朱玉德
- 作品数：11 被引量：166H指数：6
- 供职机构：苏州大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人脑胶质瘤干细胞初步研究被引量：33
- 2007年
- 目的 从人脑胶质瘤体外细胞系和胶质瘤组织中分离、鉴定肿瘤干细胞，为进一步研究其生物学特性奠定基础。方法 将人胶质瘤SHG44细胞和手术标本制成的单细胞，分别用含血清培养基（DMEM＋10％FBS）和无血清培养基（DMEM／F12，添加bFGF、LIF和EGF）培养。用CD133免疫磁珠筛选，流式细胞仪和免疫荧光共聚焦显微镜检测干细胞、祖细胞和分化细胞特异性标志物。结果 SHG44细胞培养1周，用CD133磁珠分离得到的CD133^＋细胞的比例：血清组为0．021％，无血清组为1．2％。流式细胞仪检测：（1）Hoeehst33342一细胞比例：血清组为1．5％，无血清组为16．4％；（2）nestin^＋细胞比例：血清组为7．2％，无血清组为51．05％；（3）免疫磁珠分离的CD133^＋细胞再用流式细胞仪测得的CD133^＋细胞为83．02％，CD133^＋细胞群中有3．32％的CD133^＋细胞。标本源肿瘤细胞在无血清条件下培养两天后CD133^＋磁珠分离CD133^＋细胞比例为4％。CD133^＋细胞在分化不同阶段共表达或分别表达祖细胞标志物nestin、神经元和胶质细胞特异性标志蛋白MAP2和GFAP。结论 在胶质瘤细胞系和胶质瘤组织中均存在CD133^＋的脑肿瘤干细胞，具有自我更新和多向分化潜能、在无血清培养下细胞球体中CD133^＋细胞仍占少数，而nestin^＋细胞占多数，可作为进一步研究脑肿瘤干细胞生物学特性的实验材料在相关领域中的应用。
- 朱玉德季晓燕黄强张全斌董军王金鹏王爱东兰青
- 关键词：肿瘤干细胞神经胶质瘤免疫细胞化学体外研究
- 人脑胶质瘤组织中分离与培养肿瘤干细胞被引量：69
- 2006年
- 目的从胶质瘤组织中培养、分离肿瘤干细胞,并初步探讨其生物学特性。方法采集8例人脑胶质瘤手术标本,剪碎、胰酶消化,滤网过滤收集细胞。淋巴细胞分离液除去其中的红细胞,用含EGF、LIF和bFGF的无血清培养液培养,形成细胞球体后经免疫磁珠分离获取CD133+细胞, 用有限稀释法继续在上述无血清培养基中培养得到肿瘤细胞球后连续传代培养。取第5代肿瘤干细胞,用含10％FBS培养液诱导分化。分化前后用Nestin、MAP2、GFAP免疫细胞化学染色检测肿瘤干细胞及其分化细胞的相应标志物。结果在1例间变性星形细胞、室管膜细胞混合瘤中克隆到了 CD133+细胞,这些细胞在体外培养时,能稳定维持于球形生长状态(3个月,14代),在适合的环境中随时能自我更新和增殖,并分化成MAP2+的瘤性神经元和GFAP+的瘤性胶质细胞,而CD133-细胞则无此特性。结论在胶质瘤组织中有肿瘤干细胞存在,这些细胞在体外能长期培养和传代,可为进一步研究胶质瘤的细胞生物学和分子生物学特征开拓新途径。
- 黄强董军朱玉德张全斌季晓燕王爱东兰青
- 关键词：肿瘤干细胞胶质瘤免疫细胞化学体外培养脑胶质瘤
- 起源细胞分化障碍与胶质瘤发生的分子关系被引量：16
- 2005年
- 朱玉德黄强
- 关键词：干细胞
- 人脑胶质瘤干细胞SHG-44s的克隆及初步鉴定被引量：52
