曲朝杰
- 作品数：8 被引量：25H指数：3
- 供职机构：山东农业大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金“十一五”国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 阳离子脂质体在转基因畜禽中的应用
- 2009年
- 脂质体是由可生物降解的磷脂组成的双分子层结构,与生物膜有较大的相似性和组织相容性。阳离子脂质体作为一种新型的基因转移载体,以其生产简便、毒性低、无感染危险等优点在转基因领域越来越受到研究人员的青睐。随着转基因动物研究的不断深入,阳离子脂质体更是成为当今各种转基因方法中首选的非病毒类外源基因载体,在保护外源基因和提高其转染效率方面都发挥着重要作用。就阳离子脂质体的结构形式、介导基因转移的机制及其目前在转基因畜禽领域中的研究进展做一综述。
- 张鑫苗向阳李军训曲朝杰
- 关键词：阳离子脂质体转基因畜禽
- 支气管败血波氏杆菌PCR检测方法的建立和应用被引量：4
- 2009年
- 根据支气管败血波氏杆菌ptxA基因设计1对引物,扩增特异的872bp核酸片段,建立了应用PCR检测支气管败血波氏杆菌的方法。特异性试验结果表明,3株支气管败血波氏杆菌参考菌株均能扩增出872bp特异性的核酸片段,兔源性的大肠杆菌、巴氏杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄菌的扩增结果均为阴性。敏感性试验结果表明,PCR的最低检出限量为210个支气管败血波氏杆菌。利用建立的PCR检测方法对22株从山东省泰安地区某兔场采集的疑似兔支气管败血波氏杆菌病病兔鼻黏液棉拭子进行检测,结果19株为阳性。并同时进行普通血清学方法和细菌学方法,对检测结果进行了比较,结果显示,PCR方法阳性检出率高于其他检测方法。
- 肖海君崔金生翁立雪王小娥杨春晓曲朝杰朱彩霞刘冠华朱瑞良
- 关键词：支气管败血波氏杆菌PCR
- 抗菌肽的研究进展被引量：2
- 2009年
- 抗菌肽是一种广泛存在于生物界的抵抗病原微生物入侵的重要防御分子。它是生物先天免疫的重要防御物质，具有广谱抗菌、抗病毒、抗真菌、抗寄生虫及抗肿瘤等生物活性，并且不易产生耐药性，是一类极具潜力的肽类抗生素。文章从抗菌肽的种类、结构特点、作用机制、基因工程等方面阐述了其研究的最新进展。
- 曲朝杰苗向阳朱瑞良张鑫
- 关键词：抗菌肽抗菌活性基因工程
- 小鼠精子形成各阶段转基因效率的研究被引量：2
- 2009年
- 在过去的近30年中,转基因技术在哺乳动物基因表达方面研究的应用已经成为实验生物学及应用生物学领域最为显著的进展之一.传统的制作转基因动物方法有显微注射法、逆转录病毒感染法和胚胎干细胞法等,但每种方法都有其缺陷,限制了其在今后转基因动物研究中的广泛应用.对小鼠体内生殖细胞进行外源基因转染,研究精子形成过程中制作转基因小鼠的效率.首先运用睾丸注射法将被脂质体包裹的绿色荧光蛋白表达载体(pIRES2-EGFP)注射到公鼠睾丸及附睾内,然后根据精子形成的不同阶段,分别于注射后7、16、30和42天与发情母鼠合笼,利用PCR和DNA印迹方法对新生小鼠进行基因组DNA检测.在各阶段所得新生小鼠中PCR阳性率分别为6.82%、0、56.86%和42.86%,DNA印迹检测阳性率分别为6.82%、0、47.06%、34.69%.经活体荧光成像系统及荧光显微镜分析,转基因小鼠呈现绿色荧光表达.通过比较精子生成各阶段转基因效率高低,为以后通过用睾丸内注射法转染雄性生殖细胞高效制作转基因动物提供了理论依据.
