彭平平
- 作品数：9 被引量：19H指数：3
- 供职机构：三峡大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖北省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 天花粉蛋白突变体的构建及其与重组天花粉在原核系统中的表达和纯化
- 2011年
- 目的:对天花粉蛋白(TCS)的第120-123位氨基酸进行缺失突变,并在原核系统中对其进行表达和纯化。方法:利用重叠延伸PCR的方法得到TCS突变体cDNA,并克隆入原核表达载体pET-28(a+)。酶切和测序鉴定后,将突变体质粒pET-28(a+)-mTCS转化BL21(DE3)表达菌,经IPTG诱导表达后,对表达产物用Ni2+-NTA亲和层析柱进行纯化和Western-blot鉴定。结果:利用重叠延伸PCR成功获得突变天花粉蛋白的编码序列,并构建pET-28(a+)-mTCS原核表达质粒。在BL21(DE3)菌中,突变体蛋白(mTCS)可被IPTG诱导性表达,并被Ni2+-NTA树脂有效纯化。结论:本实验成功获得一种突变体TCS,并建立该突变TCS的原核表达和纯化的实验方法。
- 曹卫红黄利鸣王艳林刘朝奇彭平平宋华梅尤程程黄益玲谭寒星吴燕珍
- 关键词：天花粉蛋白基因突变原核表达
- 重组天花粉蛋白高表达对人宫颈癌Caski细胞p73基因甲基化的影响
- 探索重组天花粉蛋白(recombinanttrichosanthin,rTCS)高表达人对宫颈癌Caski细胞p73基因甲基化影响的机制。利用RT-PCR、QT-PCR、Westernblot检测rTCS高表达后Cask...
- 尤程程彭平平黄益玲黄利鸣王艳林
- 重组天花粉蛋白对宫颈癌去甲基化作用研究及应用
- 黄利鸣尤程程崔蕾黄益玲宋华梅彭平平曹卫红王艳华王艳林刘瑞雪
- 主要内容：天花粉蛋白(Trichosanthin，TCS)是单链核糖体失活蛋白。临床上已应用于引产治疗异位妊娠、恶性葡萄胎、并尝试治疗肿瘤。该课题利用基因工程技术获得性质均一来源稳定的重组TCS(rTCS)，并深入探讨了...
- 关键词：
- 关键词：宫颈癌天花粉蛋白肿瘤治疗
- 重组天花粉蛋白研究进展被引量：3
- 2010年
- 目的天然天花粉蛋白(TCS)是一种拥有抗肿瘤、抗病毒的核糖体失活蛋白,但在临床应用时有细胞毒性强和诱导严重过敏反应等不良反应。利用基因工程技术和化学修饰的方法对天然TCS进行改造和修饰,以期获得高效、低毒和低免疫原性的TCS供临床和研究使用,是当前研究的热点课题,文章综述了该领域的新近研究进展。
- 彭平平黄利鸣王艳林
- 关键词：天花粉蛋白定点突变化学修饰抗原性
- 天花粉蛋白对宫颈癌Caski细胞DNMT1基因的表达和酶活性的影响被引量：6
- 2010年
- 目的研究天花粉蛋白(trichosanthin,TCS)对宫颈癌Caski细胞DNMT1基因的表达和酶活性的影响,并探讨天花粉蛋白抗宫颈癌及去甲基化机制,寻找新型去甲基化药物。方法应用RT-PCR、实时荧光定量PCR和Western免疫印迹分析检测天花粉蛋白对宫颈癌Caski细胞DNMTI基因表达的影响;应用DNMT1酶活性试剂盒检测天花粉蛋白对DNMT1酶活性的影响。结果经天花粉蛋白处理后,Caski细胞中DNM1基因mRNA及蛋白表达水平降低,体外酶活性分析发现,TCS对DNMT1酶活性有直接抑制作用。结论天花粉蛋白去甲基化的作用可能是通过抑制DNMTs的活性而实现的;天花粉蛋白有可能是新型的DNMTs抑制剂,具有潜在的临床应用价值。
- 宋华梅黄利鸣王艳林韩钰尤程程彭平平曹卫红
- 关键词：天花粉蛋白宫颈癌DNMT1基因甲基化去甲基化
- p73基因及其在妇科肿瘤中的研究进展被引量：1
- 2011年
- p73作为p53家族成员之一,因具有与p53极为类似的结构和功能受到广泛关注。其中p73基因全长模式TAp73能够引起细胞周期停滞和诱导细胞凋亡,并能作用于p53的靶基因,推测TAp73很可能是另一个新型的抑癌基因。该基因的深入研究将为癌症的诊断和治疗提供新视野。本文将对p73的结构、生物学功能及其与妇科肿瘤发生、发展、预后之间的关系简要阐述。
- 彭平平黄利鸣王艳林
- 关键词：P73肿瘤抑制基因女性生殖器肿瘤乳腺肿瘤
- 高表达重组TCS对人宫颈癌Caski细胞p73基因甲基化影响的机制研究
- 目的:观察高表达rTCS对宫颈癌Caski细胞增殖和细胞周期,及甲基化转移酶I /(DNA methyltransferase,DNMT1/)的表达和抑癌基因p73启动子区甲基化状态的影响。探索高表达rTCS是否能抑制C...
- 彭平平
- 关键词：P73基因宫颈癌DNA甲基化
- 文献传递
- 重组天花粉蛋白高表达对人宫颈癌Caski细胞p73基因甲基化影响的机制研究被引量：5
- 2013年
- 目的探索重组天花粉蛋白(recombinant trichosanthin,rTCS)高表达对人宫颈癌Caski细胞p73基因甲基化影响的机制。方法 RT-PCR、QT-PCR、Western blot检测rTCS高表达后Caski细胞中DNA甲基化转移酶I(DNMT1)的表达变化,甲基化特异性PCR(MSP)法检测p73基因5'端启动子区CpG岛甲基化状态的改变。结果宫颈癌Caski细胞p73为低表达,其启动子呈部分甲基化状态。高表达rTCS的细胞株其DNMT1mRNA及蛋白水平的表达均降低,其中mRNA水平降低0.56倍(P<0.01),p73基因启动子甲基化程度亦有所降低,p73mRNA水平表达升高。结论高表达rTCS可能通过抑制DNMT1的表达,致使抑癌基因p73启动子去甲基化而重新表达,最终发挥抑癌基因功能抑制宫颈癌Caski细胞增殖。
- 彭平平黄利鸣韩钰尤程程方正超
- 关键词：宫颈癌抑癌基因DNA甲基化P73基因
- 重组天花粉蛋白的真核表达及其对人宫颈癌Caski细胞增殖的影响被引量：5
- 2011年
- 目的:观察重组天花粉蛋白(recombinant trichosanthin,rTCS)高表达对人宫颈癌Caski细胞增殖的影响。方法:构建真核表达质粒pcDNA3.1(-)/6His-TCS,稳定转染Caski细胞后,RT-PCR,Western-blot筛选rTCS高表达细胞株。以转染空载质粒pcDNA3.1(-)细胞株作为对照组,MTT法检测2组细胞的增殖情况,流式细胞术检测细胞周期变化。结果:成功获得高表达rTCS的Caski细胞株,rTCS高表达能够显著抑制Caski细胞增殖(P<0.01),并能将细胞抑制在G1和G2期(P<0.05)。结论:rTCS在细胞内高表达具有抗人宫颈癌细胞生长的作用,该研究为宫颈癌治疗提供了新的思路。
- 彭平平黄利鸣王艳林尤程程曹卫红宋华梅谭寒星吴燕珍
- 关键词：宫颈癌细胞增殖
