成鹰
- 作品数：43 被引量：109H指数：6
- 供职机构：海南大学农学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金海南省教育厅高等学校科学研究项目国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：生物学农业科学医药卫生更多>>
- 海南坡鹿HSF1 cDNA的克隆与表达
- 对热休克转录因子1-HSF1,的研究对于热休克反应分子机制的阐释具有重要的理论意义。本研究通过RT-PCR和/]RACE方法扩增海南坡鹿HSF1-hdHSF1, cDNA全长,将扩增产物与pMD20-T载体连接,重组质粒...
- 成鹰
- 关键词：海南坡鹿克隆
- 文献传递
- 羊种布鲁氏菌Omp10基因的克隆及原核表达被引量：8
- 2014年
- 根据GenBank公布的羊布鲁氏菌(B.melitensis)M5-90株外膜蛋白(outer membrane protein,Omp)基因序列,设计1对引物,以其全基因组为模板,采用PCR技术对其进行扩增,得到381bp的目的片段,连接入pMD20-T载体,转化E.coli DH5α感受态细胞;测序正确后,构建pET-28a-Omp10原核表达质粒,再将该质粒转化入E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达融合蛋白His-Omp10,用SDS-PAGE和Western blotting进行分析。结果表明,成功构建了含Omp10基因的原核表达载体,并在E.coli BL21(DE3)中表达了Omp10基因,诱导得到的融合蛋白经鉴定与目的蛋白大小一致,证明Omp10得到成功表达。该试验为布鲁氏菌病的进一步研究奠定基础。
- 徐开莲朱华培赵天靖贾晓晓郭莳雨庞峰焦寒伟成鹰杜丽史巧芸荣辉张珈宁王凤阳
- 关键词：布鲁氏菌原核表达克隆
- 流式细胞仪在免疫学研究中的应用被引量：19
- 2008年
- 随着现代激光技术、电子检测技术和电子计算机技术等的迅速发展,流式细胞仪(FCM)在免疫学、生物学、遗传学、血液学、临床检验等领域中得到了更加广泛的应用。在免疫学研究领域,FCM以快速、灵活及定量等特点被广泛地应用于基础研究和临床治疗的各个方面,尤其是与单克隆抗体技术的结合,使其在免疫分型、分选、免疫监测、免疫细胞的系统发生及特性研究等方面发挥了重要的作用,成为现代免疫学研究不可缺少的工具。该文对近年来流式细胞仪在免疫学研究中的应用进展进行了综述。
- 刘涛张巍王凤阳杜丽成鹰
- 关键词：流式细胞仪免疫学
- 布鲁氏菌外膜蛋白16基因的克隆及原核表达被引量：6
- 2013年
- 为了成功克隆外膜蛋白16(outer membrane proteins 16,Omp16)基因并对其进行原核表达,试验根据GenBank中羊布鲁氏菌M5-90株外膜蛋白Omp16基因序列(登录号:JF918760.1)设计1对引物,从布鲁氏菌基因组中扩增出大小约为507bp的目的基因片段,凝胶回收纯化目的片段,连接入pMD20-T质粒,转化E.coli DH5α并测序,测序正确后再亚克隆入pET-28a(+)表达载体,构建重组质粒pET-Omp16,转化入E.coli BL21(DE3),经IPTG诱导其表达,最后用Western blotting分析方法鉴定诱导得到的蛋白。结果表明,成功构建了pET-Omp16原核表达载体,并在E.coli BL21中表达了Omp16基因,诱导得到的蛋白经鉴定与目的蛋白大小一致,证明成功表达了目的基因。
- 贾晓晓焦寒伟郭莳雨史巧芸荣辉张珈宁朱华培杜丽成鹰王凤阳
- 关键词：布鲁氏菌克隆原核表达
- 海南原鸡PDCD10的克隆、表达及其蛋白的生物信息学分析被引量：5
- 2010年
