张晓丽
- 作品数：15 被引量：103H指数：7
- 供职机构：复旦大学附属中山医院肾内科更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 高糖诱导人肾小球系膜细胞SGK的表达被引量：4
- 2005年
- 目的 研究高糖环境中人肾小球系膜细胞(human mesangial cells, HMC) 中血清和糖皮质激素诱导的激酶(serum and glucocorticoid inducible kinase, SGK) 3种亚型SGK1、SGK2和SGK3的表达及意义。方法 将培养的HMC分为正常组(5 5 mmol/L D 葡萄糖)、高糖组(25 mmol/L D -葡萄糖) 和甘露醇对照组(19. 5 mmol/L甘露醇和5. 5 mmol/L D 葡萄糖)。采用RT PCR 方法检测SGK1、SGK2 和SGK3 mRNA 的表达, Western blot 方法检测SGK1蛋白的表达。结果 在高糖及甘露醇刺激下, HMC中SGK1、SGK2和SGK3 mRNA及SGK1 蛋白的表达明显上调(P<0. 05); 其中高糖上调SGK的表达明显高于甘露醇(P<0 .05)。结论 高糖能促进HMC的SGK1、SGK2 和SGK3mRNA及SGK1蛋白的表达, SGK1可能是高糖作用于HMC的细胞内信号通路中靶分子之一, 由它介导的高糖信号转导途径在糖尿病肾病的发生中可能起了重要作用。
- 王全胜张晓丽张阿丽王玉梅邓安国朱忠华冯玉锡
- 关键词：糖皮质激素激酶SGK高糖人肾小球系膜细胞
- 高糖通过血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶1通路促进人系膜细胞合成纤连蛋白被引量：13
- 2005年
- 目的研究血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶1(SGK1)在高糖诱导人肾小球系膜细胞(HMC)产生纤连蛋白(FN)中的作用,探讨SGK1在糖尿病肾病(DN)肾小球硬化中的作用机制。方法将带有SGK1显性激活型突变体质粒(PIRES2EGFPS422DSGK1mutant,SD)瞬时转染HMC;同时,设空质粒(PIRES2EGFP,FP)转染组和未转染组(NT)为对照。分别用正常糖(NG,5.5mmol/LD葡萄糖)和高糖(HG,25mmol/LD葡萄糖)刺激8h后,采用RTPCR方法和Western印迹方法来观察SGK1和FN的mRNA及蛋白的表达。结果高糖环境下,转染SD的HMC与转染FP、NT组比较,其SGK1mRNA表达显著性增高(0.704vs0.497,0.491,P<0.01),SGK1蛋白过度活化(1178497vs193875,195597,P<0.01),其FNmRNA和蛋白的表达显著性的增加(0.749vs0.463,0.475,P<0.01;659550vs342354,340428,P<0.01)。结论在糖尿病肾病中,高糖可以通过SGK1介导的信号通路来诱导人肾小球系膜细胞增加合成FN,这种新发现的信号通路,表明SGK1可能参入糖尿病肾病肾小球纤维化的发生。
- 王全胜张晓丽王玉梅张阿丽邓安国朱忠华冯玉锡
- 关键词：蛋白激酶类肾小球膜纤连蛋白类
- 人SGK1超表达载体的构建及鉴定被引量：1
- 2006年
- 目的:构建人血清及糖皮质激素诱导型蛋白激酶(SGK1)超表达载体质粒,为SGK1的体外研究提供有效的工具。方法:细胞中RNA经反转录合成cDNA,PCR扩增获取人全长SGK及构建于哺乳动物的表达载体。基因激活型(SD)及灭活型(KN)人SGK1经点突变获取。克隆基因的正确性通过酶切鉴定及DNA测序证实。用磷酸钙沉淀法转染人胚肾293(HEK293)细胞,测定其转染率。结果:构建的人SGK1质粒能在人胚肾细胞中超表达。结论:人SGK1超表达载体的成功构建为糖尿病肾病发病机制的研究提供了新的工具。
