朱祯
- 作品数：269 被引量：2,819H指数：33
- 供职机构：中国科学院遗传与发育生物学研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金国家转基因植物研究与产业化专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 大豆Kunitz型胰蛋白酶抑制剂基因的克隆及其转基因烟草抗虫性初探被引量：35
- 1997年
- 从未成熟的大豆子叶中提取总RNA，利用RT－PCR方法扩增出大豆Kunitz型胰蛋白酶抑制剂基因单一目的片段，克隆到pBluescriptKS（＋）SmaI位点上。序列分析表明，该基因与报导的序列高度同源：其核苷酸序列及推论的编码氨基酸序列的同源率分别为99．5％和98．2％。由此，构建了大豆Kunitz型胰蛋白酶抑制剂基因的植物高效表达载体pBinSKTI。并采用农杆菌介导的叶盘法转化了烟草，获得的转基因烟草再生植株经抗虫测试表明：与对照烟草相比，具有明显的抗棉铃虫能力。
- 高越峰朱祯朱玉肖桂芳李向辉
- 关键词：抑制剂抗虫基因转基因烟草
- 抗虫融合蛋白,其编码基因以及用该基因生产转基因植株的方法
- 本发明通过对抗虫基因进行修饰，使其编码产物N端带有大豆SKTI的信号肽序列，C端加上内质网滞留信号KDEL序列，使抗虫基因转译产物最终特异性地定位到寄主植物细胞的内质网中，增加外源抗虫蛋白的稳定性，以提高外源抗虫物质在转...
- 朱祯邓朝阳曲强
- 文献传递
- 国槐遗传转化体系的优化被引量：9
- 2009年
- 采用根癌农杆菌介导的国槐叶盘转化法,在建立修饰的豇豆胰蛋白酶抑制剂基因(sck)转化体系过程中,对影响农杆菌转化频率的各种因素进行研究。结果表明:国槐叶片需在黑暗条件下在MS培养基上预培养5天,农杆菌菌株选用GV3101,农杆菌共培养3天较合适;农杆菌菌液浓度OD600约为0.7,感染时间10min;侵染前的菌液和共培养基中添加200μmol·L-1乙酰丁香酮(AS)对国槐遗传转化有明显的促进作用;抑制农杆菌生长的抗生素浓度以头孢霉素(Cef)500mg·L-1最好。PCR和Southern blotting检测证实sck基因已整合到国槐基因组中。
- 张晓英甘敬尹伟伦朱祯王华芳
- 关键词：国槐乙酰丁香酮槐尺蠖抗虫基因
- 在第七届全国生物多样性保护与持续利用研讨会上的讲话
- 朱祯
- 利用修饰的T7 RNA聚合酶基因建立一种植物耦联表达系统被引量：2
- 2002年
- 通过基因修饰,在T7 RNA聚合酶基因的5＇端添加了SV40大T抗原的核定位信号编码序列.利用CaMV35S启动子和修饰的T7 RNA聚合酶基因构建了植物表达载体pBBT7.同时,利用T7启动子和β-葡糖醛酸酶基因（gusA）构建了另一个植物表达裁体pBTG.通过农杆菌介导法将上述两个植物表达载体共转化烟草,共转化植株表现出较强的β-葡糖醛酸酶（β-glucuronidase,GUS）活性.上述结果表明T7 RNA聚合酶-T7启动子耦联表达系统在植物中是有效的,说明已成功构建了一种植物耦联表达系统.
