李永成
- 作品数：15 被引量：13H指数：2
- 供职机构：海南大学更多>>
- 发文基金：海南省重点科技项目更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程化学工程生物学医药卫生更多>>
- 南美白对虾虾壳甲壳素的提取工艺及结构分析被引量：6
- 2020年
- 为探究南美白对虾虾壳甲壳素提取工艺条件及其对甲壳素结构的影响,测定分析不同NaOH浓度和处理温度对虾壳中蛋白质的脱除效果,不同HCl浓度及处理温度、不同酸及不同固液比的乙酸对虾壳中矿物质的脱除效果,比较虾壳经不同处理后的甲壳素结构。结果表明,南美白对虾虾壳的组成成分为:水10.45%、蛋白质29.80%、矿物质37.25%、甲壳素20.49%、色素2.01%。脱蛋白质的最佳条件为NaOH浓度2.0 mol/L,处理温度70 ℃;HCl脱盐的最佳条件为HCl浓度1.0 mol/L,处理温度25 ℃;同等条件下柠檬酸、乳酸和HCl的脱盐效果基本相当,脱盐率均高于90%,乙酸的脱盐率仅为78.74%,但增加乙酸溶液添加量可使脱盐率提高至94.87%。扫描电镜结果表明,虾壳表面为无机盐与蛋白质的混合物,内部为蛋白质与甲壳素的扭曲网状结合物。红外光谱结果表明,不同处理制备的甲壳素的红外谱带大致相同,但在峰形、峰数上还存在一些差异。虾壳甲壳素的提取工艺条件不仅影响甲壳素的纯度,对其分子结构也会产生一定的影响。
- 张巧张巧
- 关键词：虾壳甲壳素脱蛋白脱盐红外光谱
- 产蛋白酶菌株的鉴定及其对虾壳的脱蛋白研究被引量：2
- 2020年
- 从虾塘沉积物中分离到一株产蛋白酶的菌株C1,采用菌落形态、生理生化特征和16S rDNA基因序列分析相结合的方法进行鉴定,进一步探究其在提取虾壳甲壳素工艺中脱蛋白的应用,并与枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)对虾壳蛋白脱除效果进行比较分析。结果表明,菌株C1被鉴定为一株蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus),其对虾壳的脱蛋白能力高于枯草芽孢杆菌。当发酵培养基中葡萄糖添加量为50 g/L,虾壳粉添加量为20 g/L,酵母膏添加量为1 g/L时,枯草芽孢杆菌和蜡样芽孢杆菌发酵5 d的蛋白酶活力分别为145.7 U/mL、220.8 U/mL,脱蛋白率分别达到80.4%、90.8%。
- 张巧张巧李永成
- 关键词：虾壳蛋白酶脱蛋白甲壳素
- 橙黄小单孢菌(Micromonospora aurantiaca)几丁质酶基因的克隆、表达、鉴定及应用
- 2023年
- 从海洋微生物橙黄小单孢菌(Micromonosprra aurantiaca)的基因组DNA中克隆到一条新型的碳水化合物18家族几丁质酶基因Machi3,并成功在大肠杆菌(Escherichia coli)中表达。该酶的最适反应温度和pH分别为55℃和7.0,在低于55℃和pH 6.0~9.0范围内稳定性较好。镁离子(Mg^(2+))、钙离子(Ca^(2+))、吐温40(Tween 40)和吐温80(Tween 80)对MaChi3的酶活力有轻微的促进作用。该重组酶对α-几丁质、胶体几丁质、虾壳粉、不同脱乙酰度(50%~95%)的壳聚糖、淀粉及纤维素均具有水解活性,其中以胶体几丁质为底物时酶活力最高(2.24 U·mg^(−1))。由扫描电镜结果可知,几丁质经盐酸(HCl)预处理后得到的胶体几丁质纤维结构变得松散,更有利于MaChi3的水解作用。以胶体几丁质为底物时动力学参数K_(m)和V_(max)值分别为5.93 mg·mL^(−1)和8.58μmol·(min·mg)^(−1)。此外,胶体几丁质经MaChi3酶解后生成的主产物为N,N-二乙酰基壳二糖,产率(几丁质)为285.54 mg·g^(−1)。该酶展现出良好的酶学特性,为其在几丁质资源中的开发和应用奠定了基础。
