廖继佩
- 作品数：3 被引量：10H指数：1
- 供职机构：第四军医大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 乳铁蛋白(Lf)抗病毒感染研究进展被引量：10
- 2003年
- 乳铁蛋白(lactoferrin,Lf)是转铁蛋白家族中的一种铁结合糖蛋白,在动物和人体内分布较广。它不仅能促进对铁的吸收、调节胚胎发育和细胞繁殖,而且在免疫调节和防御细菌、真菌和病毒中发挥重要作用。现就Lf抗病毒的研究作一综述。
- 廖继佩徐志凯薛小平
- 关键词：乳铁蛋白病毒感染免疫调节生物学功能
- HeLa细胞中HCV NS5A的表达对干扰素敏感病毒VSV复制的影响
- 2005年
- 目的:研究丙型肝炎病毒(HCV)NS5A的表达对水泡性口炎病毒(VSV)复制的影响.方法:将稳定转染的HeLa-NS5A和HeLa-NS5A-ΔISDR细胞在6孔培养板中培养24h后,加入人基因工程α2a型干扰素(rHuIFN-αt2a)至所需浓度.培养24h后加入VSV,继续培养相应时间.取培养上清液,按10-1稀释,50μL稀释液加入含Vero细胞的24孔培养板中.每孔加入含100 mL/L小牛血清的DMEM-7.5g/L羧甲基纤维素钠(CMC)1 mL.继续培养48 h后移走培养液,结晶紫染色,自来水轻柔洗净,记录噬斑形成单位(PFU).结果:干扰素(IFN)浓度为1×105 U/L,VSV对HeLa-NS5A细胞的致病变作用要比对HeLa-NS5A-ΔISDR细胞的致病作用更明显.在整个IFN浓度处理中,HeLa-NS5A细胞培养液中的病毒滴度是HeLa-NS5A-ΔISDR细胞培养液中的病毒滴度的2～5倍(P＜0.05).结论:NS5A能增强IFN敏感病毒的复制,HCVNS5A内的ISDR可能是造成IFN对HCV患者治疗效果的因素.
- 廖继佩薛小平尹文雷迎峰吕欣杨敬徐志凯
- 关键词：非结构蛋白5A干扰素敏感决定区水泡性口炎病毒
- 稳定表达HCV 1a NS5A和NS5A-ΔISDR细胞株的构建
- 2005年
- 以pBRTM/HCV-3011模板,通过PCR法扩增ns5a、LISDR(左端序列)和RISDR(右端序列),分别经XhoⅠ/EcoRⅠ、XhoⅠ/HindⅢ和EcoRⅠ/HindⅢ双酶切,连入穿梭质粒pEGFP-N3中,构建重组质粒pEGFP-N3-ns5a和pEGFP-N3-ns5a-ΔISDR。对重组质粒进行酶切分析和序列测定。将这2种重组质粒通过电穿孔法转染HeLa细胞,然后在G418选择压力下进行有限稀释法筛选,用RT-PCR和荧光显微镜鉴定。经酶切鉴定和基因测序证实,重组穿梭质粒已插入目的片段ns5a、LISDR和RISDR。RT-PCR和荧光显微镜检测到目的基因的表达。以上结果说明成功构建了真核表达载体pEGFP-N3-ns5a和pEGFP-N3-ns5a-ΔISDR,目的基因在HeLa细胞中得到表达,为研究HCVNS5A中是否存在抗干扰素治疗的功能蛋白提供了实验材料。
- 廖继佩薛小平徐志凯尹文雷迎峰吕欣杨敬
- 关键词：干扰素敏感决定区HELA细胞系增强型绿色荧光蛋白真核表达载体
