李仁立
- 作品数:35 被引量:84H指数:5
- 供职机构:三峡大学仁和医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金湖北省科技攻关计划湖北省自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 细胞色素P450-2J3基因的克隆及其在牛内皮细胞中的表达
- 2007年
- 目的:克隆大鼠CYP2J3基因并构建Pcdna3.1(+)-CYP2J3真核表达载体,检测其在牛内皮细胞中的表达。方法:实验于2004-09/2005-02在同济医院心血管实验室完成。提取大鼠肝脏组织总RNA,通过逆转录反应形成CYP2J3CDNA,采用聚合酶链反应扩增出CYP2J3基因A和B两片段,全长分别是1228bp和345bp。运用重叠延伸聚合酶链反应连接CYP2J3基因A和B两片段,扩增出大鼠CYP2J3基因全长ORF序列。用KpnI、NotI限制性内切酶位点克隆入pbluescriptSK(+)克隆载体,通过限制酶切位点AflⅡ剔除假基因CYP2J3P1,取酶切正确的pbluescriptSK(+)-CYP2J3重组质粒进行CYP2J3基因全长测序,检测到不含假基因序列。用KpnI,NotI将CYP2J3基因克隆入真核表达载体pDNA3.1(+)。用脂质体转染牛内皮细胞,免疫印迹技术鉴定其在牛内皮细胞表达。结果:运用聚合酶链反应成功克隆出CYP2J3基因A片段,全长1228bp;B片段,全长345bp,并运用重叠延伸聚合酶链反应获得CYP2J3基因ORF全长序列。将CYP2J3基因ORF全长序列克隆入pbluescriptSK(+)克隆载体,通过AflⅡ酶切位点筛选出含有CYP2J3基因的克隆质粒。全长测序CYP2J3基因,测序结果与基因GenBank提交序列完全一致,并成功构建真核表达载体Pcdna3.1(+)-CYP2J3。通过脂质体转染牛内皮细胞,免疫印迹结果显示,转染Pcdna3.1(+)-CYP2J3后的牛内皮细胞能稳定有效表达CYP2J3蛋白。结论:实验成功克隆CYP2J3基因A和B两片段,运用重叠延伸聚合酶链反应获得CYP2J3基因,并成功构建Pcdna3.1(+)-CYP2J3真核表达载体,为CYP2J3基因的功能研究和相关疾病的研究提供了可行的理想工具。
- 闫哲李仁立汪道文
- 关键词:基因克隆聚合酶链反应转染基因表达
- 室房逆传对窦房结功能和心房肌电活动影响
- 周敬群姚济华胡斌向常清李仁立吴萍李玉荣朱平骆锋
- 该研究根据VVI起搏治疗病态窦房结综合征发生房性心律失常的现象,针对室房逆传传导可能是诱因,在排除心房肌本身病变的情况下,采用心内电生理检查技术,进行了单纯心电生理学机制的研究,对起搏心房的有益作用也从电生理学机制进行了...
- 关键词:
- 关键词:房性心律失常起搏治疗心电生理学
- 不同起搏方式对病窦综合征患者房颤发生率的影响被引量:3
- 2002年
- 目的 比较病窦综合征患者经心室按需起搏 (VVI)和心房起搏 [包括单心房起搏(AAI)、房室双腔起搏 (DDD)和双房起搏 ]治疗术后前 5年房颤的发生率。方法 对永久性人工心脏起搏器植入术后 5年以上、资料完整的 117例病窦综合征患者进行连续随访 ,平均随访时间(69.3± 6.7)个月 ,其中VVI起搏 83例 ,心房起搏 3 4例。随访内容包括临床表现、心电图和起搏器参数等 ,部分患者有Holter检查资料 ,分析 5年内两组病例房颤的发生率。结果 病窦综合征患者心脏起搏治疗前 5年内总的房颤发生率为 17.0 9% (2 0 /117) ,其中经VVI起搏的 83例患者房颤发生率为 2 2 .89% (19/83 ) ,经心房起搏的 3 4例患者房颤发生率为 2 .94% (1/3 4) ,后者房颤的发生率显著低于前者 (P <0 .0 1)。结论 在起搏治疗的病窦综合征患者中 ,术后前
- 姚济华周洪莲李仁立
- 关键词:心脏起搏病窦综合征心房颤动
- 维拉帕米缓释剂防治房性心律失常的疗效观察被引量:2
- 2001年
- 目的 :为观察维拉帕米缓释剂对房性心律失常的防治作用。随访观察了频发房性早搏、房性心动过速和 /或阵发房颤患者共 2 5例。平均随访 7.5月。方法 :每例患者用维拉帕米缓释剂 12 0mg ,每日 2次口服。用药前作心电图及动态心电图 ,部分患者用药 4周后复查动态心电图。结果 :所有患者服药后早搏明显减少。治疗前后动态心电图提示 ,用药后短阵房速、房颤发作和房性早搏均显著减少 ,随访中 5例冠心病复发房颤 ,2例静脉注射西地兰恢复窦性心律后续用本药。患者服药前后的心率和心功能无明显变化。结论 :维拉帕米可有效控制房性心律失常。缓释剂型消除了短时间药物高浓度 ,减少了常规剂型可能加重缓慢性心律失常及心衰等副作用 ,其稳定的血药浓度比常规剂型更适用于治疗心律失常。对于不适合使用胺碘酮的房性心律失常患者 ,维拉帕米缓释剂是适宜的选择。