- 王逗游锦若申铉日李永成李永成何燕富夏光华
- 关键词：几丁质酶
- 模拟物流运输条件下冻半干金鲳鱼品质和风味变化
- 2023年
- 目的:探究半干金鲳鱼在模拟实际运输温度下的品质和风味变化。方法:以冻半干金鲳鱼为研究对象,模拟其在不同温度下的物流运输过程,测定了解冻损失率、肌原纤维蛋白构象的变化、蛋白质和脂质氧化等理化指标以及风味物质的变化规律。结果:半干金鲳鱼的蛋白质和脂质氧化程度均随运输时间的延长显著升高(P<0.05),且温度越高氧化程度越显著(P<0.05),此过程中蛋白质发生聚集且变性程度严重,而解冻损失率仅随温度升高显著增大(P<0.05)。共检测出17种氨基酸,总氨基酸、鲜味氨基酸和苦味氨基酸含量随着运输时间的延长均呈先显著上升后下降的趋势(P<0.05),温度对其含量则无显著影响(P>0.05)。半干金鲳鱼的主要挥发性物质为醛类、烃类和醇类,其中高温运输组的醛类含量显著下降,而烃类物质含量显著上升(P<0.05)。结论:冻半干金鲳鱼在较低温下运输能够减缓蛋白质的变性程度以及蛋白质和脂质氧化程度,并使其富有更多良好的风味物质。
- 段茹碧何燕富邱丹夏光华李永成
- 关键词：风味
- 一种利用微生物发酵从虾壳中提取甲壳素的方法
- 本发明公开了利用微生物发酵从虾壳中提取甲壳素的方法。本发明以虾壳为原料，洗净干燥，研磨成粉，然后加入适当浓度的葡萄糖，灭菌后首先接种枯草芽孢杆菌，然后流加适当浓度乙醇并接种醋酸杆菌继续发酵。枯草芽孢杆菌生长产生的蛋白酶降...
- 李永成张巧黄兴
- 文献传递
- 壳寡糖的制备、纯化及应用研究进展
- 2024年
- 壳寡糖(Chitooligosaccharide,COS)是几丁质或壳聚糖降解后获得的N-乙酰-D-葡萄糖胺和D-葡萄糖胺的同聚或异聚物,具有抗菌、抗氧化、抗肿瘤、免疫调节等多种生物活性,已被广泛应用于医药、食品、农业等领域。目前,酶法、物理法和化学法均已被报道用于制备COS。然而,单一法制备COS有一定的局限性,很难高效、绿色地获得具有特定聚合度和乙酰度的目标产物。因此,COS的制备已经从单一法转向至协同催化体系的探索。此外,借助超滤法、活性炭吸附法、色谱法等分离纯化技术也可以提高COS的纯度。本文对近年来COS的制备和纯化方法以及应用研究进展进行了综述,以期为高品质COS的生产以及应用领域的拓展提供理论基础。
- 郭汉忠李永莎李永成李永成夏光华
- 关键词：几丁质壳聚糖壳寡糖分离纯化
- Rhizopus stolonifer几丁质脱乙酰酶的异源表达及其与几丁质酶的协同作用研究
- 2024年
- 几丁质脱乙酰酶(chitin deacetylase,CDA)是几丁质生物转化为壳聚糖的关键酶。然而,目前报道的高活性CDAs非常少。为了获得高效的CDA,并提高其对几丁质的生物转化效率,该研究对来源于Rhizopus stolonifer中的CDA进行基因克隆、表达及纯化,获得几丁质脱乙酰酶Rs CDA1,研究其酶学性质并探究其与来源于Vibrio harveyi的几丁质酶Vh Chit2对几丁质的协同水解作用。结果表明,Rs CDA1的比酶活力为5.2 U/mg,在45℃、pH 6.5条件下活性最高,在温度低于40℃、pH 6.5~8.0保持较好的稳定性。