庞思媛
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 供职机构：北京交通大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人源性天然抗体库的构建及淀粉样蛋白Aβ_(1-42)寡聚体单链抗体的筛选和鉴定被引量：2
- 2009年
- 本研究旨在利用噬菌体展示技术构建人源性天然抗体库,以可溶性Aβ1-42寡聚体对抗体库进行筛选获得针对低分子量Aβ1-42寡聚体的特异性单链抗体。利用RT-PCR法从10个健康人外周血淋巴细胞中得到全套人抗体VH和VL基因,经过重叠延伸PCR将VH和VL连接得到scFv片段,将scFv片段酶切后克隆至pCANTAB5E噬菌体载体,电转化TG1感受态菌,获得库容为2.5×109单链抗体库。经辅助噬菌体M13K07拯救,以可溶性Aβ1-42寡聚体为抗原,对抗体库进行4轮筛选,ELISA法筛选特异性识别Aβ1-42寡聚体的阳性克隆,将筛选到的阳性克隆B19转化至E.coli HB2151菌,诱导表达可溶性scFv抗体。SDS-PAGE及Western blotting分析结果显示可溶性scFv抗体获得了正确表达,且能够与Aβ1-42三聚体及纤维特异性结合,亲和力(Kd)为9×10-6 mol/L。Aβ1-42寡聚体特异性单链抗体的获得为老年性痴呆(AD)的治疗研究奠定了基础。
- 包福祥何金生曹贵方尹凡王鑫庞思媛张莹洪涛
- 关键词：单链抗体老年性痴呆
- 抗AβN端表位单克隆抗体的体外保护作用及其在Aβ检测中的初步应用
- 阿尔茨海默病(Alzheimer's disease， AD)是一种比较常见的衰老相关的神经退行性疾病，目前尚无特异的治疗和诊断方法。AD的主要病理特征是细胞外淀粉样肽（amyloidβ-peptide, Aβ）沉积形成...
- 庞思媛
- 关键词：Β淀粉样肽AΒ寡聚体夹心ELISA
- 文献传递