- 陈峰路子显常团结徐鸿林吴茜肖桂芳朱祯
- 关键词：基因修饰核定位信号T7启动子基因表达植物基因工程
- 转sck基因水稻中标记基因表达蛋白HPT食用安全性的初步研究被引量：7
- 2005年
- 目的针对抗虫转sck基因水稻中标记基因表达蛋白HPT的食用安全性开展初步研究,主要包括该蛋白在大米中的定性、定量研究、可能的膳食摄入量估计及其潜在致敏性评估等.方法将HPT的编码序列插入带有组氨酸标签(His-tag)的原核表达载体PBV222中进行融合表达,通过脲变性和镍柱亲和层析的方法纯化融合蛋白.用纯化后的6His-HPT蛋白免疫家兔和小鼠,分别制备相应的抗HPT多克隆和单克隆抗体,进一步将这两种抗体组成双抗夹心酶联免疫检测体系,用于检测HPT在转sck基因水稻中的表达水平.在致敏性评估方面,首先将HPT序列与已知的致敏原数据库进行比较,再利用模拟的胃肠液环境进行体外消化稳定性实验.结果重组体经表达纯化后获得了高纯度(95%)的6His-HPT融合蛋白,免疫动物后获得了高效价的抗HPT多克隆及单克隆抗体,经免疫印迹检测证明所制备的抗体可与转基因水稻中及纯化出的HPT蛋白形成特异结合带.由这两种抗体组成的双抗夹心酶联免疫检测体系用于检测HPT抗原时的灵敏度为30ng/ml,可检测出转sck基因水稻叶片中HPT蛋白的表达量约为80～150ng/ml;而在相应的转基因大米中未能检出.HPT序列经与已知的致敏原数据库进行比较未见同源性,但在体外消化稳定性实验中,HPT蛋白在模拟的胃肠液环境中均迅速降解.结论就目前的检测水平来看,转sck基因大米中所含的HPT蛋白水平极低,且对消化环境不稳定,推测该标记基因表达蛋白不易引起可观察到的食用安全性问题.但利用表达的HPT蛋白直接进行动物急性毒性及致敏性实验的工作仍有待进行,有关的结果将进一步报道.
- 杨丽琛李英华杨晓光朴建华吴永宁朱祯
- 关键词：纯化抗体制备
- 外源基因在不结球白菜转基因植株后代中的表达被引量：10
- 2002年
- 应用农杆菌介导法将含有豇豆胰蛋白酶抑制剂基因和新霉素磷酸转移酶基因的重组质粒导入不结球白菜地方品种———“中脚黑叶”和“矮脚黑叶”中 ,获得抗虫转基因植株。卡那霉素抗性和抗虫性在转基因植株自交后代T1代植株中发生分离 ;在T2 代中出现 3种不同类型的株系 :抗性纯合、杂合型和敏感性纯合株系。卡那霉素抗性和抗虫性在转基因植株自交后代中的表现基本符合孟德尔显性单基因的分离规律。从T2 、T3 、T4代中选择出抗虫性纯合株系 ,并获得一批对 1～ 2龄鳞翅目小菜蛾、斜纹夜蛾幼虫的校正死亡率达 6 0
- 佘建明蔡小宁朱卫民张初贤朱祯袁希汉苏小俊李彬
- 关键词：不结球白菜转基因植株豇豆胰蛋白酶抑制剂基因抗虫性
- 植物细胞内靶向蛋白的定位被引量：11
- 1995年
- 朱祯
- 关键词：植物细胞
- 转基因玉米减少无性变异、提高成活率的研究被引量：9
- 2000年
- 通过基因枪转化法将外源抗虫基因导入 1个玉米 (ZeamaysL .)优良自交系。对受体愈伤的制备 ,抗性愈伤的筛选分化和转基因植株的移栽等方面的研究 ,采用一系列的措施 ,有效地降低了转化植株的畸形率 。
- 张莉萍荣廷昭朱祯潘光堂李晚忱
- 关键词：玉米转基因成活率
- 诸因素对转基因棉花愈伤组织的影响被引量：9
- 2001年
- 将携带外源基因的农杆菌菌液稀释 2 0 %( OD60 0 =0 .0 3 )和棉花 3～ 5d无菌苗下胚轴中部横切段共浸 5min后 ,置于 2 2～ 2 5℃共培养 2 d,其愈伤组织生长正常 ,出愈率也较高 ,是棉花对农杆菌较为理想的感受态。
- 吴霞上官小霞朱祯李燕娥
- 关键词：棉花农杆菌介导愈伤组织