1 mmol/L的Ca^(2+)、Mn^(2+)、Mg^(2+)、Zn^(2+)、Ba^(2+)和Co^(2+)对Rs CDA1的活力有促进作用;1 mmol/L的Ni^(2+)和Cu^(2+)对该酶有抑制作用。此外,Rs CDA1与Vh Chit2在几丁质水解中表现出良好的协同降解和脱乙酰作用。Rs CDA1与Vh Chit2(摩尔浓度比为10∶1)在50℃、pH 6.5条件下水解20 mg/mL几丁质2 h时,对几丁质酶和CDA的协同度分别达到120.3%和175.6%。与单独使用Rs CDA1相比(27.5%),两者协同水解时几丁质的脱乙酰度增加到35.3%。因此,Rs CDA1在几丁质的生物转化中具有潜在的应用前景。
- 张巧张巧
- 关键词：几丁质壳聚糖脱乙酰度
- 罗非鱼副产物蛋白水解肽的呈味分析被引量：3
- 2022年
- 为了探究罗非鱼副产物蛋白水解物中滋味活性物质的来源,该研究以罗非鱼的鱼皮、鱼头和鱼骨为原料,采用中性蛋白酶、菠萝蛋白酶、风味蛋白酶、复合蛋白酶、木瓜蛋白酶和碱性蛋白酶分别对三种副产物进行酶解,分析比较水解度、分子量、前体蛋白与滋味活性物质的关系。结果表明:三种罗非鱼副产物经过风味蛋白酶水解酶水解8 h后获得最高水解度,分别为14.29%、23.7%和31.86%。经过木瓜蛋白酶水解的副产物酶解液均呈现出显著苦味或酸味,而鱼头经过碱性蛋白酶酶解得到的水解产物具有鲜味,鱼骨则经过菠萝蛋白酶水解得到鲜味,鱼皮经过中性蛋白酶水解表现出鲜味和酸味,但鱼头却呈现出苦味。通过LC-MS/MS鉴定,胶原蛋白、肌原纤维蛋白以及肌浆蛋白是罗非鱼副产物酶解液滋味活性肽的重要味觉活性前体,这些滋味肽的分子量大部分小于1500 u,肽段中疏水性氨基酸残基对罗非鱼副产物滋味的形成具有重要作用,其中蛋氨酸在酶解液的鲜味的形成中起重要贡献。
- 甘瑞卿何燕富李永成李来好李来好申铉日申铉日
- 关键词：酶解前体蛋白
- 一种以罗非鱼加工废水生产氨基酸液体肥料的方法
- 本发明公开了以罗非鱼加工废水生产氨基酸液体肥料的方法，将罗非鱼废弃物用粉碎机打碎形成鱼糜，与麸皮按3：1混合制成固体培养基，培养基121℃灭菌15分钟，冷却后毎100g培养基接种1ml浓度为1×10<Sup>8</Sup...
- 李永成
- 文献传递
- Vibrio natriegens几丁质酶基因的异源表达及酶学性质研究被引量：2
- 2022年
- 几丁质是自然界中除纤维素外第二多的多糖聚合物,在几丁质酶的作用下生成的几丁寡糖具有较好的生物活性及应用价值。通过分子生物学手段获得高活性重组几丁质酶,有利于实现虾壳等几丁质资源的高值化利用。对来源于Vibrio natriegens中的几丁质酶基因进行克隆及诱导表达,获得重组几丁质酶VnChit4,然后通过亲和层析对该酶进行纯化,并测定其酶学性质及酶解产物。结果表明,VnChit4纯酶液的酶活力为2.66 U/mL,最适温度和最适pH值分别为50℃、pH7.0。在低于40℃、pH6~9范围内保持较好的稳定性;Ca^(2+)、Fe^(2+)、Co^(2+)对重组酶VnChit4的活力有促进作用,Mn^(2+)、Ni^(+)、Cu^(2+)和EDTA对该酶有抑制作用。以胶体几丁质为底物时,VnChit4的米氏常数K_(m)值为2.82 mg/mL,最大反应速率V_(max)为6.56 g/min·L。该酶对几丁质、虾壳粉、几丁四糖、几丁五糖和几丁六糖也表现出一定的水解作用,酶解产物主要为几丁二糖,是一种内切几丁质酶。该研究构建的重组几丁质酶表现出较好的酶活性,对其酶学性质的研究,有利于该几丁质酶的开发及虾壳几丁质的高值化利用。
- 张巧张巧
- 关键词：几丁质酶克隆表达酶学性质
