刘艳艳
- 作品数：8 被引量：8H指数：1
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院基础医学院基础医学研究所更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- CD133及ALDH在肿瘤侵袭中的作用及机制研究
- 第一部分CD133对直结肠癌侵袭能力的作用研究及机制探讨：
CD133（prominin-1）是目前文献中使用率较高的干细胞表面标记分子。CD133在直结肠癌细胞中广泛表达，但其分子本身在结肠癌侵袭转移中的作用及机...
- 刘艳艳
- 关键词：干细胞标记病毒检测致病机理
- CD133+肿瘤细胞在体外肿瘤生长和侵袭中的作用
- 本文综述了CD133+肿瘤细胞在肿瘤生长和转移中的作用。根据文献，选择CD133表达阳性的两种结肠癌细胞系COLO320DM和HCT116，流式细胞术分析CD133在两种肿瘤细胞系中的表达。通过实验研究，在混合细胞群中，...
- 张敏刘艳艳赵文晶卞小翠冯海凉顾蓓杨振丽李站稳刘玉琴
- 关键词：体外侵袭肿瘤转移
- 小鼠树突状细胞肉瘤中SRS19-6MuLV病毒的检测
- 目的检测小鼠树突状肉瘤(DCS)细胞中小鼠白血病病毒SRS19-6MuLV存在的情况。方法利用pr(?)mer5软件,根据引物设计原则设计能扩增含有SRS19-6MuLV特异性片段(PRO-HV区)的一对引物,PCR法扩...
- 刘艳艳顾蓓卞晓翠冯海凉杨丽娟刘玉琴
- 文献传递
- PI3K和MEK联合抑制增强对K-ras基因单突变肺癌细胞的生长抑制作用被引量：1
- 2014年
- 目的 观察RAS/MEK/ERK通路单独抑制或联合PI3K/AKT/mTOR通路抑制对非小细胞肺癌A549细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其相关分子机制.方法 常规培养A549细胞,分别以不同浓度的PI3K抑制剂GDC-0941和MEK抑制剂AZD6244单独或联合处理,采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测抑制剂对细胞增殖的影响,根据MTT法检测结果确定联合给药的浓度.将A549细胞分为空白对照组、0.5 μmol/L GDC-0941处理组、低浓度联合组（0.5 μmol/L AZD6244＋ 0.5μmol/LGDC-0941）、5.0 μmol/L GDC-0941处理组和高浓度联合组（5.0 μmol/L AZD6244＋ 5.0 μmol/L GDC-0941）,采用流式细胞术检测细胞周期和凋亡,采用Western blot法检测抑制剂靶点下游与细胞周期和凋亡相关的蛋白表达.结果 AZD6244对A549细胞的增殖抑制作用呈浓度依赖性,但浓度平台出现时,增殖抑制率仅为25.5％.AZD6244联合GDC-0941对A549细胞的生长抑制作用增强,但联合用药的效果与两种抑制剂联合使用的浓度有关.0.5 μmol/L GDC-0941处理组和低浓度联合组A549细胞的凋亡率分别为（20.70±0.99）％和（18.65±0.92）％,差异无统计学意义（P＞0.05）;5.0μmol/L GDC-0941处理组和高浓度联合组A549细胞的凋亡率分别为（37.85 ±3.18）％和（52.27±4.36）％,差异有统计学意义（P＜0.01）.低浓度联合组A549细胞的细胞周期没有明显改变;高浓度联合组中G0/G1期细胞增加,S期细胞减少.单独使用AZD6244可明显抑制pERK的表达水平,但pAKT的表达增加.单独使用GDC-0941可明显抑制pAKT的表达水平,但pERK的表达增加.低浓度联合组中,细胞周期和凋亡蛋白的表达均没有发生明显改变;高浓度联合组中,cyclin D1、cyclin B1表达量受到抑制,PARP剪切增加,Bcl-2/Bax比值下降.结论 对于K-ras基因单突变的非小细胞肺癌A549细胞,单独使用一条信号通路的抑制剂会反馈性激活另一信号通路.RAS/MEK/ERK和PDK/AKT/mTOR两条通路的同时抑制呈协同�
- 杨振丽李占稳冯海凉卞晓翠刘艳艳刘玉琴
- 关键词：K-RAS基因
- 囊泡膜蛋白相关蛋白VAP33对小鼠树突状细胞肉瘤恶性行为的抑制作用
- 目的:探讨囊泡膜蛋白相关蛋白(VAP33)过表达对小鼠树突状肉瘤细胞DG6增殖及侵袭转移相关生物学特性的影响。方法:反转录获得VAP33cDNA,构建与GFP融合基因慢病毒表达载体。用病毒感染DG6细胞,荧光显微镜挑选,...
