吴庭枫
- 作品数：25 被引量：33H指数：3
- 供职机构：武汉大学人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省卫生厅重点科研课题苏州市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- A2B5+/CD133-与CD133+/A2B5-胶质瘤干细胞球表型特点及其移植瘤病理实验研究
- 目的:探索A2B5+/CD133-与CD133+/A2B5-胶质瘤干细胞球的表型特点及其移植瘤病理，明确两类胶质瘤干细胞（GSCs）生物学特性的异同。 方法:使用神经干细胞培养基（NSCM）培养人脑胶质瘤细胞 SHG-...
- 吴庭枫
- 关键词：表型特点生物学特性
- 文献传递
- 锌指蛋白“Zfx”在人脑胶质瘤细胞株及组织中的表达水平
- 目的探讨Zfx在人脑胶质瘤细胞株和人脑胶质瘤组织中的表达水平。方法采用荧光实时定量PCR方法检测本院收集的35例自2009年3月至2010年9月手术切除并病理证实的脑胶质瘤肿瘤标本(按WHO中枢神经系统肿瘤2000分类标...
- 苏作鹏黄煜伦孙婷李斌戴燕芳吴杰吴庭枫陈三送周幽心杜子威
- 关键词：脑胶质瘤ZFX实时定量PCRWESTERNBLOT
- 文献传递
- 黑色素瘤细胞颅内移植瘤模型的建立被引量：2
- 2012年
- 黑色素瘤是恶性程度最高的肿瘤之一，原发性黑色素瘤颅内转移发生率高达75％。我们使用A375黑色素瘤细胞株建立颅内移植瘤模型，同时建立皮下模型并与前者在致瘤特点与移植瘤病理上进行比较。
- 吴庭枫陈三送孙婷陈雄辉陈桂林韦永新谢学顺周幽心杜子威
- 关键词：移植瘤模型颅内转移原发性黑色素瘤A375
- X染色体耦联锌指蛋白在人脑胶质瘤干祖细胞中的表达及意义被引量：1
- 2012年
- 目的探讨X染色体耦联锌指蛋白(Zfx)在人脑胶质瘤干祖细胞中的表达及意义。方法逆转录PCR方法检测人脑胶质瘤干祖细胞SU2及其分化后贴壁细胞中mRNA的表达;细胞免疫组化检测人脑胶质瘤干祖细胞SU2中Zfx、CD133、nestin的表达;然后在含有10%胎牛血清培养液中诱导SU2分化,并检测分化后的细胞中Zfx、S100、GFAP的表达。结果 Zfx在胶质瘤干祖细胞SU2及其分化后贴壁细胞中的mRNA均有表达。Zfx在人脑胶质瘤干祖细胞SU2中的蛋白水平表达高,但SU2经诱导分化后细胞中Zfx蛋白水平表达减弱。结论 Zfx在人脑胶质瘤干祖细胞中高表达,可能在人脑胶质瘤干祖细胞自我更新和分化抑制过程中起重要作用。
- 苏作鹏周幽心陈雄辉陈金明陈三送吴庭枫陈桂林
- miR-16调控NF-κ B1和MMP9表达抑制胶质瘤的侵袭和生长
- 目的：探讨miR-16在人脑胶质瘤表达以及与胶质瘤细胞株SHG4、U87和U373侵袭和生长的相关性,为miR-16作为治疗人脑胶质瘤的靶点奠定基础.方法：利用定量PCR检测miR-16、NF-κ B1在非瘤脑组织和不同...