- 王玉梅张晓丽王全胜冯玉锡
- 关键词：SGK1糖尿病
- 血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶在糖尿病肾病小鼠中的表达及意义被引量：21
- 2004年
- 目的 探讨血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶(SGK)在糖尿病肾病(DN)早期病变中的表达及意义。方法 采用链脲佐菌素(STZ)单次腹腔注射诱导小鼠DN模型,设DN组和正常对照组(NG)。在DN模型4周时,检测肾小球细胞外基质(ECM)、肾重指数、24 h尿蛋白量和Ccr;RT-PCR检测DN病变早期肾皮质SGK 1、SGK 2、SGK 3及Ⅰ型胶原α2(Col Ⅰα2)、纤连蛋白(FN)和转化生长因子β1(TGF-β1)mRNA表达;Western印迹检测SGK1蛋白的表达。结果 与NG组相比,DN组小鼠肾重／体重、24 h尿蛋白量,ECM相对面积,Ccr均显著增加。肾皮质Col Ⅰ α2、FN、TGF-β1 mRNA表达显著上调,同时SGK1 mRNA、SGK2 mRNA、SGK3 mRNA及SGK1蛋白表达显著上调。而且SGK1、SGK2、SGK3的mRNA表达与Col Ⅰ α2,FN,TGF-βl mRNA表达均有显著正相关关系。结论 SGK在DN肾脏中有较高表达,伴随有ECM积聚,与Col Ⅰα2,FN,TGF-β1 mRNA表达有显著正相关,它可能在DN早期病变中起重要作用。
- 王全胜张晓丽王玉梅邓安国朱忠华冯玉锡
- 关键词：FN小鼠糖尿病肾病SGK蛋白激酶
- 前列腺素E1脂微球载体制剂对系膜增殖性肾炎肾保护作用的研究被引量：5
- 2004年
- 目的 探讨前列腺素E1脂微球载体制剂 ( prostaglandinE1incorporatedinlipidmicro spheres ,LipoPGE1)对系膜增殖性肾小球肾炎 (MsPGN)大鼠肾脏的保护作用及其机制。 方法 将大鼠随机分为对照组、MsPGN模型组和MsPGN +LipoPGE1治疗组 3组。采用胃肠道综合免疫方法建立MsPGN模型。 8周后检测各组大鼠尿蛋白和肾功能 ,并观察肾组织病理改变 ,应用免疫组织化学方法检测增殖细胞核抗原 (PCNA)、纤维连接蛋白 (FN)、Ⅳ型胶原蛋白 (ColⅣ )和转化生长因子 (TGFβ1)在肾组织中的表达。 结果 LipoPGE1组大鼠血肌酐水平较MsPGN组降低 (P <0 .0 5 ) ,肾小球系膜及基质增生程度比MsPGN组明显减轻 ,免疫组织化学染色结果显示LipoPGE1组肾小球PCNA、FN、ColⅣ、TGFβ1表达明显低于MsPGN组 (P <0 .0 1)。 结论 LipoPGE1对MsPGN大鼠肾脏有保护作用 ,其机制可能是部分通过下调TGFβ1的表达 ,减少肾小球内细胞增生和细胞外基质 (ECM )
- 张晓丽罗长青朱忠华邓安国刘桂英
- 关键词：前列腺素E肾炎细胞外基质
- 高糖对人肾小管上皮细胞和系膜细胞表达血清和糖皮质激素诱导蛋白激酶1的影响被引量：12
- 2004年
