目的研究法尼酯X受体(farnesoid X receptor,FXR)对B类清道夫受体Ⅰ(scavenger receptor class BtypeI,SR-BI)表达的调控。方法FXR配体androsterone不同浓度处理Eahy926细胞,RT-PCR检测FXR特异靶基因小异源二聚体伴侣受体(small heterodimer partner,SHP)表达量的变化。RT-PCR和Real-timePCR分析经androsterone处理后Eahy926细胞中SR-BImRNA表达的变化。用Western blot检测SR-BI蛋白表达的变化。结果经androsterone刺激,Eahy926细胞中SHP的表达明显升高,表明FXR被活化。在经androsterone刺激的血管内皮细胞中,SR-BI在转录水平和翻译水平,表达均显著上升。结论FXR可在血管内皮细胞系Eahy926中上调SR-BI的表达水平。
目的探讨法尼酯X受体(farnesoid X receptor,FXR)在肝细胞中对B类清道夫受体I(scavenger receptor class B type I,SR-BI)表达的影响及可能机制。方法用FXR的特异性激动剂GW4064刺激胚胎肝细胞L02,经RT-PCR检测FXR特异性靶基因SHP(small heterodimer partner)mRNA的表达;经RT-PCR、荧光实时定量PCR和Western blot检测SR-BI的表达;在线分析、预测SR-BI基因启动子区中FXR的可能结合位点;最后经RT-PCR检测FXR的靶基因PPARγ(过氧化物酶体增殖物激活受体γ)mRNA的表达。结果FXR的特异性配体GW4064作用于L02细胞后,SHP mRNA表达明显上调,表明FXR在L02细胞中具有功能活性。FXR活化后可在转录和翻译水平上调SR-BI的表达,同时上调PPARγ的表达。经在线分析,未在SR-BI启动子区域找到FXR的经典结合位点。结论FXR在肝细胞中可上调SR-BI的表达,其机制可能与上调PPARγ有关。
目的研究肝X受体(liver X receptor,LXR)对血管内皮细胞珠EA.hy926中内皮素1(endo-thelin-1,ET-1)表达的影响,并初步探讨LXR调节ET-1表达的分子机制。方法在培养的EA.hy926中加入LXR的特异性配体GW3965,作用28h后收集细胞及培养上清液。细胞经Trizol法提取总RNA,以RT-PCR检测ET-1 mRNA水平的变化,以放射免疫法测定细胞上清液ET-1含量的变化;将克隆有ET-1启动子区的荧光素酶报告基因质粒phET1-Luc(克隆于pGL3-Basic)、pCMX-LXRα、pCMX-RXRα和内参照质粒psv-β-gal共同转染于EA.hy926细胞,经荧光素酶报告基因检测研究LXR对ET-1启动子活性的影响,从而初步了解LXR调节血管内皮细胞ET-1表达的分子机制。结果LXR特异性配体GW3965能够抑制血管内皮细胞EA.hy926中ET-1的mRNA和蛋白表达水平,并且抑制ET-1启动子的转录活性。结论活化血管内皮细胞LXR可下调ET-1的表达,且该作用与LXR抑制ET-1基因启动子的活性有关。