- 张鑫苗向阳尹逊河马艳芳曲朝杰张秋婷
- 关键词：精子形成转基因鼠
- 抗菌肽Thanatin转基因小鼠建立的初步研究
- 2010年
- 人工合成抗菌肽Thanatin基因的3条片段,利用重叠延伸PCR扩增技术得到完整的Thanatin基因,通过分子克隆方法构建出pIRES2-EGFP-Thanatin重组表达载体。然后与脂质体混合,采用睾丸打点注射将新构建的抗菌肽基因注入小鼠睾丸内,共注射公鼠5只。6周后与雌鼠交配,对新生仔鼠进行断尾,提取尾尖基因组DNA,利用PCR和Southern印迹方法对其进行检测。结果显示,得到的52只新生仔鼠中PCR检测阳性率为38.46%,Southern印迹检测阳性率为30.77%;在活体荧光成像系统下转基因小鼠呈现绿色荧光表达。通过睾丸注射法使Thanatin基因在小鼠的基因组中得到整合,为进一步研究抗菌肽的作用机理、培育抗病动物品种以及通过建立转基因动物生物反应器进行抗菌肽的大量生产奠定了基础。
- 张鑫尹逊河苗向阳曲朝杰张秋婷马艳芳
- 关键词：抗菌肽转基因鼠
- 利用精原干细胞建立转基因动物的研究进展被引量：6
- 2009年
- 精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs)是雄性哺乳动物体内的一种成体干细胞,在睾丸微环境中既具有自我更新潜能,又具有定向分化潜能,是自然状态下出生后,动物体内在整个生命期间进行自我更新并能将基因传递至子代的唯一成体干细胞。精原干细胞在建立转基因动物中具有重要的应用价值,现已成为转基因研究领域的热点之一。介绍了精原干细胞的来源、形成、类型及分化,同时对其在转基因动物研究中的应用做一综述。
- 张鑫苗向阳尹逊河马艳芳曲朝杰张秋婷
- 关键词：精原干细胞转基因动物
- 抗菌肽在转基因动植物中的研究进展被引量：8
- 2009年
- 抗菌肽是一类广泛存在于生物界的小分子短肽,具有广谱的抗菌、抗病毒、抗寄生虫及抗癌等生物活性。将抗菌肽基因转入动、植物体内,不仅可以提高动、植物的抗病能力,而且有望通过转基因动、植物来大量生产抗菌肽,具有重要的研究价值和广阔的应用前景。就抗菌肽的特性、抗菌机理及其在转基因动、植物中的研究做一简要的综述。
- 张鑫苗向阳尹逊河马艳芳曲朝杰张秋婷
- 关键词：抗菌肽转基因抗菌机制
- 三种常见鸡胚胎性疫病病原人工共感染的试验检测被引量：3
- 2010年
- 近几年,家禽发生多种病原共感染的现象非常普遍,多种病原共感染常常引起非典型的病变,并进而导致重大的经济损失。细菌性胚胎性疫病病原种类较多,且大多是条件性致病菌,由不同的细菌多重感染诱发的疾病越来越常见,鸡毒性支原体(Mycoplasma gallisepricum,MG)、鸡沙门氏菌(Salmonella Avium)、禽波氏杆菌(Bordetella Avium)为三种常见鸡胚胎细菌性疫病的病原。因此,本研究针对这三种常见鸡胚胎细菌性疫病的病原进行了共感染的分析与检测。目的在于研究这三种微生物的共感染的发病情况、病理变化、病原微生物的分布及其消长规律,以及与单独感染的差别。通过本研究为鸡场中此类疾病提供理论依据。方法:分别对1日龄SPF雏鸡(10只/组)和11日龄SPF鸡胚(10枚/组)进行3种病原、2种病原、1种病原的感染。随时进行生长情况的观察,对死亡雏鸡、鸡胚进行剖检。结果,无论通过肉眼观察和还是病理学观察,3种病原共感染的雏鸡和鸡胚病变最严重,出现死亡时间最早,并且死亡率最高,两种病原共感染次之,但是多种病原共感染情况都比一种病原单独感染严重。为了进一步研究发生共感染之后,病原的分布及其随时间的消长规律,分别对剖检雏鸡与鸡胚取样,进行IFA与PCR的检测,结果表明,支原体的侵袭,气囊感染最严重,肾脏次之,其后是肝脏。波氏杆菌与沙门氏菌在肝脏和法氏囊感染最严重,肾脏和肺脏次之,另外,对于波氏杆菌感染鸡,从皮下也有大量病原菌存在。雏鸡在感染24 h内各病原含量呈快速增长趋势,36 h之后达到高峰,然后下降,在三种病原共感染的雏鸡的组织中,每种病原的含量与单独感染、双重感染的含量相差不大。鸡胚在感染24 h内各病原含量呈增长趋势,24 h之后下降,多种病原共感染的鸡胚分离得到的单独一种病原的含量略低于单独感染的鸡胚。本研究通过�
- 翁立雪朱瑞良朱彩霞刘冠华曲朝杰朱明华
- 关键词：共感染禽波氏杆菌沙门氏菌鸡毒支原体