- 赵文晶杨振丽顾蓓冯海凉张敏刘艳艳李占稳刘玉琴
- 关键词：增殖
- 文献传递
- USP22通过Sirt1抑制结肠癌细胞的侵袭
- 目的：泛素特异肽酶22(ubiquitin-specific processing peptidase 22,USP22)为hSAGA 转录辅助因子复合物的亚 基,通过对组蛋白尾部的特定氨基酸去泛素化修饰使转录复 合物到...
- 敖宁刘艳艳冯海凉李占稳刘玉琴
- 外源EGFP表达对肿瘤细胞体外生物学行为的影响被引量：1
- 2012年
- 目的探讨常用的可视化细胞标记技术-外源EGFP表达对肿瘤细胞生物学行为的影响。方法选择不同的携带EGFP的载体,利用脂质体转染或慢病毒感染技术,在不同肿瘤细胞系中表达外源EGFP,筛选稳定表达外源EGFP的细胞系,MTT法检测细胞体外增殖能力;细胞分析计数仪(CasyTT型)检测细胞大小;Transwell体外迁移实验检测细胞体外侵袭能力。结果成功建立了稳定表达外源EGFP的人结肠癌细胞系HCT116-GFP、HCT116-EG-FP、COLO320DM-EGFP和小鼠树突状细胞肉瘤细胞系DG6-EGFP。HCT116-EGFP细胞、COLO320DM-EGFP细胞和DG6-EGFP细胞的体外增殖能力明显降低;HCT116-EGFP细胞体积增大:平均直径分别为(14.53±0.07)μm(HCT116)和(18.28±0.16)μm(HCT116-EGFP)(P<0.01);HCT116-EGFP细胞的体外侵袭能力明显降低(P<0.01)。结论外源EGFP可视化标记细胞后,可能会影响肿瘤细胞的生物特性,利用这些模型进行科研时,需注意对相关指标的影响。
- 张敏赵文晶冯海凉刘艳艳李占稳刘玉琴
- 关键词：EGFP肿瘤细胞系
- GDC-0941联合AZD6244对KRAS突变非小细胞肺癌细胞的增殖抑制作用被引量：5
- 2013年
- 目的探讨选择性P13K抑制剂联合MEK抑制剂对携带KRAS／VI＇EN双突变的非小细胞肺癌细胞系NCI-H157的生长增殖和凋亡的影响及相关分子机制。方法常规培养NCI-H157细胞并分别用不同浓度的P13K抑制剂GDC-0941和MEK抑制剂AZD6244单独或联合作用，四甲基偶氮唑盐（MTT）法初步观察对细胞生长增殖的影响。根据观察结果确定联合给药的浓度。然后分为无药对照组、P13K抑制剂单独用药组（GDC-0941，0．5和5．0μmol／L）、联合I组（0．5μmol／LAZD6244＋0．5μmol／LGDC-0941）及联合Ⅱ组（5．0μmol／LAZD6244＋5．0μmol／LGDC-0941）。细胞经过不同的作用后，MTT法绘制增殖抑制曲线；平板集落形成法检测集落形成能力的改变；流式细胞仪检测细胞凋亡率及周期分布；Westernblot检测不同组中抑制剂靶点下游周期及凋亡相关蛋白表达的差异。结果抑制剂单独作用于NCI-H157细胞可抑制其生长增殖。联合用药组与P13K抑制剂单独用药组相比，细胞的生长增殖抑制作用增强，联合I组表现为两药协同作用，联合Ⅱ组表现为两药相加作用；集落形成能力下降[（77．20±1．54）个／孔比（61．50±2．12）个／孔。P〈0．01]和[（51．004-4．00）个／孔比（22．50±3．53）个／孔，P〈0．01]；凋亡率增加[（18．30±0．82）％比（21．32±0．56）％，P〈0．01]和[（27．14±1．58）％比（42．45±4．42）％，P〈0．01]；细胞周期发生改变，联合用药组G0／G1期细胞增加，S期细胞减少（P〈0．05）。Westernblot显示，联合用药组与P13K单独用药组相比，eyelinD1、eyelinB1表达量减少，p21表达量和PARP剪切增加，bel-2／bax的比值下降。结论P13K抑制（AZD6244）可协同MEK抑制（GDC-0941）诱导NCI-H157细胞发生生长增殖抑制和凋亡，但联合用药效果受到药物剂量的影响。
- 李占稳杨振丽冯海凉卞晓翠刘艳艳刘玉琴
- 关键词：肿瘤细胞
