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周霞: 作品数：115 被引量：388H指数：11; 供职机构：石河子大学动物科技学院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金国际科技合作与交流专项项目教育部“新世纪优秀人才支持计划”更多>>; 相关领域：农业科学医药卫生生物学文化科学更多>>

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单增李斯特菌IspD蛋白生物信息学分析及表达纯化: 2023年; 【目的】对单增李斯特菌IspD蛋白的潜在生物学功能进行预测分析,并表达纯化IspD蛋白,为后续IspD蛋白的研究提供理论支撑。【方法】从NCBI中获得单增李斯特菌IspD的编码序列(基因ID:986270)和氨基酸序列(登录号:NP_464611.1),运用生物信息学软件对IspD蛋白编码序列进行开放阅读框分析,对氨基酸序列进行基本特性、空间结构、抗原表位、修饰化位点、蛋白互作及相似性等预测分析。对IspD蛋白编码序列进行密码子优化并合成,采用无缝克隆法构建重组质粒pET-32a-IspD并转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,将测序和双酶切验证正确的阳性克隆经IPTG低温过夜诱导表达,采用镍柱亲和层析法纯化得到IspD融合蛋白,利用SDS-PAGE和Western blotting验证IspD融合蛋白表达、纯化及反应原性。【结果】IspD蛋白编码基因为lmo1086,全长711 bp,共有4个开放阅读框,其中ORF1为最长的开放阅读框,可编码236个氨基酸。氨基酸序列分析显示,IspD蛋白无跨膜结构域、信号肽,是一种亲水性蛋白,亚细胞定位于细胞质中,为2-C-甲基-D-赤藓糖醇-4-磷酸胞苷酰基转移酶。α-螺旋、延伸链、β-转角和无规则卷曲参与了IspD蛋白二级结构的组成,三级结构模型预测与二级结构特点相符。IspD蛋白具有多个T、B细胞抗原表位、固定无序结构域、磷酸化、糖基化、甲基化及乙酰化修饰位点。蛋白互作分析显示,IspD蛋白与DXR、IspF、ipk等多个蛋白存在相互作用,IspD与其相互作用最强的DXR蛋白之间通过氢键、盐桥等实现连接和相互作用。试验成功构建了表达菌株pET-32a-IspD,SDS-PAGE结果显示,在上清中高表达IspD融合蛋白;Western blotting验证显示,纯化的IspD融合蛋白具有反应原性。【结论】IspD蛋白具有成为候选诊断、疫苗研发和药物靶点等的潜在价值。试验表达纯化得到IspD融合蛋白,可为后续IspD蛋白具体功能的研究提供理论依; 史超张伟张伟张梦琦何欣赵明彦周霞周霞张辉; 关键词：单增李斯特菌生物信息学纯化

败血性牦牛源圣保罗沙门菌的分离与鉴定: 2023年; 为阐明引起新疆和静县某牧场牦牛发生败血症的主要细菌性病原及病原的生物学特性,本研究剖检并采集发病牦牛的病变组织经细菌的分离培养、形态学观察、生化分析、PCR扩增沙门菌肠毒素(stn)基因和16S rRNA基因、血清分型及MLST分型鉴定、药敏试验和小鼠致病性试验及组织病理学观察等方法对分离菌株的生物学特性进行分析。结果显示,分离的2株菌在XLD和HE固体培养基上形成黑色、光滑、湿润、具有金属光泽的菌落,镜检为革兰氏阴性短杆菌;分离菌生化特征与沙门菌相似度达98%;PCR扩增结果显示,分别扩增到260 bp的stn基因及1500 bp的16S rRNA基因,16S rRNA基因的测序分析结果显示分离菌属于肠道沙门菌肠道亚种;血清型鉴定为圣保罗型沙门菌(1,4,5,12:e,h:1,2);MLST分型为ST3134;药敏试验结果显示分离菌对四环素耐药。将小鼠随机分为实验组与对照组,实验组通过灌胃接种菌液0.2 mL/只,接种剂量分别为5×10^(3)cfu/mL、5×10^(2)cfu/mL、5×10^(1)cfu/mL,结果显示感染后7 d,3个实验组小鼠死亡率分别为60%(3/5)、20%(1/5)和0(0/5)。采集病死小鼠肺、肝、脾组织制备病理切片,观察结果显示,感染组小鼠的脾、肺组织充血出血,肝细胞出现坏死等。本研究从疑似败血症牦牛脏器中分离到两株沙门菌,分型鉴定均为圣保罗沙门菌,该分型在新疆地区尚无报道。本研究为新疆牦牛沙门菌病的防控提供科学依据。; 马雪吴桐忠黄新张星星康立超韩猛立王子杰操义恒王巧梅俞杰张丽媛张予辉周霞钟发刚; 关键词：牦牛沙门菌血清分型

