探讨
- 目的:鼻咽癌是我国南方高发恶性肿瘤，EB病毒感染几乎与所有未分化和低分化鼻咽癌都有关，EB病毒编码的潜伏膜蛋白1(latent membrane protein 1，LMP1)是近年研究病毒在人类致癌作用中受到关注的蛋白...
- 刘晓佳
- 关键词：潜伏膜蛋白1瞬时转染鼻咽肿瘤CNE2细胞
- 文献传递
- 莲心碱促进膀胱癌5637细胞凋亡增强Caspase-7表达及活化被引量：3
- 2015年
- 目的研究莲心碱(Liensinine)对膀胱癌细胞株5637凋亡的影响,初步探讨其作用机制。方法使用CCK-8法及克隆形成实验检测莲心碱对5637细胞增殖的抑制作用;通过流式细胞术Annexin V-FITC/PI双染法测定莲心碱对5637细胞凋亡的影响;采用Western blot技术分析细胞凋亡相关基因Caspase-7表达状况。结果 CCK-8法及克隆形成实验结果均表明莲心碱对膀胱癌细胞5637增殖有明显的抑制作用,并呈剂量-效应关系。流式细胞术结果提示莲心碱可使膀胱癌5637细胞发生早期凋亡;Western blot检测结果显示莲心碱增强5637细胞Caspase-7表达并促进其活化。结论莲心碱可抑制5637细胞增殖,使其发生早期凋亡,其作用机制可能与促进Caspase-7表达及活化有关。
- 徐宾张天禹谭宁闫亓徐伶俐刘晓佳高漓
- 关键词：膀胱肿瘤生物碱类细胞凋亡半胱氨酸内肽酶类莲心碱CASPASE-7
- 羧基末端结合蛋白1对肝癌细胞HepG2增殖的影响被引量：2
- 2014年
- 目的研究羧基末端结合蛋白1(C-terminal binding protein1,CtBP1)对人肝癌细胞HepG2增殖的影响及机制。方法采用CtBP1 siRNA转染HepG2细胞,实验分为4个组:空白对照组、转染试剂对照组、阴性序列对照组与干扰组。于转染后不同的时间收集细胞,用MTT法检测细胞增殖、流式细胞术检测细胞周期及凋亡情况。结果 CtBP1 siRNA转染有效抑制了HepG2细胞中CtBP1蛋白表达,与空白对照组比较,转染后72 h后,CtBP1蛋白下调了57.80%。CtBP1沉默后细胞生长受到抑制(P<0.05),转染后24、48、72、96 h生长抑制率分别为22.34%、52.15%、53.97%和54.77%;而对细胞周期分布无明显影响(P>0.05);但CtBP1表达下调有促凋亡作用,与对照组相比,干扰组的细胞凋亡率显著升高(P<0.05)。结论 CtBP1沉默能抑制HepG2细胞增殖,其机制是通过促凋亡来实现的。CtBP1能促进肿瘤生长和抑制凋亡,是潜在的肿瘤治疗靶点。
- 李运千黄承信曾思恩刘晓佳刘勤肖胜军
- 关键词：肝细胞肝癌RNA干扰细胞增殖凋亡
