张永琦
- 作品数：3 被引量：13H指数：1
- 供职机构：第四军医大学唐都医院更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 父源印记基因H19印记控制区域的DNA甲基化程度与男性少精、弱精不育症的相关性研究
- 目的 研究父源印记基因H19印记控制区域的DNA甲基化程度与男性少精、弱精不育症的相关性.方法 通过不连续密度梯度离心方法纯化精子,用亚硫酸氢盐处理精子样品,PCR扩增后测序,进一步用BIQ Analyzer软件对目的基...
- 李建波王晓红李博梁新新王珺马夜肥张永琦刘正闵保华马旭辉
- 父源印记基因H19印记控制区域DNA甲基化与少、弱精子症相关性分析被引量：13
- 2013年
- 目的:研究印记基因H19印记控制区域的DNA甲基化程度与男性少、弱精子症的相关性。方法:通过染色体核型分析和Y染色体微缺失检测排除染色体因素干扰,进一步借助精液常规参数、伊红染色以及精子形态等指标,筛选出18例单一因素少精子症患者(浓度<15×106/ml,其余指标均正常)和20例单一因素弱精子症患者(前向运动精子百分率<32%,其余指标均正常)用于DNA甲基化检测;提取精子样本全基因组DNA,进行亚硫酸氢盐处理、PCR扩增目的基因片段并测序;通过BIQ Analyzer软件对测序结果进行质控和DNA甲基化程度分析。20例正常生育男性精液标本作为对照组。结果:与对照组甲基化丢失率[(0.30±0.06)%]相比,少精子症患者的H19印记控制区域的DNA甲基化丢失程度显著增高[(9.19±2.45)%],尤其当精子浓度<3×106/ml时,差异达到极显著水平(P<0.01)。在弱精子症患者中H19印记控制区域的DNA甲基化丢失程度[(0.30±0.07)%]和模式均与对照组无显著差异(P=0.62)。进一步重点分析了CTCF6位点的DNA甲基化状态,少精子症患者的DNA甲基化丢失程度[(2.67±0.75)%]显著高于对照组[(0.05±0.03)%]和弱精子症组[(0.03±0.02)%],而后两者之间无显著差异(P=0.35)。结论:H19印记控制区域的DNA甲基化程度的降低与少精子症密切相关,且降低程度与精子浓度呈显著负相关,而与精子活力无关。
- 李建波李博梁新新王珺马夜肥张永琦刘正闵保华马旭辉王晓红
- 关键词：DNA甲基化男性不育少精子症弱精子症
- 冷冻对父源印记基因H19DNA甲基化影响的长时程效应研究
- 2013年
- 目的检测冷冻及冷冻时间长短对精子的父源印记基因H19印记控制区域（ICR）的DNA甲基化程度的影响.方法以15例健康男性精液为研究对象,将每份精液样品除留少许作为对照外,其余分为两部分（每部分又等分为若干份）,一部分连同精浆一起进行程序化冷冻,另一部分则去除精浆后冷冻,并分别于冷冻后1个月、3个月和6个月时,通过亚硫酸氢盐测序PCR的方法分析H19ICR的DNA甲基化状态.结果连同精浆一起冷冻的精子样品,冷冻1个月、3个月和6个月后,H19ICR的 DNA甲基化丢失率分别为（13.62±2.06）%、（14.88±1.96）%和（15.89±2.26）%,与对照相比（12.74±2.85）%差异无统计学意义（P〉0.05）;去除精浆后冷冻的精子样品,冷冻1个月、3个月后,H19ICR的 DNA甲基化丢失率分别为（15.24±1.91）%、（13.49±2.63）%,与对照相比差异无统计学意义（P〉0.05）,而冷冻6个月后,H19ICR的 DNA甲基化丢失率高达（30.92±3.08）%,差异极显著（P〈0.01）.结论程序化冷冻对精子H19DNA甲基化的影响具有长时程的累积效应,本研究为少精子症患者或者无精子症患者通过经附睾精子抽吸术（PESA）取精后的精子冷冻保存的安全期限提供了一定的参考依据.
- 梁新新李博马夜肥李建波李超波张永琦闵保华王晓红
- 关键词：DNA甲基化基因组印迹精液保存
