张新文
- 作品数：62 被引量：129H指数：6
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金云南省自然科学基金云南省应用基础研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学理学更多>>
- HCV结构蛋白在昆虫细胞中的表达及病毒样颗粒的形成被引量：2
- 2003年
- 目的 在昆虫细胞中同时表达HCV的核心蛋白C和包膜蛋白 (E1、E2 )以形成病毒样颗粒 (VLP)。方法 利用PCR技术得到HCV的核心蛋白和包膜蛋白基因 ,用基因重组技术分别构建表达HCVC、E1和E2蛋白的重组杆状病毒 ,用SDS PAGE电泳分析HCV结构蛋白在昆虫细胞中的表达。电镜观察昆虫细胞内VLP的形成。结果 得到了能表达HCVC蛋白和同时表达E1、E2蛋白的重组杆状病毒reBV/C和reBV/E1、E2。reBV/C和reBV/E1、E2共感染的昆虫细胞同时表达了C、E1和E2蛋白 ,分子量分别为 2 0kD ,35kD和 6 6kD。电镜观察到表达HCV结构蛋白的昆虫细胞质中存在大量的直径为 4 0～ 6 0nm的VLP ,对照细胞无此结构。结论 在昆虫细胞中表达的HCVC。
- 赵玮廖国阳蒋燕军孙明波张新文姜述德
- 关键词：HCV核心蛋白病毒样颗粒
- 云南汉族人群中miRNAs基因多态性与HCV慢性感染相关性研究被引量：1
- 2017年
- 目的:探讨云南汉族人群中microRNAs(miRNAs)基因多态性与HCV慢性感染的相关性。方法:选取云南汉族人群HCV慢性感染者384例,健康对照人群379例,采用Taq Man探针基因分型方法对4个miRNAs的SNPs(miR196a2中的rs11614913、miR146a中的rs2910164、miR26a1中的rs7372209以及miR124a中的rs531564)进行基因分型,比较这4个SNPs位点基因型和等位基因频率在病例组和对照组中的分布,分析这4个SNPs与HCV慢性感染的相关性。结果 :rs11614913(C>T)、rs2910164(C>G)、rs7372209(T>C)、rs531564(C>G)4个SNPs位点的基因型频率和等位基因频率在病例组与对照组中的分布差异无统计学意义(P>0.05)。结论:miR196a2中的rs11614913、miR146a中的rs2910164、miR26a1中的rs7372209以及miR124中的rs531564与云南汉族人群HCV慢性感染无相关性。
- 檀林萍刘舒媛沈云松高雪李传印张新文杨勤兴王培智姚宇峰史荔
- 关键词：基因MIRNAS肝炎丙型单核苷酸多态性
- 流感病毒裂解疫苗儿童剂型在小鼠中的安全性及免疫原性研究被引量：3
- 2012年
- 目的比较本研究所制备的流感病毒裂解疫苗儿童剂型(昆明疫苗)与赛诺菲巴斯德流感裂解疫苗儿童剂型(巴斯德疫苗)在动物中的安全性和免疫效果。方法用流感病毒裂解疫苗儿童剂型于0d和14d,腹腔内接种ICR小鼠。每天称取体质量,免疫后35d,眼眶采血分离血清,用微量血凝抑制(HI)法测定小鼠血清中特异性抗体滴度,计算抗体阳转率、保护率及几何平均滴度(GMT)增长倍数。结果免疫后小鼠体质量逐渐增加,组间无明显差异;两组间HI抗体阳转率、保护率及H1N1、H3N2型和B型HI抗体倍数差异无显著意义。结论两种疫苗均具有很好的安全性和免疫原性。
- 戴宗祥王湘宜王俊张新文宋绍辉蔡玮李映波姜述德廖国阳高菁霞
- 关键词：药物评价免疫原性剂型
- 无血清微载体培养Vero细胞和H1N1流感病毒条件的优化被引量：4
