杨其恩
- 作品数：8 被引量：5H指数：2
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- 小鼠桑椹胚OPS管内解冻和直接移植
- 2006年
- 本实验对昆明白系小鼠的桑椹胚实施OPS法玻璃化冷冻，研究不同管内解冻程序对胚胎体内外发育的影响，旨在为小家畜胚胎冷冻、解冻和移植提供技术参数。采用OPS冷冻两步法（10％（体积分数）EG＋10％（体积分数）DM9：）溶液中平衡30S，移入EDFS30平衡25s）保存小鼠桑椹胚。一步法解冻是将OPS直接插到盛有0．5mol／L蔗糖的离心管中分别平衡1、2、3、4、5和6min，解冻后经体外培养结果丧明，平衡2-4min组耍胚发育率（93．58％～97．2296）与对照组（100％）无显著差异（P〉0.05）；实施两步法解冻时将OPS先后插入0．5和0．25mol／L蔗糖中，体外培养结果显示，先后平衡3和2min组囊胚发育率（100％）最佳，同对照组无显著差异（P〉0．05）。将以上方法管内解冻最佳组的胚胎用OPS管作移植导管，直接移植到受体子宫角中，其船娠产仔率（38．57％）和管外解冻组（42．8696）及新鲜对照组（51．19％）均无显著性差异（P〉0．05）。证明OPS玻璃化冷冻的小鼠桑椹胚可以进行管内解冻和直接移植，为小家畜胚胎移植提供了模型。
- 刘满清杨其恩索伦刘霖牛晔朱士恩
- 关键词：玻璃化冷冻昆明白小鼠桑椹胚
- 玻璃化冷冻胚胎管内解冻和直接移植技术的研究
- 本实验以昆明白小鼠的桑椹胚和囊胚为模型,研究玻璃化冷冻和管内解冻对胚胎体内外发育率的影响.实验一利用细管法玻璃化冷冻小鼠桑椹胚,在管内配制较大比例0.5M蔗糖溶液,解冻时以稀释玻璃化溶液EFS30.结果表明,解冻后管内停...
- 朱士恩杨其恩杨中强侯云鹏
- 关键词：桑椹胚囊胚玻璃化冷冻胚胎移植
- 文献传递
- 简易高效的胚胎管内解冻和直接移植法
- 本实验以小鼠的胚胎为模型,研究玻璃化冷冻、管内解冻后直接移植新方法。实验一利用细管法玻璃化冷冻小鼠桑椹胚,在管内配制较大比例0．5mol/L蔗糖溶液,解冻时以稀释玻璃化溶液EFS30。结果表明,解冻后管内停留3-16mi...
- 朱士恩杨其恩杨中强侯云鹏周光斌
- 关键词：胚胎玻璃化冷冻小鼠
- 文献传递
- OPS两步法玻璃化冷冻小鼠8-细胞胚胎生存发育率的研究被引量：3
- 2006年
- 目的为实验动物、家畜和人类胚胎的冷冻保存探索简易、高效的玻璃化冷冻程序。方法以小鼠8-细胞胚胎为材料,在25℃室温和37℃恒温台条件下,利用玻璃化冷冻溶液EDFS30, 对小鼠8-细胞胚胎进行玻璃化冷冻保存,解冻后培养60 h后的囊胚发育率为其体外发育能力的考核指标,同时对解冻后培养1-3 h的胚胎进行移植以判定其体内发育潜力。OPS(Open-pulled straw)两步法冷冻保存,即胚胎首先移入预处理液(10％EG+10％DMSO)中平衡30 s,再移入玻璃化溶液中吸入OPS平衡15、25、35、45和60 s连同胚胎直接投入液氮中冷冻保存。结果小鼠胚胎8-细胞冷冻后囊胚发育率最佳组高达95．6％,与对照组(96．8％)差异无统计学意义(P> 0．05)。利用最佳冷冻组获得的165枚胚胎移植于11只假孕63-67 h的受体母鼠,结果有4只妊娠,产仔23只,妊娠产仔率为38．3％(23/60),与对照组37．9％(22/58)差异无统计学意义(P>0．05)。结论 EDFS33为玻璃化冷冻液,OPS两步法能有效地冷冻保存小鼠8-细胞胚胎。
- 周光斌侯云鹏杨中强杨其恩李秀伟朱士恩
- 关键词：OPS法玻璃化冷冻小鼠
- 小鼠体外受精胚胎OPS法玻璃化冷冻保存的研究
- 本实验对小鼠胚胎进行了OPS法玻璃化冷冻保存,旨在系统地研究两步OPS法冷冻对不同发育阶段小鼠体外受精胚胎体内外发育率的影响.所用溶液是10％EG+10％DMSO和EDFS30.胚胎两步OPS法冷冻是将体外受精而来的各发...