- 通过克隆、表达海南原鸡程序性细胞死亡分子10(Programmed cell death10,PDCD10)基因,对其蛋白进行生物信息学分析。采用RT-PCR方法克隆得到海南原鸡PDCD10基因CDS区,将扩增产物与原核表达载体pET42a连接,构建pET42a-PDCD10重组质粒,经IPTG诱导表达后,进行SDS-PAGE和Western blot分析;运用生物信息学软件对所获得基因的核苷酸序列进行分析,并预测其编码蛋白的理化性质及二级结构等。克隆获得了PDCD10639bp的CDS区核苷酸序列,融合蛋白分子量约为57ku,生物信息学分析发现,PDCD10CDS区包括1个639bp的开放读码框,编码212个氨基酸。该蛋白不含信号肽,无跨膜区,二级结构中存在大量α-螺旋。研究结果为进一步开展海南原鸡PDCD10的功能研究奠定了坚实的基础。
- 陈欢陈品林杜丽曹献英成鹰刘涛雷明吴科榜王学梅胡日查王凤阳
- 关键词：克隆生物信息学分析
- 布鲁菌外膜蛋白Omp22基因的原核表达与生物信息学分析被引量：1
- 2015年
- 克隆布鲁菌Omp22基因,原核表达后进行生物学信息分析。根据GenBank中羊种布鲁菌M5-90株基因组PCR扩增出639bp的目的基因片段,构建克隆重组质粒pMD-20T-Omp22,转化入E.coli DH5α。测序正确后构建表达重组质粒pET-28a-Omp22,转化入E.coli BL21(DE3)。IPTG诱导表达,Western blot鉴定诱导融合蛋白。结果表明,成功克隆Omp22基因,构建pET-28a-Omp22原核表达载体,在E.coli BL21(DE3)中表达Omp22基因。DNA Man和BIOEDIT软件生物性息学分析Omp22融合蛋白二级结构中α-螺旋占22.17%;伸展链占19.81%;β-折叠占2.83%;无规卷曲占55.19%。说明该蛋白具有较高亲水性。
- 朱华培赵天靖徐开莲贾晓晓郭莳雨史巧芸庞峰荣辉张珈宁成鹰焦寒伟杜丽王凤阳
- 关键词：布鲁菌克隆原核表达生物信息学分析
- 中草药饲料添加剂提高畜禽生产性能机制研究进展
- 2005年
- 中草药由于具有资源丰富、历史悠久、不易产生耐药性、无残留、毒副作用小、功能全面的优点,现已成为饲料添加剂领域研发的热点.本文总结了近十年来的研究成果,从中草药饲料添加剂提高畜禽生产性能的机理方面做一综述,以期为今后该领域的科研及生产提供理论依据.
- 李笑春周夏蕾成鹰
- 关键词：中草药畜禽
- 海南坡鹿HSF1cDNA克隆和功能研究
- 王凤阳许世英吴科榜杜丽成鹰韩新畴满初日嘎林贤梅符运南林杰才倪承结
- 该项目首次建立了海南坡鹿外周血白细胞cDNA文库，克隆了海南坡鹿HSF1cDNA全长，并进行了生物信息学分析，进行了原核表达以及目的蛋白的鉴定，为阐释海南坡鹿热应激相关基因表达的分子机制提供了理论依据。该研究结果对于海南...
- 关键词：
- 关键词：海南坡鹿生物信息学分子机制
- 水牛MD-2 cDNA基因的克隆与原核表达被引量：1
- 2011年
- 为探讨水牛抵抗革兰阴性菌感染的免疫机制,克隆、表达了水牛髓样分化蛋白-2(bMD-2)基因,并用Western blot进行鉴定。采用RT-PCR方法从水牛外周血白细胞中扩增bMD-2基因,构建pET28a-bMD-2表达载体,转化至大肠埃希菌BL21(DE3)中,IPTG诱导表达,进行SDS-PAGE和Western blot分析。结果显示,bMD-2基因含有一个483 bp的开放阅读框,编码161个氨基酸;37℃条件下,经1 mmol/LIPTG诱导表达6 h后,His-bMD-2在E.coliBL21中表达量最高,并以包涵体的形式存在,融合蛋白的分子质量约为25 ku。结果表明水牛MD-2原核表达载体成功构建并表达,为继续深入对水牛MD-2基因功能的研究提供参考。
- 焦寒伟杜丽雷明张冬琳郝永昌张晓茹匡文华成鹰王凤阳
- 关键词：水牛MD-2克隆原核表达
- 海口和三亚11个猪场戊型肝炎病毒急性感染情况的调查被引量：1
- 2007年
- 目的调查海口和三亚地区商品猪中戊型肝炎病毒急性感染情况,为制定相应的戊肝防制策略提供重要资料。方法应用ELISA方法,对海口和三亚的11个养猪场的69头成年猪进行了HEV急性感染情况的血清学调查。结果在海口和三亚地区11个猪场的69头猪中,抗-HEVIgM抗体阳性的情况只存在于4个猪场中,并且阳性率相差也较大,最高的达50%,最低的5.6%,总共9只,总阳性率13%。结论在海口和三亚两地区成年猪中,存在HEV的急性感染。
- 杜丽李布勇廖起智王凤阳张莉娜王轶申明霞成鹰刘涛
- 关键词：戊型肝炎病毒急性感染酶联免疫吸附试验