- 目的研究高糖作用下人近端肾小管上皮细胞(HKC)和系膜细胞(HMC)中血清和糖皮质激素诱导蛋白激酶1(SGK1)的表达,并初步探讨SGK1在介导高糖致肾细胞(HKC和HMC)过度合成细胞外基质(ECM)中的作用。方法将HKC和HMC细胞分别分为正常对照组(NG组,5.5mmol/LD-葡萄糖)、高糖组(HG组,25mmol/LD-葡萄糖)和渗透浓度对照组(MG组,19.5mmol/L甘露醇和5.5mmol/LD-葡萄糖)。SGK1mRNA水平及蛋白水平的检测分别采用RT-PCR方法和Western印迹方法。培养液中纤连蛋白(FN)水平检测采用ELISA方法。结果HKC和HMC中均存在SGK1基因和蛋白的表达。HMC中SGK1的表达明显高于HKC(P<0.01)。高糖刺激8h后,两种细胞SGK1表达均明显升高(P<0.01);同时,甘露醇也上调HKC和HMCSGK1的表达(P<0.01),但其作用明显弱于高糖(P<0.05)。FN在高糖环境下表达上调,且高峰出现时间滞后于SGK1。结论高糖能促进近端肾小管上皮细胞和系膜细胞SGK1的表达,并可能通过SGK1介导的信号转导途径在糖尿病肾病ECM积聚中发挥重要作用。
- 张晓丽王全胜王玉梅朱忠华邓安国冯玉锡
- 关键词：高糖肾小管上皮细胞诱导蛋白SGKMRNA水平
- 低氧诱导因子1α高表达对小鼠急性缺血性肾损伤的影响被引量：12
- 2007年
- 目的探讨低氧预处理诱导低氧诱导因子1α（HIF-1α）高表达对小鼠肾缺血再灌注损伤（IRI）的影响及其可能机制。方法雄性C57BL／6N小鼠35只，随机分为健康对照组、氯化钴（CoCl2）组和8％O2组，每组10只；预处理12h后，以上3组各取5只，分为缺血再灌注（IR）组、CoCl2＋IR组、8％O2＋IR组；另设5只作为假手术对照组。采用夹闭双侧肾蒂30min的方法建立肾缺血动物模型，观察CoCl2和8％O2预处理对小鼠IR 24h后肾功能、肾组织病理和相关肾损伤指标的影响及与CoCl2和8％O2诱导HIF-1α及其保护性靶基因血红素氧化酶1（HO-1）表达之间的关系。结果CoCl2＋IR组小鼠的肾功能[BUN（35．2±12．2）mmol／L，Scr（34．0±9．7）μmol／L]和8％O2＋IR组小鼠的肾功能[BUN（31．8±9．1）mmol／L，Scr（41．6±10．6）μmol／L]均较IR组[BUN（65．8±2．6）mmol／L，Scr（229．5±11．2）μmol／L]显著改善（P〈0．01）；与此相一致，CoCl2＋IR组和8％O2＋IR组的病理学改变、细胞凋亡程度和波形蛋白的表达均明显低于IR组。另外，CoCl2组和8％O2组中HIF-1α及其靶基因HO-1的表达明显高于健康对照组。结论低氧预处理可上调体内HIF-1α表达，对小鼠IRI肾脏具有良好保护效果。
- 张晓丽刘红邹建洲方艺蒋素华许迅辉丁小强
- 关键词：氯化钴低氧诱导因子1急性肾损伤血红素氧化酶
- 不同预缺血时间对肾小管间质纤维化的影响被引量：3
- 2008年
- 目的:在建立缺血所诱发的肾小管间质纤维化大鼠模型基础上,探讨不同预缺血时间对肾脏纤维化的影响。方法:双侧肾蒂夹闭40min后恢复灌注,制作缺血再灌注损伤模型,8d前用同样方法分别造成肾脏预缺血10min、20min和30min。预缺血后1d、4d、8d和第2次缺血后5周收集血样和肾脏标本。Masson特殊染色法观察小管间质纤维化程度;Western blotting法测定α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、TGF-β1和磷酸化Smad2蛋白表达;免疫组织化学法观察肾脏α-SMA和TGF-β1的分布。结果:术后5周单纯缺血再灌注组(I/R)和10min缺血预处理组(I-10/I)出现了相似程度的小管间质纤维化病变;30min缺血预处理组(I-30/I)的肾脏纤维化明显加重,并伴有肾脏重量的增加、肾功能的减退和α-SMA、TGF-β1、phospho-Smad2蛋白表达进一步上调;相反,20min缺血预处理组(I-20/I)的肾脏纤维化显著减轻甚至消失,与假手术对照组(sham)相比上述蛋白的表达无显著差异。结论:长时间的肾脏缺血可以引起小管间质纤维化,提前进行缺血预处理影响此病理改变,其作用结果与预缺血的时间长短密切相关,时间适中的预缺血能保护肾脏免于纤维化结局,其保护机制有待进一步研究。另外,肌成纤维细胞增多(α-SMA阳性)和TGF-β1/Smad信号通路激活可能参与缺血性小管间质纤维化病变过程。