- 杨天权吴庭枫赵朝辉陈桂林郭凌川周幽心杜子威
- 慢病毒载体介导红色荧光蛋白基因转染人脑胶质瘤干细胞的实验研究
- 2012年
- 目的探讨HIV-1来源的慢病毒载体介导红色荧光蛋白（RFP）基因转染人脑胶质瘤干细胞可行性和试验方法。方法用无血清干细胞培养基培养人脑胶质瘤干细胞，然后用细胞免疫荧光染色检测其干细胞特性表面标志物CDl33、Nestin表达情况。以HIV-1来源的慢病毒为载体，以RFP基因为目的的基因转染人脑胶质瘤干细胞，荧光显微镜下观察RFP阳性细胞表达情况及其转染率。MTT法检测转染后细胞与未转染RFP细胞组细胞增殖情况。再次用细胞免疫荧光染色检测转染后脑胶质瘤干细胞表面标志物CDl33、Nestin表达情况。结果红色荧光慢病毒转染胶质瘤干细胞体外连续培养后，RFP在干细胞中稳定表达，在荧光显微镜下即发出红色荧光，并且转染效率高。RFP．1entivirus转染后干细胞与未转染RFP组比较，生长曲线无明显差异，且转染后干细胞表面标志物仍表达阳性。结论采用HIV-1来源的慢病毒载体介导以RFP基因为生物标记物标记人脑胶质瘤干细胞是可行的，以慢病毒转染对干细胞的生长影响小，转染效率高。
- 陈金明周幽心陈桂林韦永新吴庭枫
- 关键词：胶质瘤干细胞慢病毒红色荧光蛋白
- miR-16通过调控NF-κB1／MMP-9信号通路抑制胶质瘤侵袭的实验研究被引量：7
- 2014年
- 目的探讨miR-16、核转录因子-κBI（NF—κB1）在人脑胶质瘤中的表达及其与胶质瘤细胞株SHG44、U87和U373侵袭生长的相关性。方法（1）收集苏州大学第一附属医院神经外科自2000年1月至2011年1月手术切除的29例胶质瘤组织和同期行减压术切除的6例正常脑组织标本，qRT-PCR检测标本miR-16、NF—κB1的表达。（2）将体外培养的U87、U373和SHG44细胞分为空白组、无义序列转染组，miR。16模拟物转染组，分别转染miR-16无义序列和miR-16模拟物，48h后qRT-PCR检测细胞miR-16、NF—κB1的表达；Transwell实验检测细胞侵袭能力；72h后Western blotting检测细胞NF—κB1、基质金属蛋白酶（MMP）-9和MMP-2蛋白的表达。（3）荧光素酶实验检测miR-16对NF-κB1基因的靶向调控作用。（4）以U87细胞作为阴性对照组，构建稳定表达miR-16的U87细胞株并建立颅内肿瘤、皮下肿瘤裸鼠模型（U87-miR-16组），免疫荧光、免疫组化分别检测2组裸鼠颅内肿瘤MMP9和Ki-67、NF-κB1、MMP9蛋白的表达；测量2组裸鼠皮下肿瘤的体积并绘制其生长曲线。结果（1）qRT—PCR显示miR-16在人脑胶质瘤中表达低于正常脑组织，且miR-16在Ⅰ级、Ⅱ和Ⅲ级、Ⅳ级胶质瘤中的表达量逐渐降低；NF-κB1胶质瘤中的表达高于正常脑组织，且NF—κB1在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级胶质瘤中的表达量逐渐增高，差异有统计学意义（P〈0.05）。（2）与空白组和无义序列转染组比较，miR-16模拟物转染组细胞miR-16表达增加，Ⅳ-KBl基因表达下降，侵袭能力下降，NF—κB1和MMP-9蛋白的表达下降，差异均有统计学意义（P〈0.05）。（3）荧光素酶实验显示pMIR-NF-κB1的荧光标准化比值明显高于pMIR-NF—κB1＋pre-miR-16组，差异有统计学意义（P〈0.05）。（4）与U87阴性对照组比较，U87-miR-16组模型后第24-42天裸鼠皮下肿瘤的体积较小，差异有统计学意义（P〈0.05）。与U87阴性
- 杨天权吴庭枫李炎炎赵朝辉黄煜伦周幽心杜子威
- 关键词：神经胶质瘤侵袭性