鸭胆汁中高纯度分泌型免疫球蛋白A制备被引量：1: 2009年; 目的:从鸭胆汁中分离纯化分泌型免疫球蛋白A(SIgA)。方法:采用饱和硫酸铵和不同浓度聚乙二醇PEG-6000沉淀法和Micro-Prep S离子交换法从鸭胆汁中提取SIgA。SIgA的纯度和活性经SDS-PAGE和ELISA法检测并进行比较。结果:建立了从鸭胆汁中分离纯化高纯度SIgA的方法。结论:用终浓度15%的PEG-6000沉淀法可从鸭胆汁中获得电泳纯的SIgA,其产量最高,活性最好。; 杨晓燕周霞汪铭书齐雪峰程安春; 关键词：SIGA 硫酸铵聚乙二醇

肠外致病性大肠埃希菌毒力因子研究进展被引量：6: 2020年; 近年来,在人类饲养的伴侣宠物、猪、牛、羊、家禽以及林麝等动物体内均已分离到一种能够引发肠外组织感染的大肠埃希菌--肠外致病性大肠埃希菌(extraintestinal pathogenic Escherichia coli,ExPEC)。ExPEC所具有的毒力特征使其能够在消化道以外的组织脏器中定殖增殖,在临床上能引起人和动物的严重感染甚至导致死亡。由于ExPEC导致的疾病存在治疗困难且易复发的特点,给医疗事业和畜牧业造成了巨大的经济损失。ExPEC较强的致病性与其携带的众多毒力因子密不可分。论文就已发现的ExPEC主要毒力因子研究进展进行分类阐述,并介绍了不同毒力因子在ExPEC感染宿主过程中的致病机制。; 柴迎锦顾晓晓邬琴周霞韩猛立钟发刚黄新张星星; 关键词：毒力因子致病机制

犊牛脑炎源大肠杆菌生物被膜形成及其影响因素分析被引量：2: 2020年; 为了解近年来石河子某规模化牛场死于脑炎的犊牛大脑中分离的大肠杆菌生物被膜形成及影响因素,试验以犊牛脑炎源大肠杆菌为研究对象,采用96孔板培养细菌结合结晶紫染色,分析该菌产生生物被膜(bacterial biofilm, BF)的能力及形成的最佳时间;定性和定量分析不同培养条件对该菌BF形成能力的影响。结果表明:犊牛脑炎源大肠杆菌BF形成能力较弱,从6 h开始形成,48 h时BF的形态趋于完整直至顶峰,之后BF网状结构逐渐解离,72 h时BF的结构消失;当在LB培养基中分别添加3%的葡萄糖、1%的蔗糖和0.5%的NaCl时BF的结构最完整;LB、BHI、TSB三种培养基比较,LB培养基中形成BF的形态最佳。致犊牛脑炎大肠杆菌形成BF能力较弱,培养至48 h时BF形态较为完整,在LB培养基中适当添加葡萄糖、蔗糖、NaCl可提高其形成BF的能力。; 顾晓晓邬琴邬琴马雪李劼李劼韩猛立周霞黄新吴桐忠张星星; 关键词：生物被膜

《分子病毒学》课程教学改革初探: 2014年; 该文探讨对硕士研究生《分子病毒学》课程教学大纲、教学课件、教学方法、考核方式等方面的改革，改变传统教学方式，使研究生系统掌握病毒学的基本概念、基本理论和研究方法熟悉本学科领域的热点及最新的科研成果，培养研究生科学和创新思维，提升研究生的学术创新能力。; 乔军周霞任艳孟庆玲陈创夫; 关键词：分子病毒学课程教学改革

