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张志珍: 作品数：37 被引量：88H指数：5; 供职机构：广东医学院更多>>; 发文基金：广东省自然科学基金东莞市高等院校科研机构科技计划项目广东省科技计划工业攻关项目更多>>; 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>

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存活素siRNA表达质粒对化疗药物抑癌作用的影响: 2010年; 目的探讨存活素si RNA表达质粒(mU6/survivin质粒)对化疗药物抑癌作用的影响。方法采用MTT法检测mU6/survivin质粒与多种常规肿瘤化疗药物对乳腺癌MCF-7细胞增殖的联合作用。结果比较单纯化疗药物作用组的各相应浓度点,si RNA表达质粒mU6/survivin与化疗药物顺铂、环磷酰胺、5-氟尿嘧啶或秋水仙碱合用组对肿瘤细胞MCF-7的细胞增殖抑制率均明显提高,差异均有统计学意义(P<0.01);对靶向DNA药物如顺铂、环磷酰胺和5-氟尿嘧啶的抗癌性能具有显著的协同增强作用(二者合用效应Q值均>1),但对靶向微管的药物秋水仙碱没有相加作用(Q值<1)。结论在解除肿瘤细胞中存活素功能的基础上进行药物化疗,可能是肿瘤治疗的一个新的可行方向。; 李莉萍罗超权张志珍梁念慈; 关键词：存活素 SIRNA 质粒化疗药物

人β-COP-shRNA慢病毒载体构建及干扰效应检测被引量：1: 2015年; 目的采用常规转染试剂难以将人β-COP-shRNA转染至THP-1细胞。构建人β-COP特异性的shRNA慢病毒载体,并测定其对靶基因β-COP的抑制效应。方法设计合成针对人β-COP基因靶点特异的4对shRNA寡聚单链DNA,插入p GMLV-SC1载体中,构建慢病毒重组载体。将重组载体和包装质粒共转染HEK 293T细胞,包装产生慢病毒并测定滴度。用慢病毒感染THP-1细胞,定量PCR和Western blot检测干扰载体对β-COP基因的干扰效果。结果测序证实,β-COP基因的shRNA寡聚核苷酸序列已插入慢病毒载体,转染HEK 293T细胞,经包装得到4种慢病毒,病毒滴度为1×109TU/m L。定量PCR分析显示,4种β-COP-shRNA慢病毒感染的THP-1细胞中β-COP基因mRNA表达量分别为0.831±0.065、0.675±0.079、0.260±0.050、0.497±0.067,较对照(1.000±0.000)明显升高(P<0.01);其抑制率分别为16.9%、32.5%、74.0%和50.3%。Western blot结果表明,4种干扰载体均可抑制β-COP蛋白表达,其中β-COP-shRNA 3的沉默效率为76.4%。结论成功构建了人β-COP-shRNA干扰载体,证实了干扰载体对靶基因有较好的沉默效果。; 马卫列丁航李观强肖娟张志珍; 关键词：脂质代谢

H9N2亚型禽流感病毒ns1基因克隆被引量：1: 2006年; 目的克隆A/Duck/Shantou/2088/01(H9N2)亚型禽流感病毒ns1基因,构建重组融合表达载体。方法采用常规PCR方法扩增ns1基因cDNA,将扩增产物克隆入GST融合表达载体pGEX-4T-3中,构建重组质粒pGEX-4T-3/ns1,转化BL21(DE3)宿主菌;采用EcoRⅠ、XhoⅠ双酶切和序列分析鉴定插入的ns1基因;并用IPTG诱导工程菌,SDS-PAGE及Western blotting分析融合蛋白的表达。结果双酶切鉴定表明,ns1基因已正确克隆到GST融合表达载体中,测序结果证实ns1基因序列与目的基因序列完全一致。SDS-PAGE电泳显示,融合蛋白在BL21(DE3)工程菌中以可溶形式表达,重组融合蛋白GST-NS1的表达量占菌体总蛋白的20%左右。经West-ern blotting分析证实,重组融合蛋白可以被GST特异性抗体所识别。结论本实验成功克隆了H9N2亚型禽流感病毒ns1基因,构建了融合表达载体,并进行了融合蛋白的诱导表达,为进一步研究NS1蛋白在流感流行中的作用打下基础。; 林东子张志珍梁念慈; 关键词：H9N2亚型禽流感病毒 NS1基因克隆融合蛋白

Ykt6结构与膜融合功能研究进展被引量：1: 2015年; 真核细胞含有复杂的内膜系统,细胞内的物质交换通过囊泡运输方式来完成。囊泡运输主要包括运输囊泡的出芽、定向移动、锚定和膜融合等过程,SNAREs蛋白在膜融合过程中发挥重要作用。SNAREs分为定位于运输囊泡上的v-SNARE和定位于靶位膜上的t-SNARE,二者相互作用形成SNARE复合体,促进膜融合的发生。Ykt6是真核生物高度保守的一种SNAREs蛋白,由N-末端longin结构域、SNARE core结构域和C-末端CAAX盒组成。细胞质中longin结构域、SNARE core结构域和脂质相互作用具有多种构象。棕榈酰化的Ykt6由无活性的自抑构象转变为有活性的开放构象参与囊泡转运过程,在膜融合和囊泡融合中起着重要作用。本文主要介绍近年来有关SNARE Ykt6的结构与功能研究进展。; 肖娟马卫列丁航张志珍; 关键词：SNARES 囊泡转运膜融合

