姜桔红
- 作品数：27 被引量：105H指数：6
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- 放射线诱导BRCA1出核效应对PARP抑制剂的增敏作用
- 2017年
- 目的探讨放射线诱导的乳腺癌1号基因(BRCA1)出核效应对同源重组介导的DNA双链断裂损伤(DSB)修复功能的影响及对聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)抑制剂的增敏作用。方法采用亚细胞纯化及蛋白印迹法检测乳腺癌细胞株MCF7经放射线处理后BRCA1的亚细胞定位,同时采用免疫荧光法检测细胞核磷酸化的H2AX组蛋白(γ-H2AX)、Rad51核焦点形成。流式细胞技术检测细胞凋亡、克隆形成实验检测体外细胞存活情况,并制作裸鼠皮下移植瘤模型,分为4组,分别为:对照组、放射+DMSO组、假照+ABT-888(ABT-888为PARP抑制剂)组、放射+ABT-888组,每5 d为1个治疗周期,周期第1天给予2 Gy照射或假照射。第2~5天给予溶剂(对照组、放射+DMSO组)或20 mg/(kg·d)的ABT-888(假照+ABT-888组),总共给予4个周期的治疗。检测各组的体内抑瘤作用。结果经4 Gy放射处理后,MCF7胞核BRCA1表达量减少,仅为对照组的41%,但胞浆内表达量明显增多,是对照组的2.14倍(P<0.01);同时MCF7细胞经4 Gy放射处理后ABT-888诱导的Rad51核焦点形成阳性细胞也较对照组明显减少(7%vs.30%,P=0.01)。放射线和ABT-888联合应用导致MCF7细胞凋亡率增高(19%),与对照组(5%)、放射+DMSO组(9%)或假照+ABT-888组(6.2%)相比较差异有统计学意义(P<0.01)。裸鼠移植瘤模型中放射+ABT-888组对肿瘤生长抑制作用明显优于假照+DMSO组或假照+ABT-888组(P<0.01)。结论放射线可诱导BRCA1出核并增强PARP抑制剂的抗肿瘤作用。
- 姜桔红顾莹莹刘静付欣鸽
- 关键词：PARP抑制剂
- 中国广东人CYP2F1基因遗传多态性研究被引量：4
- 2006年
- 目的检测广东地区正常人群和鼻咽癌患者中细胞色素P450酶系CYP2F1基因的多态性，并分析该基因遗传多态性与鼻咽癌易感性的关联。方法采用直接测序法检测40例鼻咽癌患者全血标本中CYP2F1基因全部10个外显子的多态性变化。对于等位基因频率较高的多态性位点，进一步采用错配聚合酶链反应．限制性片段长度多态性检测368例鼻咽癌患者和344名正常对照人群中该位点的等位基因频率。结果在40例鼻咽癌样本中，共检测到CYP2F1基因的35个单核苷酸多态性。其中，10个单核甘酸引起编码的氨基酸改变，1个移码突变，15～16bp之间插入C引起移码突变（15-16ins C），该等位基因频率为25％。但病例-对照分析却未能显示该位点突变与鼻咽癌易感的相关性（P〉0．05）。结论中国广东人的CYP2F1基因遗传多态性位点较多，但暂未发现与鼻咽癌的易感性关联的单一多态位点，多个多态性位点或不同基因多态性位点的协同互补作用可能才是鼻咽癌发生发展的关键影响因素。
- 姜桔红李智苏广贾卫华张如华余杏娟张萌文剑明曾益新
- 关键词：鼻咽肿瘤细胞色素P450遗传多态性
- Epstein-Barr病毒A73基因在鼻咽癌组织中的表达及其细胞内定位研究被引量：5
- 2003年