石河子市售桶装纯净水及生活饮用水的细菌学检验被引量：3: 2007年; [目的]为评估石河子市饮用水的微生物学指标提供科学依据。[方法]用常规的微生物学检验和计数方法,对石河子市市售的7种品牌桶装纯净水及生活饮用水中的细菌总数和大肠杆菌菌群数进行了计数,检验了石河子市市民饮用水的卫生指标。[结果]检测的纯净水1#、2#、3#、4#(生活饮用水)、5#、6#、7#、8#的细菌平均总数分别为6.84、7.67、5.36、2.34、396.75、357.29、425.67、386.92个/ml。纯净水5#、6#、7#、8#的细菌总数均严重超标;纯净水1#、2#、3#、4(#生活饮用水)的细菌总数检测合格。8份水样中大肠杆菌菌群数报告均为阴性。纯净水1#、2#、3#、4(#生活饮用水)符合国标,纯净水5#、6#、7#、8#不符合国标。[结论]纯净水有4种品牌不符合国家规定的饮用水标准,其余3种品牌及生活饮用水均符合国家规定的饮用水标准。; 王晓兰周霞宋华荣; 关键词：桶装纯净水细菌总数

致羔羊脑炎粪肠球菌人工感染小鼠模型的建立被引量：4: 2007年; 选用断奶和成年的健康小鼠108只,分组经不同途径接种对羔羊具有致病性的粪肠球菌,分别进行半数致死量测定、临床症状观察、细菌学和病理学检查。结果显示两种日龄小鼠均对该菌株易感,最佳感染途径是腹腔注射,皮下注射次之,鼻腔不引起感染。感染小鼠表现出典型脑炎症状及病理变化。该菌株对小鼠的LD50为6.31×1010cfu,从感染死亡小鼠脑脊液、大脑、血液及部分实质器官中均分离出该菌。小鼠感染粪肠球菌与羔羊自然感染症状及病变相似。该动物模型的建立为进一步探究粪肠球菌感染的体内动态分布、感染机制、毒力因子研究及免疫应答奠定了基础。; 周霞剡根强马勋任晓燕; 关键词：粪肠球菌小鼠模型

绵羊肺源致病性大肠杆菌的分离鉴定及耐药性研究被引量：5: 2020年; 为了查清新疆石河子部分规模场引起羔羊死亡的原因,本研究对采集的病羊肺脏组织进行细菌分离,同时对分离菌株进行小鼠致病性试验、特异性基因PCR检测、药物敏感性试验和耐药基因PCR检测.结果显示:从病变肺脏组织分离得到10株细菌,分离菌为大肠杆菌,致病性强;分离菌株呈现多重耐药现象,对诺氟沙星、复方新诺明、氟苯尼考等17种抗生素耐药;检测到iutA、fyuA、ireA、hlyD和afa 5种毒力因子,strA、strB、aadA1/aadA2、Bla(TEM1)、Bla(OXA1)、Tet A和Tet B 7种耐药基因.本研究为该地区规模场绵羊感染大肠杆菌的防控和临床用药提供依据.; 郭强强杨彩虹柴迎锦顾晓晓钟发刚黄新张星星吴桐忠李劼韩猛立周霞; 关键词：绵羊毒力因子耐药基因药敏试验

致羔羊脑炎粪肠球菌asa1、ace和esp基因的克隆与原核表达被引量：1: 2014年; 肠球菌是人和动物肠道内仅次于大肠杆菌的常在菌，通常不引起发病，当抗生素大量使用或宿主免疫力低下时，宿主与肠球菌之间的共生状态失衡，肠球菌离开正常寄居部位进入其他器官，在毒力因子的作用下，引起感染性疾病的发生发展[1-2]。肠球菌引起的感染已越来越普遍，威胁着人类健康，也影响着畜牧业的发展[3-5]。目前发现的肠球菌毒力因子基因有10余种，在众多毒力因子基因中，有的基因控制产生特定的毒素，有的基因控制产生特定的蛋白质，这些物质吸附在宿主细胞或细胞外基质，抵抗巨噬细胞吞噬，造成组织损伤以及免疫逃避等，有的甚至能直接损伤宿主细胞[6]。因此研究肠球菌的毒力因子，有助于进一步明确肠球菌的致病机制，为寻求新的治疗方法和预防感染提供理论依据。; 郭秉娇王东王熙楚秦瑶王苇周霞剡根强; 关键词：粪肠球菌原核表达

周霞

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