- 2005年
- 目的:探讨人脑胶质瘤体外细胞系中存在肿瘤干细胞的可能性。方法:将SHG44细胞系和SHG44-9细胞株,分别应用含血清培养基(DMEM+10%FCS)和无血清培养基(DMEM/F12,添加bFGF、LIF和EGF)培养。用CD133免疫磁珠分离干细胞、Hoechst33342和NESTIN流式细胞仪、Nestin、NSE、GFAP免疫细胞化学染色检测肿瘤干细胞及其分化细胞。结果:CD133磁珠分离得到的干细胞的比例:在血清组SHG44和SHG44-9分别为0.021%和0.035%;无血清组分别为1.2%和2.3%。而Hoechst33342和CD133标记后流式细胞仪检测干细胞比例:血清组中SHG44、SHG44-9分别为1.5%、0.37%;无血清组分别为16.4%和29.1%。并且这些细胞能够增殖和分化成神经元和胶质细胞。而Nestin标记后SHG44、SHG44-9中分别有51.05%、77.53%阳性细胞。结论:体外长期传代培养的人脑胶质瘤细胞系中存在肿瘤干细胞SHG44s,CD133磁珠和Hoechst33342流式细胞仪分离和检测胶质瘤干细胞是行之有效的方法,而Nestin+细胞是干细胞分化后的祖细胞或前体细胞,不能作为分离和检测干细胞特异性标记物使用。
- 王金鹏黄强张全斌董军朱玉德王爱东兰青
- 关键词：肿瘤干细胞胶质瘤流式细胞仪免疫细胞化学
- 从人脑胶质瘤组织中克隆肿瘤干细胞和长期培养的初步研究
- 目的:我们已在体外培养的胶质瘤细胞系中克隆到了肿瘤干细胞,为了探讨这类细胞是否在胶质瘤组织中也存在而进行本研究。方法:采集8例人脑胶质瘤手术标本,原代培养形成肿瘤球,经免疫磁珠分离获取CD133+细胞,用有限稀释法在含细...
- 黄强王金鹏朱玉德张全斌董军王爱东兰青
- 关键词：肿瘤干细胞胶质瘤免疫细胞化学
- 文献传递
- 原发和复发脑肿瘤干细胞的生物学特征观察被引量：3
- 2009年
- 目的比较原发和复发脑肿瘤干细胞的生物学特征。方法源于同一患者的原发和复发脑肿瘤干细胞在干细胞培养液中长期传代培养、冻存和复苏，观察其生物学特性。结果在干细胞培养液中培养出了悬浮的干细胞球，加血清培养时能贴壁分化为多形性瘤细胞。两者都具有分化抑制特性，染色体为异倍体。肿瘤球裸小鼠原位移植，原发为局部侵袭性生长，复发为广泛浸润、播散性生长。结论对同一患者原发和复发脑肿瘤干细胞生物学特征比较，可为进一步研究肿瘤发生、发展、侵袭和播散等拓展思路。
- 吴银艳黄强董军张全斌季晓燕朱玉德刁艺王爱东兰青
- 关键词：脑肿瘤干细胞生物学特征复发
- 神经干细胞与脑肿瘤干细胞体外培养的生长特性比较
- 【目的】探索人胚神经干细胞及胶质瘤肿瘤干细胞体外分离培养的条件，并观察比较其在体外分离培养的生长特性。用CDl33免疫磁珠分选阳性细胞后为进一步研究提供材料。
【方法】神经干细胞：取米非司酮流产8．12周胎龄的...
- 朱玉德
- 关键词：神经干细胞胶质瘤肿瘤干细胞体外培养脑肿瘤
- 文献传递
- 胶质瘤干细胞的生物学特性及其与胶质瘤血管发生的关系
- 一、研究背景与目的 虽然大家都知道，血管发生（angiogenesis）的过程对于胶质瘤的生长、恶性浸润等特性来讲是一个关键性事件，但如何发生的，研究者苦苦地探索了数十年，至今仍有争论，特别是随着本世纪初才发现的肿瘤干...
