徐冲
- 作品数：20 被引量：182H指数：8
- 供职机构：中国科学技术大学更多>>
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- 相关领域：生物学化学工程医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 表达M1033的突变酶GIG138P的基因工程菌株M1033WZ及构建方法
- 徐冲滕脉坤牛立文王玉珍龚为民朱国萍伍传金杨永辉朱忠良
- 利用基因工程技术改造已获得的7号淀粉酶链霉菌M1033的葡萄糖异构酶结构基因，通过基因突变的方法改变葡萄糖异构酶的热稳定性，采取基因敲除和基因置换的方法对7号淀粉酶链霉菌M1033的染色体进行改造引入优势突变位点，获得性...
- 关键词：
- 关键词：葡萄糖异构酶基因重组基因工程菌株
- 葡萄糖异构酶的蛋白质工程
- 王玉珍牛立文滕脉坤徐冲伍传金杨永辉罗照峰
- 葡萄糖异构酶是工业上大规模从淀粉制备高果糖桨的关键酶。应用前景广阔。由于葡萄糖异构酶结构稳定，也是国际上公认的研究酶的催化机制及建立蛋白质工程技术的最好模型之一。因此该酶具有巨大的商业价值和理论意义.各国都投入大量的人力...
- 关键词：
- 关键词：葡萄糖异构酶蛋白质工程基因工程
- 表达M1033GI的突变酶GIG138P的基因工程菌株M1033WZ及其构建方法
- 本发明是一种表达M1033GI的突变酶GIG138P的基因工程菌株M1033WZ及其构建方案，涉及表达葡萄糖异构酶的基因工程菌株以及构建方法。它是以基因敲除和基因置换的同源重组方法，对7号淀粉酶链霉菌M1033的染色体中...
- 徐冲滕脉坤牛立文朱国萍伍传金杨永辉张颖廖军王庆华龚为民朱忠良王玉珍
- 文献传递
- 链霉菌M1033同源重组葡萄糖异构酶缺陷型菌株的构建被引量：5
- 1999年
- 为实现有工业生产价值的葡萄糖异构酶双突变体酶GI(G1 38P G2 47D)的稳定高效表达 ,在建立 7号淀粉酶链霉菌M1 0 33原生质体转化条件的基础上 ,构建了含 6 0 0bp不完整GI(G1 38P G2 47D)结构基因片段的插入型同源重组质粒pXW ,并通过同源重组模式整合到M1 0 33的染色体上 ,实现了GI基因的破坏 (genedisruption) ,获得了同源重组葡萄糖异构酶缺陷型菌株 .对同源重组片段的分析 ,突变引入的验证以及缺陷型菌株稳定性的检测证实了以此方法在染色体上引入突变的可行性 .
- 徐冲廖军谢文程阳朱国萍杨永辉陈承露陶丽梅牛立文王玉珍
- 关键词：葡萄糖异构酶链霉菌同源重组基因破坏
- 一种葡萄糖异构酶的247位单突变体酶和138位,247位双突变体酶及其构建方法
- 本发明提供一种蛋白质工程的定点突变方案及其SM33 GI的突变体酶和双突变体酶,其特征在于将SM33 GI的247位或在同源性比较相当于247位的Gly替换为Asp,获得的突变体酶SM33 GI G247D,其酶活较野生...
- 王玉珍徐冲牛立文王淳伍传金滕脉坤崔涛陶莉梅朱国萍杭俊朱学勇罗昭锋廖军
- 文献传递
- 哺乳动物细胞凋亡中的功能元件研究进展被引量：2
- 2000年
- 在哺乳动物细胞中 ,程序性细胞死亡 (PCD)的功能元件包括死亡受体、适配体蛋白、效应元件及调节元件。凋亡信号由适配体蛋白传导至效应元件———Asp特异性半胱氨酸蛋白酶 (Caspase) ,活化的Caspase水解一系列关键底物 ,最终导致细胞解体。Bc1 -2家族、IAPs家族、ARC和FLIPs等蛋白因子通过与适配体蛋白及Caspase的相互作用来调控PCD进程。
- 朱国萍徐冲
- 关键词：程序性细胞死亡哺乳动物
- 葡萄糖异构酶突变体酶GIG138P和GIG138P-G247D在变铅青链霉菌中的高效表达及检测被引量：2
- 2002年
- 将含有G138P单点突变和G138P G2 47D双点突变的GI结构基因 ,分别克隆入E .coli 链霉菌穿梭载体pHZ 12 72 ,成功构建了穿梭表达载体pHZGI1和pHZGI2。通过原生质体的转化 ,将穿梭表达载体导入变铅青链霉菌TK5 4菌株。 30℃振荡培养 2 4h ,加入 2 μg mL硫链丝菌素诱导表达 12h。SDS PAGE电泳表明 ,两个穿梭载体在TK5 4菌株内表达出 42 5kD特异性条带。薄层扫描显示 ,突变体酶GIG138P和GIG138P G2 47D分别约占可溶性蛋白的19%和 2 2 %。Western杂交进一步证实GIG138P和GIG138P G2 47D在变铅青链霉菌TK5
- 朱国萍张颖徐旸唐建国徐冲
- 关键词：葡萄糖异构酶穿梭载体变铅青链霉菌
- 一种葡萄糖异构酶的247位单突变体酶和138,247位双突变体酶及其构建方法
- 本发明提供一种蛋白质工程的定点突变方案及其SM33 GI的突变体酶和双突变体酶，其特征在于将SM33 GI的247位或在同源性比较相当于247位的Gly替换为Asp，获得的突变体酶SM33 GI G247D，其酶活较野生...
- 王玉珍徐冲牛立文王淳伍传金滕脉坤崔涛陶莉梅朱国萍杭俊朱学勇罗昭锋廖军
- 文献传递
- 同源重组菌株M53的构建及其作为链霉菌通用克隆受体的可行性
- 2002年
- 为了发展优良的链霉菌宿主系统 ,以带有硫链丝菌素抗性的同源重组葡萄糖异构酶 (GI)缺陷型菌株M10 33XW78,M10 33XW194为出发菌株 ,利用摇瓶、影印和负筛的方法 ,获得一株既无GI活性又对硫链丝菌素敏感的回复菌株 ,命名为淀粉酶链霉菌M5 3.通过染色体PCR检测、酶切图谱鉴定、序列分析等方法 ,确认M5 3含有和M10 33一致的 1 2kb葡萄糖异构酶基因 ,但在结构基因345～ 10 95bp片段内有 17个碱基发生突变 .这说明在染色体内自发同源重组过程中 ,有低频率的突变位点引入 .酶活力测定和SDS PAGE分析表明 ,该突变的GI基因不表达 4 2 5KD葡萄糖异构酶 ,这为M5 3菌株发展成为优良的链霉菌宿主提供了足够的表达空间 .一系列的转化实验也证明了M5
- 张颖徐冲杨永辉宫春红朱国萍滕脉坤牛立文
- 关键词：链霉菌可行性
- 植物生物反应器生产绿色疫苗研究进展被引量：14
- 2002年
- 植物生物反应器为人类提供了更为安全的疫苗生产体系。研究显示植物源性的绿色疫苗确实能诱导动物和人产生粘膜和全身性免疫应答。与传统疫苗相比 ,可食疫苗更简单、安全、稳定、经济和卫生。本文综述了绿色疫苗基因工程的研究及进展 。
- 朱国萍徐冲
- 关键词：植物生物反应器转基因植物免疫应答转基因沉默免疫耐受