- 2010年
- 目的优化无血清微载体培养Vero细胞和H1N1流感病毒的条件,为Vero细胞流感疫苗的开发奠定基础。方法在搅拌瓶中采用不同的细胞接种量和不同的微载体浓度培养Vero细胞,制备流感病毒,并检测不同的pH值、TPCK-胰酶含量、病毒接种量及病毒收获时间对流感病毒血凝滴度的影响。结果以(1.0～5.0)×105个/ml的Vero细胞接种至浓度为3mg/ml的无血清微载体中,病毒培养液pH值为7.2～7.4,TPCK-胰酶含量为1.0μg/ml,病毒接种量为1.0MOI,并在感染48h后补加TPCK-胰酶,培养72h后收获上清与细胞内病毒,血凝滴度可达1:512。结论已获得了无血清微载体培养Vero细胞和H1N1流感病毒的适宜条件,为应用生物反应器大规模制备流感病毒奠定了基础。
- 田石华孙明波张新文马磊高菁霞宋绍辉姜述德李卫东廖国阳
- 关键词：无血清微载体VERO细胞流感病毒A型H1N1亚型
- 二乙烯亚胺对脊髓灰质炎病毒Ⅱ型Sabin株的灭活效果被引量：2
- 2010年
- 目的观察二乙烯亚胺(Binary ethylenimine,BEI)对脊髓灰质炎病毒Ⅱ型Sabin株的灭活效果。方法在不同温度(37、33、28和25℃)下采用4种浓度(0.002、0.001、0.0005和0.00025mol/L)的BEI及0.0925mg/ml的甲醛对脊髓灰质炎病毒Ⅱ型Sabin株进行灭活,采用微量滴定法测定病毒感染性滴度,ELISA法检测灭活病毒液D抗原含量,并进行病毒灭活验证试验。结果在37℃条件下,0.002mol/L的BEI能在48h内完全灭活病毒,灭活后的病毒液D抗原含量回收率为90.6%,显著高于甲醛灭活的回收率(60.6%)。经验证,灭活彻底,无活病毒存在。结论 BEI对脊髓灰质炎病毒Ⅱ型Sabin株的D抗原破坏小,能较好地保持疫苗的有效成分。
- 王白燕张新文蔡玮马磊高菁霞孙明波姜述德李卫东杨静思廖国阳
- 关键词：脊髓灰质炎病毒病毒灭活
- Triton X-114液相分离法去除流感单价病毒原液中内毒素的实验研究被引量：7
- 2010年
- 目的探讨Triton X-114液相分离法去除流感单价病毒原液中内毒素的效果。方法用终浓度为1、2、3%Triton X-114抽提、液相分离法去除流感单价病毒原液中的内毒素;用鲎试剂凝胶法检测去除前后内毒素含量、Lowry法测定蛋白质含量、红细胞凝集试验检测血凝效价、单相免疫扩散法测定血凝素含量等。结果通过3轮抽提,Triton X-114能够将单价病毒原液中内毒素水平降至低于0.25EU/mL,去除率达到99.9%,蛋白质回收率为85.11%,血凝效价保持不变,血凝素含量几乎无变化。以1%Triton X-114去除流感单价病毒原液中内毒素效果最好。结论Triton X-114液相分离法可有效去除流感病毒原液中的内毒素。
- 黄秋香毕湖冰张新文高菁霞蔡玮刘泽姚忠萍姜述德李映波
- 关键词：内毒素TRITON
- Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗
- 廖国阳孙明波李琦涵姜述德褚嘉祐谢忠平杨净思蔡玮衡燮周健杨卉娟车艳春杨晓蕾陈洪波李卫东易力洪超张新文俞詠霆姜莉宋霞张丽旌
- 脊髓灰质炎(以下简称脊灰)是由脊灰病毒Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型引起肢体松弛性麻痹的急性传染病，常引起终身残疾，给患者及其家庭造成严重摧残。脊灰灭活疫苗(IPV)和口服脊灰减毒活疫苗(OPV)在全球广泛的使用，脊灰得到有效控制。198...
