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林可霉素生物合成基因lmbH的回转化被引量：1: 1999年; 以ｐＩＪ７０２或ｐＩＪ４８６为载体构建了３个含有ｌｍｂＨ基因的重组质粒ｐＥＳＳ７０１、ｐＥＳＳ７０４和ｐＥＳＳ７０８，分别回转化林可霉素产生菌（Ｓ．ｌｉｎｃｏｌｎｅｎｓｉｓ）Ｂ４８，并随机挑选了６００个回转化克隆进行摇瓶初筛，以抑菌圈直径作为衡量林可霉素产量的标准。结果发现，每一种重组方案均得到了一个产量明显高于产生菌对照的回转化同源整合菌株，即６号（ｐＥＳＥ７０１）、８１号（ｐＥＳＥ７０４）和２４４号（ｐＥＳＥ７０８），折算成效价的提高率分别为７１．９％，１１０．６％和５３．６％。; 张长生张惠展姚峰丁建忠; 关键词：林可霉素生物合成

林可链霉菌黑色素生物合成基因的克隆与表达被引量：2: 1998年; 以pIJ702的melCl－C2基因为探针杂交林可链霉菌（Streptomyceslincolnensis）78－11染色体DNA，呈现出3．2kb的BamHI片段和2．6kb的SphI片段等一系列阳性条带。构建了含3．0～3．5kbBamHI片段的林可链霉菌78-11基因文库，从中分离克隆了黑色素生物合成基因melCl和melC2，并测定了含有mel基因的重组子pRSB336插入片段的全部DNA顺序。3152bpBamHI片段含有5个开放阅读框架，其中melCl和melC2与链霉菌属三个种的相应基因具有较高的同源性。此外，林可链霉菌78－11的melC2基因产物与人和鼠的酪氨酸酶轻微同源，分别为17．3％和24．5％。种种迹象表明，melCl、melC2和orf3组成黑色素生物合成操纵子结构。为了进一步鉴定上述克隆的林可链霉菌78-11黑色素生物合成基因，构建了分别含有新霉素抗性基因启动子和正反方向mel基因的重组质粒pPZ518和pPZ519，并转化变铅青链霉菌TK23。随机挑选的12个pPZ518转化子在R2YE培养基上均能分泌淡褐色色素，而所有的pPZ519和pES1转化子则都呈白色。; 张惠展姚峰孙丽萍; 关键词：黑色素 DNA序列测定异源表达

林可链霉菌转化系统的建立被引量：7: 1999年; 利用基因工程技术改良抗生素生产菌有着广阔的应用前景［１］。值得尝试的是将抗生素生物合成基因片段随机或定向组合导入生产菌中，通过同源重组方式提高生物合成途径中限速步骤相关基因的剂量，以达到提高生产菌发酵单位的目的。此战略被作者称为“基因回转化技术”，并...; 张惠展姚峰叶江; 关键词：原生质体再生

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姚峰