夏维
- 作品数：4 被引量：7H指数：2
- 供职机构：上海市第一人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市浦江人才计划项目国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 抗人FcεRIα单克隆抗体的制备及初步鉴定被引量：2
- 2009年
- 目的制备鼠抗人IgE高亲和力受体FcεRIα的单克隆抗体并对其进行初步鉴定,为过敏性疾病的相关研究提供条件。方法用人FcεRIα重组蛋白作为抗原免疫BALB/C小鼠,常规方法进行融合,经筛选及克隆化建立可稳定分泌抗人FcεRIαmAb的杂交瘤细胞株,用ELISA、免疫荧光标记、荧光显微镜和流式细胞仪分析以及Western-Blot方法进行抗体的初步鉴定。结果筛选到2株可稳定分泌抗人FcεRIα单克隆抗体的细胞株,流式细胞术分析此2株抗体与CHO3D10细胞的结合率均大于95%,免疫荧光显示2株抗体均能与FcεRIα发生特异性反应。Western-Blot结果显示抗体轻重链分别约28 Kd与50 Kd。结论制备的两株FcεRIα的单克隆抗体可特异性与细胞表面FcεRI结合,可用于肥大细胞功能以及变态反应病临床治疗的进一步研究。
- 夏维杨峻蔺丽慧周娟王娟孔存权李莉
- 关键词：肥大细胞细胞融合
- 与过敏性哮喘发生有关的细胞信号转导通路被引量：4
- 2009年
- 夏维李莉
- 关键词：哮喘信号转导通路细胞因子气道炎症
- 自身免疫性疾病噬菌体抗体库的构建和初步鉴定被引量：1
- 2009年
- 目的构建系统性红斑狼疮（SLE）、类风湿性关节炎（RA）、强直性脊柱炎、干燥综合症（SS）、原发性胆汁性肝硬化（PBC）等自身免疫性疾病的噬菌体抗体库。方法从多例确诊的高滴度自身免疫病患者外周血淋巴细胞中抽提总RNA，用RT—PCR方法分别扩增免疫球蛋白分子轻链κ、λ基因及重链Fd基因。经SacI和XbaI限制性双酶切后，在T4连接酶的作用下，将轻链基因片段克隆入同样双酶切的pComb3Hss载体中以构建轻链文库，随后将重链Fd段PCR产物经XhoI和SpeI双酶切后载入同样处理的κ/λpComb3Hss载体，然后将重组质粒κ/λ—Fd-pComb3Hss转化大肠杆菌XL1-Blue。用辅助噬菌体M13K07感染XL1-Blue，则可在噬菌体表面表达出随机的重组抗体库。结果提取的淋巴细胞总RNA及合成的cDNA质量好，PCR扩增了长度为660bp的轻链κ、λ基因及重链Fd基因，成功构建了库容为4×10^4的轻链抗体库和库容为6×10^4的Fab片段噬菌体抗体库，酶切及PCR鉴定均正确无误。结论成功构建了自身免疫性疾病的噬菌体抗体库，为进-步筛选出高亲和力抗体打下了基础。
- 吴炜霖夏维陆慧琦熊怡淞杨再兴周琳韩焕兴仲人前
- 关键词：自身免疫疾病细菌噬菌体抗体
- 抗人FcεRlα单克隆抗体的制备及初步鉴定
- 目的制备鼠抗人IgE高亲和力受体FcεRIα的单克隆抗体并对其进行初步鉴定,为过敏性疾病的相关研究提供条件。方法用人FcεRIα重组蛋白作为抗原免疫BALB/C小鼠,常规方法进行融合,经筛选及克隆化建立可稳定分泌抗人Fc...
- 夏维杨峻李莉周娟王娟孔存权李莉
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