成诗银
- 作品数：46 被引量：177H指数：7
- 供职机构：第四军医大学唐都医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金全军“十五”指令性课题更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学自动化与计算机技术化学工程更多>>
- 人端粒酶催化亚基基因启动子调控的表达载体的构建被引量：6
- 2005年
- 目的:构建人端粒酶催化亚基(humantelomerase reversetranscriptase,hTERT)基因的核心启动子调控的荧光素酶报告载体,检测其在肿瘤细胞及正常细胞中表达的差异。方法:提取人HeLa细胞的基因组,利用PCR技术克隆hTERT基因的核心启动子。将其插入荧光素酶报告载体中,经SacI和HindIII酶切和PCR鉴定后,转染肿瘤细胞及正常细胞,观察两种细胞中荧光素酶基因表达的差异。结果:hTERT基因的启动子调控的表达载体在肿瘤细胞中呈高效表达;而在正常细胞中的表达极低。结论:hTERT基因的启动子具有肿瘤特异性,有可能解决肿瘤基因治疗中的靶向性问题。
- 韩明鲲张惠中成诗银
- 关键词：端粒酶催化亚基启动子
- hTERT基因启动子调控HSV-tk/GCV系统对HeLa细胞杀伤作用被引量：4
- 2006年
- 目的:研究人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因核心启动子调控的人单纯疱疹病毒胸苷激酶基因/更昔洛韦(HSV-tk/GCV)系统对宫颈癌细胞的体外杀伤作用.方法:构建hTERT基因启动子调控的tk基因真核表达载体pCI-neo/hTERT-tk,分别用脂质体法转染宫颈癌细胞(HeLa)和正常血管内皮细胞(ECV304),新霉素(G418)筛选阳性克隆扩增.用RT-PCR法比较两种细胞tk基因的表达情况;给予前药更昔洛韦(GCV),用流式细胞术检测hTERT调控的HSV-tk/GCV系统对两种细胞的杀伤作用.结果:hTERT启动子调控下的HSV-tk/GCV系统对宫颈癌HeLa细胞有明显的杀伤作用,使36.7%的细胞凋亡;而对正常细胞ECV304作用则不明显.结论:hTERT启动子调控的tk基因治疗是一种具有肿瘤特异性的治疗方法,有望解决肿瘤基因治疗中的特异性杀伤及降低毒副作用等问题.
- 卞卡张惠中任继鸿赵辉成诗银
- 关键词：末端转移酶TK基因
- 喉气管瘢痕性狭窄(附186例病因分析)被引量：5
- 1994年
- 报告喉气管瘢痕性狭窄186例,病因分析结果表明,在喉气管外伤急救处理时,只满足于气管切开,对受伤部位不加处理或处理不当,是引起狭窄的主要原因。气管切开及气管插管后致气道狭窄者,主要是切口太小或套管太大和切口位置不当及插管时间过长引起。提出对化学性食道伴气道灼伤者,不能忽视气道伤的处理,以防喉气管狭窄。对气管或喉部肿瘤切除术后,缺损软骨和粘膜较多者,留置硅橡胶T形管,可预防术后引起的喉或气管狭窄。
- 成诗银陈文弦刘文中李贵泽
- 关键词：喉狭窄气管狭窄外科手术
- 重组人可溶性凋亡素-2在人喉癌株中表达及其体外诱导凋亡作用的实验研究
- 目的:重组人可溶性凋亡素-2（肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体,TRAIL）,可以诱导多种肿瘤细胞凋亡,而对正常细胞基本无影响,但也有研究表明,TRAIL 也对人许多正常细胞诱导的凋亡敏感。人端粒酶逆转录酶（human te...
- 陈剑秋成诗银张惠中刘娟翟嵩张丽
- 文献传递
- HPV18-E6基因SiRNA对喉癌细胞的生长抑制作用
- 2008年
- 目的:探讨小分子干扰RNA(SiRNA)对喉癌细胞系Hep-2细胞中人乳头状瘤病毒HPV18型E6基因mRNA表达的干扰作用。方法:用Ambion公司pSilencer4.1CMV构建针对HPV18-E6基因的SiRNA真核表达载体,以携带HPV18-E6基因的人喉癌Hep-2细胞系为靶细胞,通过阳离子脂质体法转染SiRNA表达载体。RT-PCR分析转染后细胞HPV18-E6基因表达;Westernblot试验观察干涉后HPV18-E6蛋白的表达;流式细胞仪分析细胞增殖周期的改变。结果:成功构建了人HPV18-E6基因的RNA干涉真核表达载体psil-svvE6,并在Hep-2细胞中有效地发挥了对HPV18-E6基因表达的干涉作用。细胞周期阻滞于G0/G1期,并诱导细胞凋亡。结论:HPV18-E6基因在喉癌细胞Hep-2生长中可能起到非常重要的作用,有望成为逆转喉癌细胞永生化的靶点。
- 吴雅岚张惠中成诗银
- 关键词：SIRNA喉癌基因治疗
- survivin基因启动子调控的HSV-tk真核表达载体的构建及在人喉癌细胞中的特异性表达被引量：1
- 2006年