HPLC法测定apoA-1介导的泡沫细胞胆固醇流出的实验研究被引量：4: 2015年; 目的建立用高效液相色谱(HPLC)法测定载脂蛋白A-1(apoA-1)介导的泡沫细胞内胆固醇流出率的实验方法。方法人单核细胞THP-1用160nmol/L佛波酯(PMA)诱导24h分化为贴壁巨噬细胞(PMA组),再用50μg/mL乙酰化低密度脂蛋白(ac-LDL)处理48h,诱导巨噬细胞变成泡沫细胞(ac-LDL组);加入含apoA-1的1640培养基培养24h(apoA-1组)。油红O染色和HPLC法测定细胞内胆固醇水平,鉴定巨噬细胞源性泡沫细胞模型。采用HPLC分析和液体闪烁计数法测定apoA-1介导的泡沫细胞内胆固醇流出率。结果 THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞经油红O染色后,细胞内可明显观察到大量红色脂滴存在。胆固醇水平测定显示,ac-LDL组内游离胆固醇、总胆固醇和胆固醇酯的水平明显高于PMA组(P<0.01)。ac-LDL处理细胞48h后,ac-LDL组内总胆固醇水平为80.25μg/mg细胞蛋白,胆固醇酯水平为47.65μg/mg细胞蛋白,占总胆固醇的59.38%,与PMA组相比,差异有统计学意义(P<0.01)。HPLC分析和液体闪烁计数法结果表明,apoA-1介导泡沫细胞内apoA-1组胆固醇流出率分别为5.63%和7.08%(P<0.01)。结论本研究成功建立了酶促反应结合HPLC测定泡沫细胞内胆固醇流出的方法,为后续研究细胞脂质代谢提供了实验基础。; 马卫列龚晓华李观强丁航兰柳波陈小谊张志珍; 关键词：泡沫细胞载脂蛋白A-1 胆固醇流出

我院生物化学与分子生物学重点学科的建设与成效被引量：1: 2013年; 阐述了广东医学院生物化学与分子生物学重点学科的建设情况与成效,指出规范学科管理制度,明确学科研究方向,培养高素质的学科人才,加强实验室建设是该学科实施重点学科建设的关键。; 林小聪刘新光兰柳波符伟玉丁航张志珍张海涛陈维春唐旭东周克元; 关键词：生物化学与分子生物学重点学科学科建设

浅谈学生主体性在医学检验专业开放式实验教学中的积极发展被引量：6: 2008年; 实验室是医学院校开展教学、科研的重要基地，通过开放实验室来实施医学检验专业的开放式实验教学，对创新教育的实施和培养实用型、复合型人才具有重要作用。现以主体性实验教学理论为指导，结合医学检验专业的学科特点，分别在理论和实践方面浅谈学生主体性在医学检验专业开放式实验教学中的积极发展。; 张春龙何秋璟刘新光侯敢张志珍; 关键词：学生主体性开放式实验教学医学检验专业

磷酸二酯酶7及其抑制剂被引量：7: 2012年; 磷酸二酯酶7(phosphodiesterase7,PDE7)作为体内特异性水解第二信使环腺苷一磷酸(cyclic adenosine monophosphate,cAMP)的一类蛋白水解酶,通过调控组织细胞内cAMP水平及机体信号传导活动,参与了体内多种疾病的发生发展过程.PDE7主要分布于前炎症细胞及免疫细胞.最新研究表明,PDE7作为一个新的潜在的抗动脉粥样硬化及抗炎症免疫类药物的新靶点,其抑制剂可能在研究及治疗动脉粥样硬化及慢性阻塞性肺病等免疫炎症类疾病方面具有重要意义.本文简述PDE7基因结构、生物学功能以及其抑制剂研究,并重点就其与疾病之间联系做一综述.; 饶勇龚晓华马卫列张志珍

半边旗提取物5F对人高转移肺癌细胞PGCl3侵袭转移的影响: 目的研究半边旗提取物5F(以下简称5F)对人高转移肺癌细胞PGCl转移相关能力的影响。方法MTT法检测5F对PGCL细胞的增殖抑制作用;Transwell chamber法检测5F对PGCL细胞侵袭能力和趋化性运动能力的...; 陈杰覃燕梅张志珍林观平梁念慈; 文献传递

蒙古长爪沙鼠颌下静脉丛真空采血法探讨被引量：3: 2014年; 目的探讨蒙古长爪沙鼠(Mongolian gerbil)颌下静脉丛真空采血的技术与方法,提高蒙古长爪沙鼠实验的成功率。方法选取40只蒙古长爪沙鼠,麻醉后将静脉输液针刺入颌下静脉丛血管取血。结果成功获得沙鼠静脉血,每只沙鼠的采血量可达0.3-0.6 m L。结论此方法可多次重复采血,血液标本质量高,创伤小,是一种简便、安全、采血量多的采血方法。; 金丹丹张劲松丁航兰柳波张志珍马卫列

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