- 朱玉德
- 关键词：胶质瘤血管发生干细胞生物学特性
- 脑肿瘤干细胞体外分化的形态、标志物及细胞增殖动力学特征被引量：32
- 2006年
- 目的探讨脑肿瘤干细胞(BTSC)在体外分化过程中的细胞形态、分化相关标志物表达和增殖动力学变化,为进一步研究BTSC分化走向提供实验依据。方法取同一病例初发和复发的间变性室管膜瘤患者的肿瘤手术标本,用CD133免疫磁珠分离出CD133+细胞,加血清分化,相差显微镜下观察其形态,在未分化和分化后第3、7、10、21天收集细胞,流式细胞术检测细胞CD133+、神经上皮干细胞蛋白(Nestin)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、β-微管蛋白(Tubulinβ-)Ⅲ的表达。在未分化和分化第7天做增殖周期测定。取正常神经干细胞(NSC)作为对照。结果(1)形态:BTSC由圆形到短梭形和多角形、再到长梭形及少量星形,第7天以后细胞形态往短梭形和圆形回复,出现细胞聚集成球重新飘浮在培养基中;NSC按固有规律分化。(2)标志物:BTSC和NSC未分化时CD133+和Nestin均高表达,BTSC分化后CD133+和Nestin全程表达,且先降后升,第7天表达率分别为(3·65±0·17)%和(28·99±1·26)%,第21天分别为(14·63±1·16)%和(45·46±1·27)%;GFAP和β-TubulinⅢ表达量一直偏低,但GFAP阳性表达率相对高于β-TubulinⅢ;NSC在分化第10天时失去了CD133+和Nestin的表达,GFAP和β-TubulinⅢ表达量明显增加,分别为(88·94±1·23)%和(11·94±0·36)%。(3)增殖周期及倍体:BTSC分化前为亚二倍体,分化后有少量二倍体和大量亚二倍体及超二倍体,处于G2-M期和S期的细胞比例大于NSC,复发BTSC分化后细胞组成比原发BTSC复杂;神经干细胞分化前后都为整二倍体,主要处于G0-G1期。结论细胞形态、标志物的表达、增殖周期及倍体变化反映出脑肿瘤干细胞分化走向和神经干细胞不同,前者存在明显的分化障碍。
- 季晓燕黄强董军朱玉德王爱东兰青
- 关键词：干细胞脑肿瘤细胞周期
- 红色／绿色荧光蛋白示踪胶质瘤干祖细胞在肿瘤血管形成中的作用被引量：8
- 2013年
- 目的探讨胶质瘤干祖细胞在胶质瘤血管形成过程中所起的作用。方法将转染红色荧光蛋白（RFP）基因的胶质瘤干祖细胞，原位（25ul，1×10。个细胞）或皮下（200p,1，1x10。个细胞）植入4—6周龄的表达绿色荧光蛋白（GFP）的裸小鼠内，2～3周致瘤后取移植瘤组织压成簿片后在荧光、激光共聚焦显微镜下观察肿瘤血管。结果在22个标本中根据颜色区分出血管的组成细胞有宿主源性（绿色）、肿瘤源性（红色）和两者的融合细胞（黄色）；组成肿瘤血管的细胞类型有：内皮依赖（EC），遍布肿瘤组织内；肿瘤细胞依赖型（TC）的血管拟态（VM）和EC／TC嵌合型（马赛克血管，MC）。其中VM、MC多位于肿瘤组织中心，肿瘤边缘未见到。结论携RFP的胶质瘤干祖细胞移植入表达GFP的裸小鼠体内的移植瘤模型是研究肿瘤血管发生的良好模型；胶质瘤干／祖细胞可能是肿瘤血管形成的启动细胞。
- 朱玉德代兴亮赵东亮孙超董军黄强
- 关键词：肿瘤干细胞肿瘤血管生成