- 周光斌朱士恩杨其恩
- 关键词：玻璃化冷冻体外受精胚胎发育阶段
- 文献传递
- 不同温度条件下小鼠囊胚OPS法玻璃化冷冻保存技术的研究被引量：2
- 2006年
- 本实验采用OPS法在不同温度条件下对小鼠囊胚实施冷冻保存,研究用EDFS和EFS溶液冷冻保存囊胚的效率和提供不同温度下筛选玻璃化溶液的依据,为家畜和人类胚胎的冷冻保存建立模型。25℃室温和37℃恒温台条件下OPS一步法冷冻保存小鼠囊胚,EFS40和EDFS40冷冻组扩张囊胚率(92.31%,92.30%)与对照(97.26%)均无显著差异(P>0.05),但EDFS40孵化囊胚率(59.62%)显著低于对照组(83.56%)(P<0.05);二步法冷冻结果显示,采用EDFS30和EFS40均能高效保存小鼠囊胚,解冻后扩张囊胚率(95.69%和95.05%)和孵化率(80.48%和78.95%)与对照无显著差异(P>0.05)。当改为25℃室温不使用恒温台条件下,一步法冷冻的胚胎解冻后,仅EDFS40冷冻组扩张囊胚率和孵化囊胚率(85.96%和75.44%)与对照(96.05%和82.89%)无显著性差异(P>0.05);实施二步法冷冻的胚胎,解冻后EDFS30,EDFS40和EFS40组均获得理想效果,扩张囊胚率(92.03%-95.31%)及孵化囊胚率(67.19%-76.76%)与对照均无显著差异(96.05%和82.89%)(P>0.05)。据体外发育结果,选择最佳冷冻组胚胎移植给假孕4d的受体母鼠,其妊娠率和产仔率(90.90%和37.33%)与新鲜胚对照组(91.67%和42.33%)无显著差异(P>0.05)。结果证实,EDFS30、EDFS40和EFS40三种冷冻液在不同的温度条件和采用不同冷冻程序,均能成功保存小鼠囊胚。
- 杨其恩侯云鹏杨中强周光斌李秀伟朱士恩
- 关键词：囊胚OPS玻璃化冷冻
- 玻璃化冷冻对小鼠GV期卵母细胞发育能力的影响
- 2006年
- 试验首次采用OPS法玻璃化冷冻小鼠GV期卵母细胞(不带卵丘细胞,下同),同时尝试用EDFS30对小鼠卵巢进行细管法玻璃化冷冻,以研究GV期卵母细胞冷冻后的发育潜力。首先,利用MEM培养和MEM-腔前卵泡培养新鲜GV期卵母细胞,并把较好的培养方式用于冷冻后培养试验。2种培养方式培养24h后新鲜GV期卵母细胞成熟率无显著性差异;OPS法冷冻的GV期卵母细胞解冻后成熟率及体外受精后卵裂率与对照组差异不显著(P>0.05)。细管法冷冻卵巢组织的GV期卵母细胞成熟率极显著低于对照组(P<0.01),其受精后未获得受精卵。结果表明:OPS法可有效地冷冻保存小鼠GV期卵母细胞,而细管法冷冻小鼠卵巢对GV期卵母细胞损伤较大。
- 索伦杨其恩李秀伟侯云鹏朱士恩
- 关键词：畜牧学GV期卵母细胞卵巢玻璃化冷冻小鼠
- 小鼠胚胎OPS管内解冻和直接移植技术及冷冻胚胎MMPs基因表达的研究
- 本实验以小鼠为模式动物，研究了不同温度条件下囊胚的冷冻保存，OPS管内解冻和直接移植，体外受精各发育阶段胚胎的玻璃化冷冻以及解冻后胚胎MMP-2和MMP-9基因转录水平的表达情况，为家畜胚胎的玻璃化冷冻和直接移植提供技术...
- 杨其恩
- 关键词：玻璃化冷冻囊胚冷冻保存冷冻胚胎
- 文献传递