- 李仁立涂玲姚济华
- 关键词:阵发房颤房性心动过速房性早博
- 细胞色素P450 4F2基因的克隆、突变、表达和纯化被引量:1
- 2007年
- 目的构建人细胞色素P450 4F2基因野生型、V81G和V433M突变型表达载体,在大肠杆菌中表达并纯化出CYP4F2蛋白。方法用RT-PCR方法从人肾脏总RNA中逆转录扩增CYP4F2,将其插入克隆载体pMD18-T Simple Vector中,将测序鉴正确的CYP4F2基因N、C端改造,克隆构建重组表达载体pCWori+-CYP4F2(His)_4-WT。同时采用重叠PCR定点突变法构建pCWori +-CYP4F2 V81G(His)_4和pCWori+-CYP4F2 V433M(His)_4表达载体,分别转化至E.Coli XL-Blue中表达。结果经IPTG诱导可有效表达CYP4F2和突变体V81G与V433M,经Western blot分析可以观察到分子量为57 kD的诱导表达条带,该表达蛋白可与His-Probe多克隆抗体起特异反应。用His- bind亲和层析纯化得到了纯度较高的His融合蛋白。结论用基因工程技术在大肠杆菌中有效表达人CYP4F2基因野生型、V81G和V433M突变型蛋白、并得到了纯度较高的CYP4F2蛋白,为进一步研究其生物学功能及研制相应抗体奠定了基础。
- 丁虎李仁立卢志南汪道文
- 关键词:CYP4F2基因克隆突变纯化
- 心脏起搏遮盖高血钾及洋地黄中毒的心电图表现
- 1998年
- 李仁立
- 关键词:心脏起搏器高血钾心电图洋地黄中毒
- 全文增补中
- 老年人心律失常320例临床分析
- 2003年
- 朱欢丽李仁立刘晓晴
- 关键词:老年人心律失常
- 综合康复疗法与持续小剂量地高辛治疗老年充血性心衰
- 2001年
- 目的评价康复疗法与持续小剂量地高辛治疗老年充血性心衰的临床疗效。方法 4 6例老年慢性充血性心衰患者采用戒烟、修正饮食、调脂、个体化体力运动训练程序等综合康复疗法及持续小剂量地高辛治疗。结果 4 6例患者治疗后总有效率 90 %。心输出量 (L/ min)治疗前后分别为 4 .33± 0 .6 6 ,4 .80± 1.2 2 ;左室射血分数 (% )分别为37.85± 9.9,4 4 .6 5± 10 .4 ;平均心率 (次 / min)分别为 98± 13,78± 12。地高辛过量或中毒的发生率为 4 .3%。
- 周洪莲李仁立
- 关键词:综合康复治疗地高辛
- 老年2型糖尿病大血管病变与血管内皮依赖性舒张功能的相关性被引量:1
- 2004年
- 目的 探讨老年 2型糖尿病大血管病变与血管内皮依赖性舒张功能的关系。方法 采用高分辨超声以肱动脉反应性充血前后血管内径变化百分比反映血管内皮依赖性舒张功能 ,对 4 5例老年 2型糖尿病患者 (2 4例合并大血管病变 ,2 1例无大血管病变 )及 2 0例对照组进行血管内皮依赖性舒张功能测定 ,同时测定血糖、血脂及血压水平。结果 老年 2型糖尿病患者肱动脉内径变化率明显低于对照组 [(1 97± 1 75 ) %vs (7 18± 1 6 1) % ,P <0 0 1],并与患者的年龄、血糖、低密度脂蛋白、收缩压水平负相关 ,且大血管病变组肱动脉内径变化率较无大血管病变组更低[(0 4 2± 0 36 ) %vs (3 5 6± 3 2 1) % ,P <0 0 1]。结论 老年 2型糖尿病大血管病变的发生与血管内皮依赖性舒张功能紊乱密切相关。
- 涂玲李彩萍刘晓晴李仁立黄葵
- 关键词:血管病变血管内皮依赖性舒张功能血管内皮依赖性
- 单、双极射频消融猪心室肌的对比实验研究
- 1995年
- 本研究用单电极和不同间距双极消融猪心室内膜。各种方法所用射频能量均分为8组。结果:双极消融的组织学损伤分布于两电极与组织的交界面以及两电极之间。各组能量下单极、5mm及10mm双极3种方法消融深度无统计学差异,而5mm及10mm双极消融面积均大于单极消融(P<0.05)。当能量≤500J时,5mm双极消融面积大于10mm双极消融面积(P<0.05),>500J时,二者消融面积无统计学差异。
- 王扬淦陆再英赵华月宋玉娥李仁立
- 关键词:心动过速室上性射频消融WPW综合征