方飞
- 作品数：4 被引量：2H指数：1
- 供职机构：温州医学院附属第一医院更多>>
- 发文基金：温州市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 大鼠FXYD5基因的克隆及重组腺病毒载体的构建
- 2008年
- 目的:克隆大鼠离子通道相关蛋白(FXYD5)基因全长cDNA,构建携带FXYD5基因的重组腺病毒载体,为进一步研究其在自发性高血压大鼠(SHR)中的功能作准备。方法:采用cDNA末端快速扩增的方法获得全长cDNA,并插入到载体pGEM-T Easy中测序分析。将FXYD5基因cDNA克隆至穿梭载体pAdTrack-CMV中,随后在BJ5183细菌中与骨架载体AdEasy-1同源重组。筛选阳性克隆,酶切、测序鉴定正确后,重组载体磷酸钙-DNA共沉淀法转染AD293细胞,获得携带FXYD5基因的重组腺病毒。结果:大鼠FXYD5基因全长cDNA被成功地克隆;FXYD5重组腺病毒载体被成功地构建。结论:运用细菌内同源重组的方法可以在大肠杆菌中快速高效地构建腺病毒载体;FXYD5重组腺病毒载体的成功构建为探讨FXYD5的生物学功能奠定了基础。
- 李小旺方飞施翔翔黄晓燕张怀勤杨德业
- 关键词：腺病毒基因
- 自发性高血压大鼠FXYD5基因表达的时空分布研究
- 目的:研究大鼠FXYD5基因表达在自发性高血压大鼠(Spontaneously Hypertensive Rat,SHR)及对照的正常血压大鼠(Wistar-Kyoto,WKY)的时间与空间分布差异.
方法:...
- 方飞李小旺施翔翔黄晓燕龚永生张怀勤杨德业
- 关键词：自发性高血压基因表达发病机制
- 文献传递
- 自发性高血压大鼠致病基因群的初步筛选
- 杨德业陈长曦张怀勤黄晓燕余祝善洪承吕陈锡文李安乐徐力辛方飞李小旺
- 该课题在实验中已从自发性高血压大鼠(SHR)和正常大鼠(WKY)的阻力血管组织中(肠系膜和肾)提取总RNA，并建立cDNA文库，用基因芯片和定量RT-PCR的方法对两组基因表达进行比较、筛选，获得在SHR组mRNA表达水...
- 关键词：
- 关键词：高血压基因
- 自发性高血压大鼠FXYD5基因表达的时空分布被引量：2
- 2009年
- 目的:研究大鼠FXYD5(FXYD domain-containingion transport regulator5)基因表达在自发性高血压大鼠(SHR)及正常血压大鼠(Wistar-Kyoto,WKY)的时间与空间分布差异。方法:取4周、8周、13周及21周龄SHR的肾脏、肝脏、肠系膜二、三级动脉分支、大脑和心脏组织,以同周龄WKY作对照,采用Northern blotting方法分析FXYD5 mRNA表达丰度。结果:Northern blotting的结果显示:13周、21周龄SHR的肾脏组织FXYD5基因表达丰度较同周龄WKY低;在肺组织,除8周龄该基因的表达水平在SHR组略低于对照组外,其它周龄两组没有差别。结论:FXYD5基因在SHR中有着特异性的组织分布特点,并且在不同周龄的SHR,FXYD5基因在肾脏的表达水平不是恒定不变的,在时间上呈一钟形变化。提示FXYD5基因可能是一个高血压相关的基因,可能与高血压的发病有关。
- 方飞李小旺施翔翔黄晓燕龚永生张怀勤杨德业
- 关键词：基因自发性高血压大鼠基因表达