- 目的构建survivin基因启动子调控的人单纯疱疹病毒胸苷激酶(humansimplexvirus-thymidinekinase,HSV-tk)真核表达载体,检测其在人喉癌细胞中的表达。方法PCR克隆survivin基因启动子与tk基因,双酶切后分别插入pCI-neo真核表达载体中,酶切鉴定后用脂质体法转染喉癌细胞(Hep-2)和正常细胞(7702),RT-PCR法比较两种细胞tk基因的表达情况。结果成功构建了survivin启动子调控的tk基因真核表达载体pCI-neo/survivin-tk;并通过RT-PCR检测出survivin启动子调控的表达载体在喉癌细胞中有表达,而在正常细胞中无明显表达。结论survivin启动子具有肿瘤特异性,有可能解决喉癌基因治疗中的特异性杀伤问题。
- 卞卡张惠中高萍王燕成诗银
- 关键词：SURVIVIN基因启动子喉癌TK基因
- RFID技术在伤员救治中的应用被引量：1
- 2010年
- 介绍射频识别技术的特点、系统基本组成及工作原理,阐明野战卫勤保障指挥系统组成及各部分的功能,描述利用该系统救治伤员的流程,指出运用RFID技术具有高效、高准确度、适用范围广的优势,对野战伤员搜救很有帮助。
- 李斌张永生温凯常崇旺成诗银
- 关键词：射频识别技术通信系统
- Survivin基因启动子调控的肿瘤特异性表达载体的构建被引量：1
- 2007年
- 目的:扩增survivin基因启动子,构建survivin启动子调控的真核表达载体,验证其在肿瘤细胞的特异性表达。方法:以Hep-2细胞基因组DNA为模板,PCR扩增survivin启动子;利用核酸内切酶双酶切sur-vivin启动子基因片段和pShuttle质粒,构建载体pSurp,酶切和测序鉴定;分别双酶切pSurp载体和pEGFP-C1载体,构建survivin启动子调控的真核表达载体pSurp-EGFP,脂质体转染Hep-2细胞及血管内皮细胞ECV304,荧光显微镜下观察EGFP的表达,Western blot方法验证该基因的蛋白表达。结果:成功扩增survivin基因启动子并构建survivin基因启动子调控的pSurp-EGFP真核表达载体。脂质体法转染Hep-2细胞和血管内皮细胞ECV304,在荧光显微镜下见Hep-2细胞发出较强的绿色荧光,而ECV304细胞没有绿色荧光;Western blot的结果也确证了EGFP蛋白仅在Hep-2细胞表达。结论:Survivin启动子的成功克隆与其真核表达载体的构建,为肿瘤的特异性基因治疗奠定了实验基础。
- 白万胜王军利卞卡成诗银张惠中刘丽
- 关键词：SURVIVIN启动子绿色荧光蛋白
- 丝裂霉素C对粘膜损伤修复作用的实验研究被引量：11
- 2005年
- 目的 观察高浓度和长时间接触丝裂霉素C(MitomycinC ,MMC)对创面损伤修复的作用,以期为临床上MMC的合理应用提供依据。方法 将使用同种方法致鼻粘膜损伤的4 0只兔随机分为4组,每组10只。分别为生理氯化钠溶液对照组(A)和3组MMC实验组,B组药物浓度0 .4mg·ml-1、接触时间5min ;C组药物浓度0 .4mg·ml-1、留置;D组浓度2 .0mg·ml-1、接触时间5min。术后1月对各组粘膜愈合情况、病理形态学变化进行观察。结果 A组9例粘连,B组仅有2例粘连发生,B组与A组比较差异具有显著性的意义(P <0 .0 5 )。C组、D组均未有粘连发生。C组有6例鼻中隔穿孔,D组2例。光镜和电镜检查显示:A组成纤维细胞大量增殖,B组、C组、D组的成纤维细胞增殖受到抑制,B组创面修复良好,C组、D组中可见大量坏死细胞,粘膜上皮不连续,D组有结构异常的合胞纤毛和裸纤毛出现。结论 MMC能有效的抑制成纤维细胞增殖,但是高浓度和长时间接触MMC对于创面愈合均有不良影响。应用浓度0 .4mg·ml-1MMC ,接触时间5min对于鼻粘膜修复是安全、简单而有效的。
- 张丽陈文弦成诗银崔鹏程陈剑秋刘志
- 关键词：丝裂霉素C病理形态学变化鼻粘膜损伤电镜检查坏死细胞粘膜修复
- 卡那霉素内耳中毒对豚鼠外淋巴液中SOD含量的影响
- 1999年
- 目的：通过对豚鼠实验性卡那霉素（ＫＭ）内耳中毒时血清及耳蜗外淋巴液中ＳＯＤ含量的检测，以探讨ＫＭ耳毒性内耳损伤自由基产生与可能的作用机制．方法：用放射免疫法和硫代巴比妥酸荧光法测定豚鼠实验性ＫＭ内耳中毒时血清和耳蜗外淋巴液中ＳＯＤ及耳蜗组织中丙二醛（ＭＤＡ）的含量，测定了内耳中毒前后脑干诱发电位（ＡＢＲ）阈移变化．结果：应用ＫＭ１２ｄＡＢＲ阈移明显增高的豚鼠ＭＤＡ含量也相应明显增高，而血清及外淋巴液中的ＳＯＤ则相反出现明显减少（Ｐ＜０．０１）．结论：ＫＭ听器损伤时血清及耳蜗组织中氧自由基反应增强可能是氨基糖甙类抗生素耳毒性听器损伤的因素之一．
- 成诗银高鹏飞高鹏飞陈文弦孙永柱
- 关键词：卡那霉素副作用超氧化物歧化酶