- 背景与目的:A73基因是EB病毒(Epstein-Barrvirus,EBV)BamHⅠA区右向转录物家族(BamHⅠArightwardtranscripts,BARTs)的主要成员,该家族基因转录表达于多种EB病毒相关细胞和肿瘤。本研究旨在了解A73基因在广东地区鼻咽癌病例中的表达特点,克隆该基因并明确其在上皮细胞中表达的亚细胞区域。方法:收集鼻咽癌组织、鼻咽非癌组织和鼻咽癌外周血淋巴细胞,常规培养SUNE1、B95.8、Raji和BJAB等细胞株,分别提取各样品的DNA和总RNA,以巢式PCR扩增W序列来检测EB病毒的感染,RT-PCR检测A73基因在各组织、细胞株中的表达,克隆测序后定向亚克隆入pEGFP-C2绿色荧光蛋白(greenfluorescenceprotein,GFP)表达载体,通过脂质体转染技术将其转入人胚肾上皮(humanembryokidney293,HEK293)细胞,RT-PCR检测A73mRNA的表达,并通过激光共聚焦显微镜观察融合蛋白表达的亚细胞区域。结果:除BJAB细胞株外,所有标本中均检测到EB病毒W序列;A73mRNA在鼻咽癌组织中的表达率为79.63%(43/54),在鼻咽非癌组织中则仅为4%(1/25),两者差异有显著性(P<0.001);鼻咽癌外周血淋巴细胞中未检测到A73表达,SUNE1细胞中A73的表达高于B95.8和Raji细胞。所构建的A73重组质粒可稳定表达于HEK293细胞,其编码蛋白的表达以胞浆为主。
- 李昂张晓实王鸿鹤姜桔红刘晓琼刘启才曾益新
- 关键词：EPSTEIN-BARR病毒鼻咽癌上皮细胞绿色荧光蛋白
- Sandwich教学法在临床肿瘤学教学中的应用被引量：6
- 2017年
- 目的探讨Sandwich教学法在临床肿瘤学中的教学效果。方法选取我校2013级临床医学专业100名医学本科生作为研究对象,将其中50名按照Sandwich教学法进行教学的学生纳入观察组,另外50名按照传统方法进行教学的学生纳入对照组。通过期末考试成绩与问卷调查评价Sandwich教学法的效果。结果观察组学生期末考试成绩为(88.62±5.72)分,高于对照组的(79.42±6.13)分,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。观察组效果好有42例(84.0%),高于对照组的11例(22.0%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论将Sandwich教学法应用于临床肿瘤学的教学,能够显著提高教学质量,具有较好的应用效果。
- 李谨顾莹莹姜桔红
- 关键词：临床肿瘤学教学效果
- 照射存活后代的鼻咽癌细胞株放射生物学特性研究被引量：7
- 2002年
- 目的 了解鼻咽癌细胞系CNE -2Z具有淋巴道转移倾向的克隆株H 5照射存活后代的放射敏感性和体内、体外细胞生长特性。方法 采用克隆形成率检测H 5及照射存活后代 2组癌细胞的放射敏感性 ;体外细胞增殖实验结晶紫染色法检测体外细胞增殖能力 ;用瘤细胞裸鼠体内移植观察 2组细胞的体内增殖、转移能力。结果 H5细胞照射存活后代的放射敏感性比未处理的H5细胞低 ,处理前 2Gy存活率 (SF2 )为 0 .3 0 ,平均致死剂量 (D0 )为 1.93Gy ,处理后细胞的SF2为 0 .49,D0 为 2 .56Gy ;体外细胞增殖减慢 ,有非常显著性差异 (P <0 .0 1) ;体内细胞增殖减慢 ,有显著性差异 (P <0 .0 5) ;成瘤率减小 ,转移率增高 ,体积倍增时间延长 ,但无显著性差异 (P >0 .0 5)。结论 照射存活后代的细胞放射敏感性降低 ,体内、体外细胞增殖减慢。
- 姜桔红唐泽立孙宁王捷余忠华
- 关键词：生物学特性鼻咽癌增殖
- 非小细胞肺癌小活检标本质量与EGFR基因突变检出率关系分析被引量：3
- 2021年