- 下调RNF138基因对胶质瘤细胞株U251增殖、凋亡及细胞周期影响的研究被引量：2
- 2013年
- 目的探讨RNA干扰下调胶质瘤细胞株高表达基因RNF138对胶质瘤细胞株U251体外增殖、凋亡以及细胞周期的影响。方法构建下调RNF138基因的siRNA,通过慢病毒转染导入胶质瘤细胞株U251,设立阴性干扰对照组及空白对照组,荧光显微镜观察转染效率;实时荧光定量PCR检测敲减效率;运用Cellomics仪器连续检测U251体外增殖情况;流式细胞仪检测U251凋亡及细胞周期变化情况。结果慢病毒载体高效、稳定转染U251细胞,靶向RNF138的siRNA有效抑制RNF138基因表达,使RNF138mRNA表达减少60%,U251体外增殖明显减缓,凋亡明显增加,细胞阻滞在G2/M期。结论 RNA干扰抑制RNF138基因表达可以明显抑制胶质瘤细胞株U251体外增殖,促进其凋亡,影响细胞周期,阻滞细胞分裂。
- 陈三送吴庭枫谢学顺周幽心杜子威
- 关键词：RNA干扰增殖凋亡细胞周期
- 稳定表达红色荧光蛋白的人脑胶质瘤干/祖细胞株的建立及其生物学特性观察
- 目的建立稳定表达红色荧光蛋白(RFP)的人脑胶质瘤干/祖细胞株。方法用带有红色荧光蛋白基因的慢病毒转染人脑胶质瘤干/祖细胞株(SU2),经流式细胞仪进行克隆筛选,荧光显微镜下观察RFP阳性细胞,PCR及DNA测序鉴定基因...
- 陈金明陈桂林韦永新谢学顺孙婷苏作鹏陈雄辉吴庭枫陈三送丁大冬曹广辉王君祥谭卫国冯鸣黄煜伦周幽心杜子威
- 关键词：胶质瘤干细胞荧光蛋白
- 文献传递
- 人源胶质瘤细胞株的建立及其生物学特性分析被引量：1
- 2015年
- 目的：建立新的胶质瘤细胞株,为肿瘤研究提供具备新特性的细胞工具。方法临床手术来源的胶质瘤组织进行培养传代,第10代后克隆建立细胞株（ SHG139）。经免疫荧光细胞化学技术检测蛋白表达,流式细胞术（ FCM）分析细胞增殖和细胞周期,染色体核型分析SHG139细胞的生物学特性。应用神经干细胞培养液（ NSCM ）培养 SHG139细胞,使其转化成胶质瘤干细胞球（SHG139s）,并检测SHG139s细胞的干性标志物。诱导分化SHG139s细胞后,检测分化细胞的胶质前体神经节苷脂（A2B5）、胶质纤维酸性蛋白（GFAP）、β-Ⅲ tubulin和半乳糖神经酰胺（GalC）的表达情况,进一步比较SHG139和SHG139s细胞颅内原位移植瘤的病理特征。结果成功建立的SHG139第20代和第60代细胞A2B5、GalC、GFAP、酸性钙结合蛋白（S-100）和vimentin表达均为阳性,与肿瘤组织的免疫组化结果及病理特征一致。 SHG139细胞传代后24 h内增殖显著,染色体总数为68条,多倍体较多。 SHG139s细胞中A2B5、巢蛋白（nestin）和神经元-神经胶质2型抗原（NG2）阳性比例分别为（84.12±9.96）%、（73.86±5.01）%和（73.37±2.09）%。 SHG139s细胞诱导分化后,贴壁细胞中GFAP、β-Ⅲ tubulin 和 GalC 的阳性比例分别为（92.89±2.24）%、（64.85±4.09）%和（33.57±4.14）%。 SHG139s细胞颅内移植瘤呈胶质肉瘤和星形-少枝胶质细胞瘤的多种形态,肿瘤血管和瘤周血管以鼠源性为主。结论 SHG139为星形胶质瘤细胞株, NSCM 培养可成功获得 SHG139s。SHG139s为A2B5＋ CD133-亚群细胞,具有自我更新和多向分化潜能。与SHG139细胞颅内移植瘤比较,SHG139s细胞颅内移植瘤具有更强的恶性度和侵袭性。
- 陈桂林李炎炎谢学顺陈金明吴庭枫李学涛王杭州周幽心杜子威
- 关键词：神经胶质瘤细胞移植CD133