- 蒋素华丁小强张晓丽许迅辉何广成刘春凤邹建洲滕杰方艺
- 关键词：肾脏再灌注损伤缺血预处理肾纤维化
- 急性缺血再灌注损伤对肾脏的近期和远期作用被引量：4
- 2007年
- 目的 探讨急性缺血再灌注（IR）损伤对大鼠肾脏的近期和远期作用及其机制。方法 双侧肾蒂夹闭40rain后再灌注，制作大鼠IR模型。术后4h、24h、48h、72h、1周、5周和10周收集血样和肾脏标本，动态观察肾脏病理、肾功能和大鼠死亡情况。用透射电镜观察小管上皮细胞的超微结构；原位末端标记法（TUNEL）检测肾小管上皮细胞凋亡情况；Masson染色法观察小管间质纤维化程度；Western印迹法测定α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）表达；免疫组织化学法观察肾脏α-SMA和转化生长因子β1（TGF-β1）的分布和表达。结果 再灌注后IR组的Scr和BUN水平逐渐升高，48h达到最高峰。IR组病死率为32％（8／25），假手术（Sham）组病死率为0（0／22）。再灌注48hIR组出现近端肾小管上皮细胞广泛性坏死和少量凋亡；IR组术后5周和10周有轻至中度的小管间质纤维化，术后1周肾脏α-SMA和TGF-β1蛋白表达显著升高，以后两者表达有所下降但仍高于Sham组。结论 严重的缺血再灌注损伤不仅是早期肾小管大量坏死、肾功能急剧下降和病死率增高的原因，而且可以导致小管间质纤维化，影响肾脏的远期预后。TGF-β1过表达和肌成纤维细胞增多可能介导了纤维化病变。
- 蒋素华丁小强张晓丽许迅辉何广成刘春凤陈越
- 关键词：再灌注损伤纤维化
- 坎地沙坦对糖尿病肾病小鼠血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶1表达的影响及意义被引量：25
- 2006年
- 目的研究血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)Ⅰ型受体(AT1)拮抗剂坎地沙坦(candesartan)对糖尿病肾病(D iabetic nephrop-athy,DN)小鼠血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶1(SGK1)表达的影响及意义。方法采用链脲佐菌素(STZ)单次腹腔注射诱导小鼠糖尿病肾病(DN)模型。将正常C57BL/6小鼠随机分成3组,每组12只:正常对照组(N组)、糖尿病肾病组(D组)、Candesartan治疗组(DC组)。治疗8 wk后取肾组织,观察肾脏病理改变;半定量RT-PCR法检测各组肾皮质SGK1及结缔组织生长因子(CTGF)mRNA的表达;W estern b lot检测各组肾皮质中SGK1及CTGF蛋白的表达。结果与N组相比,D组小鼠肾重/体重、24 h尿蛋白量,肾小球滤过率均明显增加;肾皮质中SGK1、CTGF mRNA及蛋白质的表达均明显升高。经Candesartan干预后(DC组),相应生化指标较D组有明显改善,SGK1、CTGF的表达水平较D组亦有明显下调。纤维化指标CTGF的表达与SGK1呈正相关。结论Candesartan可以延缓糖尿病肾病的肾脏纤维化过程,它对细胞内SGK1信号转导途径的抑制作用可能是其抗纤维化作用的主要环节,该作用与AngⅡ-AT1途径被阻断有关。
- 姜华军刘建社朱忠华王全胜张晓丽王玉梅冯玉锡
- 关键词：坎地沙坦结缔组织生长因子糖尿病肾病