- 背景与目的表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor, EGFR)是非小细胞肺癌(non-small celllungcancer,NSCLC)患者中突变率最高的基因,准确检测出其突变类型有助于指导患者接受靶向药物治疗从而延长患者生存期。为了得到准确的检查结果,基因检测平台对标本质量有一定要求。已有文献报道标本的肿瘤细胞数量及其比例等会影响EGFR基因突变检出率,本研究旨在分析NSCLC小活检标本质量与突变扩增系统(amplification refractory mutation system, ARMS)法检测EGFR基因突变检出率的关系。方法收集299例小活检肺腺癌病例的临床特征、在显微镜下评估切片的肿瘤细胞数量及比例、标本提取的DNA浓度、EGFR基因突变检测结果,分析标本质量与EGFR基因突变检出率的关系。结果肿瘤细胞数≤500组与>500组EGFR基因突变阳性率分别为40.7%(11/27)、43.8%(119/272),两者间无统计学差异(P=0.764)。DNA浓度≤20.4 ng/μL组及>20.4 ng/μL组的基因突变阳性率分别为42.7%(64/150)、44.3%(66/149),两者间无统计学差异(P=0.776)。肿瘤细胞比例≤30%及>30%组的阳性率分别为29.4%(20/68)、47.6%(110/231),两者间存在统计学差异(P=0.008)。多因素Logistic分析显示男性、甲状腺转录因子1(thyroid transcription factor-1, TTF-1)阴性、有吸烟史及肿瘤细胞比例<30%是影响EGFR基因突变低检出率的主要因素。结论在达到检测的最低要求后,肿瘤细胞比例仍可影响EGFR基因突变检出率。有必要在基因检测切片后再次评估最后一张切片的肿瘤细胞比例,对于肿瘤细胞比例过低的标本,建议通过显微切割等方法富集肿瘤细胞,提高其肿瘤细胞比例,得出更准确的检测结果。对于无法进行肿瘤细胞富集的标本,可行循环肿瘤DNA(circulating tumor DNA, ct DNA)检测作为补充,若结果仍为阴性才需考虑再次活检获取足够的肿瘤标本进行分子检测。
- 李玉勤顾莹莹姜桔红
- 关键词：表皮生长因子受体突变
- 临床病理科住院医师规范化培训的实践与体会被引量：1
- 2021年
- 病理科住院医师规范化培训基地是为全国医疗机构输出合格的病理医生的源泉,因此制订严格的培训方案至关重要。广州医科大学附属第一医院临床病理科专业培训基地结合本院学科特色,通过实施严格的岗前学习培训、亚病理专科导师负责培训模式、科内病例汇报及小讲课、规培学员外院轮转学习、分子病理知识的培训及科研能力的培养等措施,建立了临床病理医师规范化培训及评价体系。医院病理科从多层面着手,制定系统化的规培方法及措施,在规定的时间内高质量地完成培训目标。
- 秦积龙何萍付欣鸽姜桔红
- 关键词：住院医师临床病理
- 细胞色素P450酶系在人鼻咽癌及鼻咽非癌组织中的表达被引量：7
- 2004年
- 背景与目的:鼻咽癌(nasopharyngealcarcinoma,NPC)的发生与环境及遗传因素密切相关。环境中各种前致癌物需经代谢酶包括细胞色素P450(CytochromeP450,CYP450)的活化才具有致癌作用。本研究拟检测鼻咽癌及鼻咽非癌组织中的CYP450基因表达,以了解与鼻咽部组织中致癌物代谢活化有关的CYP450基因。方法:利用下述两种方法检测CYP450基因的表达:(1)混合7例鼻咽非癌组织的RNA构建cDNA文库,进行克隆测序及生物信息学分析;(2)逆转录14例鼻咽癌组织及8例鼻咽非癌组织的RNA为cDNA,以PCR扩增检测CYP450基因的表达。