- 关键词：
- 关键词：脊髓灰质炎灭活疫苗传染病
- 云南汉族人群CD40基因多态性与2型糖尿病的相关性被引量：1
- 2018年
- 目的:研究CD40基因单核苷酸多态性(SNPs)位点rs1883832和rs4810485与云南汉人群2型糖尿病(T2DM)的相关性。方法:选取云南地区汉族人群T2DM患者343例作为病例组,健康体检者325例作为对照组,采用Taqman探针法对CD40基因SNPs位点rs1883832和rs4810485进行基因分型,分析其等位基因和基因型在病例组和对照组中的分布特征;构建2个SNPs位点的单倍型,分析各单倍型在2组中的分布差异。结果:rs4810485等位基因G在病例组中的分布频率显著高于对照组(P=0.014),该位点等位基因G可能是云南汉族人群T2DM发生的风险因素(OR=1.323、95%CI为1.057~1.655,P<0.05);rs1883832等位基因和基因型在两组中分布频率比较,差异无统计学意义(P>0.05);单倍型分析结果显示rs1883832C-rs4810485G单倍型可能会增加T2DM发生风险的因素(OR=1.43、95%CI为1.15~1.78,P<0.05)。结论:CD40基因SNPs位点rs4810485等位基因G和rs1883832C-rs4810485G单倍型可能是云南汉族人群T2DM发生的风险因素。
- 张新文陶文玉赵凎杨曼陈珺王晓苓周紫云赵雨笛刘楠楠史荔李奕平
- 关键词：2型糖尿病炎症反应基因多态性汉族
- 云南汉族人群NKG2D基因多态性与非小细胞肺癌发生和发展的相关性被引量：3
- 2017年
- 目的:探讨云南汉族人群活化性受体NKG2D基因单核苷酸多态性(SNP)与非小细胞肺癌的相关性。方法:选择云南汉族非小细胞肺癌患者467例(肺癌Ⅰ+Ⅱ期组151例,肺癌Ⅲ+Ⅳ期组316例)和健康对照384例(对照组),采用Taq Man探针基因分型方法对NKG2D基因的2个SNPs(rs2255336和rs2617160)位点进行基因分型,研究其等位基因、基因型及所构建的单倍型在肺癌Ⅰ+Ⅱ期组、Ⅲ+Ⅳ期及对照组人群中的分布差异。结果:rs2255336和rs2617160位点的等位基因及基因型在肺癌Ⅰ+Ⅱ期组、肺癌Ⅲ+Ⅳ期组和对照组中的分布频率的差异无统计学意义(P>0.05);遗传模式分析显示,rs2255336和rs2617160在Ⅰ+Ⅱ期肺癌组和Ⅲ+Ⅳ期肺癌组最优的遗传模式均为Recessive模式,其中CC-CT基因型相对于TT基因型可能是肺癌发展的保护性因素(P=0.040,OR=0.26,95%CI:0.06-1.17);rs2617160位点TT-AT基因型相对于AA基因型可能是肺癌发展的保护性因素(P=0.045,OR=0.60,95%CI:0.36-1.00)。结论:NKG2D基因rs2255336和rs2617160 SNPs位点可能与云南汉族人群非小细胞肺癌的发展有关。
- 杨晓蕾谭芳马千里王微王小娜王丽刘杰刘舒媛张新文史荔姚宇峰
- 关键词：基因NKG2D单核苷酸多态性肺肿瘤汉族
- 抗脊髓灰质炎病毒Ⅱ型Sabin株D抗原单克隆抗体的研制被引量：4
- 2006年
- 目的应用杂交瘤技术制备抗脊髓灰质炎病毒Ⅱ型Sabin株D抗原的单克隆抗体。方法用脊髓灰质炎病毒Ⅱ型Sabin株D抗原免疫雌性Balbc小鼠,取其致敏脾脏淋巴细胞与SP20小鼠骨髓瘤细胞融合。间接ELISA法筛选阳性克隆,制备腹水。检测McAb效价、抗体亚类和杂交瘤细胞核型。结果获得4株阳性杂瘤细胞株,选择一株制备腹水,ELISA效价为1∶2.4×106,中和试验效价1∶1.3×104,蛋白浓度为27.2mgmL。McAb与Ⅱ型Sabin株C抗原(ⅡC)、Ⅰ型Sabin株及Ⅲ型Phizer株D抗原(ⅠD、ⅢD)不发生交叉反应,具有高度特异性。结论成功的制备了针对脊髓灰质炎病毒Ⅱ型Sabin株D抗原的McAb,为进一步研究IPV效力检测奠定了基础。
- 褚学者姜述德孙明波周铁群方捍华杨建勇张新文潘玥李卫东廖国阳
- 关键词：单克隆抗体D抗原