结果:cDNA文库检测的CYP450基因EST(ExpressedSequenceTag)有CYP1B1、CYP2F1、CYP2J2、CYP4B1、CYP4F12、CYP5A(TBXAS1)、CYP20A1和CYP51A1,其中CYP4B1的EST拷贝数最高,达16个拷贝;RT-PCR检测表达的CYP450基因有CYP1A1、CYP1B1、CYP2A6、CYP2A13、CYP2B6、CYP2C8、CYP2C9、CYP2D6、CYP2E1、CYP2F1、CYP3A4、CYP3A5、CYP3A7、CYP4B1,其中CYP1B1、CYP2B6、CYP4B1已经在文库检测有表达。总共有19个CYP450基因在鼻咽癌及鼻咽非癌组织表达,表达较高的基因有CYP1B1、CYP2C8、CYP2C9、CYP2D6、CYP3A5和CYP4B1。结论:鼻咽部组织表达CYP450基因种类较多,其中包括与前致癌物代谢活化相关的基因。
- 姜桔红贾卫华覃海德梁慧潘志刚曾益新
- 关键词：鼻咽癌细胞色素P450CDNA文库
- 肿瘤-睾丸抗原LAGE-1基因的原核表达纯化和抗血清制备被引量：1
- 2006年
- 目的:构建人肿瘤-睾丸抗原LAGE-1的原核表达质粒,表达、纯化LAGE-1融合蛋白并制备GST-LAGE-1多克隆抗体。方法:逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法扩增人肝癌组织LAGE-1基因3′端片段,连入原核表达载体pGEX-4T-1(+),构建原核表达质粒pGEX-LAGE-1并测序。将该质粒转化大肠埃希菌BL21(DE3)进行诱导表达,经包涵体透析复性和谷胱甘肽巯基转移酶纯化系统分离纯化目的蛋白。用纯化的融合蛋白GST-LAGE-1免疫新西兰大白兔,间接ELISA法测定抗体效价,饱和硫酸铵沉淀法纯化抗体,并采用Western blot检测GST-LAGE-1多克隆抗体特异性。结果:RT-PCR扩增得到LAGE-1基因3′端264bp片段,测序结果与GenBank公布序列一致;成功构建pGEX-LAGE-1原核表达质粒,含有该质粒的大肠埃希菌经IPTG诱导后表达相对分子质量约为36×103的蛋白,经包涵体复性和GST融合蛋白纯化系统纯化,得到重组蛋白GST-LAGE-1,纯度达90%;制备兔抗GST-LAGE-1抗体,纯化的抗体经Western blot证实可与目的蛋白特异性结合。结论:获得了纯化的肿瘤-睾丸抗原LAGE-1重组蛋白及其特异性多克隆抗体,为进一步研究LAGE-1抗原在肿瘤免疫治疗中的作用奠定基础。
- 张文敏张萌姜桔红黄爱民文剑明
- 关键词：抗原基因逆转录聚合酶链反应
- NY-ESO-1和热休克蛋白70融合基因的构建和原核表达被引量：1
- 2006年
- 目的构建热休克蛋白(HSP)70和肿瘤睾丸抗原NY-ESO-1融合基因,并在大肠杆菌中诱导表达。方法应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,从人肝癌细胞株HepG2扩增HSP70基因,测序后插入pGEX-ESO1质粒中,构建NY-ESO-1与HSP70的N端融合基因原核表达质粒pGEX-ESO1-HSP70,IPTG诱导含有该质粒的大肠杆菌BL21(DE3)表达目的蛋白,Western blot鉴定蛋白的特异性。结果扩增得到长度为1 917 bp的人HSP70全长基因,测序结果表明与GenBank公布的序列一致;获得pGEX-ESO1-HSP70融合基因原核表达质粒,经IPTG诱导,在BL21(DE3)中表达分子量约106 kD的融合蛋白(包括GST 26 kD,NY-ESO1 10 kD,HSP7070 kD),Western blot检测该蛋白可与HSP70特异性结合。结论成功构建pGEX-ESO1-HSP70重组表达质粒,并获得高效表达的ESO1-HSP70融合蛋白,为HSP70-多肽疫苗在肿瘤免疫治疗中的作用奠定基础。
- 张文敏姜桔红张萌文剑明
- 关键词：热休克蛋白70NY-ESO-1融合基因原核表达
