杨玲玲
- 作品数：28 被引量：115H指数：7
- 供职机构：北京市红十字血液中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金山东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学经济管理更多>>
- 人参皂苷Rb1对SweAPP-SK细胞保护作用的研究被引量：2
- 2013年
- 目的观察人参皂苷Rb1对SweAPP-SK细胞的保护作用。方法用Rb1处理SweAPP-SK细胞,用MTT分析、酶联免疫分析和流式细胞术观察Rb1对SweAPP-SK细胞增殖、Aβ分泌量、细胞活性氧(ROS)水平和Ca2+水平的影响。结果较SK-N-SH细胞,SweAPP-SK细胞增殖明显延迟,细胞ROS及Ca2+水平增加。用Rb1处理SweAPP-SK细胞后,细胞增殖加快,细胞外Aβ40浓度明显降低,细胞ROS及Ca2+水平明显降低。结论 Rb1对SweAPP-SK细胞有保护作用,该保护作用的发挥可能与其能减少Aβ分泌及降低细胞内ROS和Ca2+水平有关。
- 杨玲玲孙高英郝建荣魏玉平郭元芳崔行毕文祥
- 关键词：Β-淀粉样肽人参皂苷RB1活性氧CA2+
- 转染过氧化氢酶-过氧化物酶基因对Aβ诱发PC_(12)细胞凋亡的保护作用被引量：2
- 2006年
- 目的观察转染过氧化氢酶-过氧化物酶(CPX)基因对神经毒物质β淀粉样肽(Aβ)诱发细胞凋亡的保护作用。方法转染并筛选稳定高表达CPX基因的PC12细胞系,用神经毒物质Aβ处理细胞,观察其抗逆变致凋亡的能力。通过电镜、DNA片段化的测定、MTT比色微量分析及流式细胞凋亡率分析观察转基因后对Aβ诱发细胞凋亡的保护作用。结果加入神经毒物质Aβ后,未转染CPX基因的PC12细胞出现凋亡的特征性形态学改变,电泳可见断裂的DNA片段,流式细胞仪检测细胞凋亡率较CPX基因转染组明显增加。MTT比色微量分析显示细胞活力下降(P<0.001)。结论Aβ诱导的神经细胞凋亡与活性氧的产生有关,转染CPX基因能对抗Aβ的神经毒性,保护Aβ所致的神经细胞凋亡。
- 付振涛崔行杨玲玲郝建荣曾季平胡晓燕孔峰
- 关键词：细胞转染细胞凋亡
- 开心散对Aβ_(25-35)诱导损伤SH-N-K神经细胞的保护作用及机制被引量：13
- 2007年
- 目的观察开心散对神经毒性物质β-淀粉样肽(Aβ25-35)诱导损伤的SK-N-SH细胞的保护作用。方法用Aβ25-35处理人神经母细胞瘤细胞(SK-N-SH细胞),模拟阿尔茨海默病(AD)病人脑内神经元病理损伤,并以含开心散(KXS)药物血清拮抗其作用。以MTT法测定细胞存活率,酶反应法检测细胞内超氧化物歧化酶SOD水平变化,流式细胞技术检测细胞凋亡率。逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测淀粉样肽蛋白前体(APP)基因、Aβ降解酶NEP基因的表达情况,Westernblots法检测APP蛋白表达。结果试验显示暴露Aβ25-35后培养SK-N-SH细胞存活率明显下降,凋亡细胞比例增加。而含开心散药物血清处理能显著提高Aβ25-35损伤细胞的存活率,减少细胞凋亡率,同时提高细胞内SOD的活力(P<0.01)。RT-PCR结果显示开心散可降低Aβ代谢相关的APP基因的表达并提高NEP基因的表达,APP蛋白表达显著减少。结论AD病理相关的Aβ25-35能造成神经元细胞损伤死亡,开心散对毒性Aβ25-35诱导的神经细胞损伤具有一定保护作用,其作用机制可能与开心散能增加抗氧化酶SOD活力,同时下调内源性APP基因表达,上调NEP基因表达,减少内源Aβ产生,从而抑制细胞死亡有关。
- 王丽娜夏文杨玲玲曾季平丁岩张亚伦崔行
- 关键词：开心散Β-淀粉样肽中性内肽酶
- 表达人NEP基因重组腺病毒载体的构建及其降Aβ作用的研究被引量：1
- 2009年
- 目的构建携带人全长NEP基因的重组腺病毒载体,包装扩增获得高滴度病毒,检测其对损伤细胞的降β-淀粉样肽(Aβ)作用。方法构建含NEP基因的腺病毒穿梭载体pAdTrack-nep,并与骨架载体pAdEasy-l在细菌内重组为pAd-NEP,经293细胞包装为增殖缺陷性腺病毒,感染人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞。采用RT-PCR和Westernblot法分析检测NEP的表达水平及感染内源性损伤的SK-N-SH细胞(sweAPP-SK),采用Elisa法初步检测NEP对Aβ的降解程度。结果成功构建重组腺病毒AD-NEP和对照病毒AD-GFP,且重组腺病毒能感染人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞并检测到目的基因的高表达。Elisa结果显示,NEP高表达有明显减轻Aβ在细胞外累积的作用。结论利用细菌内质粒同源重组法可快速简捷地制备表达外源基因的腺病毒,感染AD-NEP的神经细胞通过NEP高表达可以明显减轻Aβ累积。
- 张静段珊杨玲玲崔行
- 关键词：腺病毒淀粉样Β蛋白阿尔茨海默病
- 表达人NEP基因重组腺病毒载体的构建及其降Aβ作用
- 目的构建携带人全长NEP基因的重组腺病毒载体,包装扩增获得高滴度病毒,检测其对损伤细胞的降Aβ作用。方法构建含NEP基因的腺病毒穿梭载体pAdTrack-nep,并与骨架载体pAdEasy-1在细菌内重组为pAd-NEP...
- 张静段珊杨玲玲崔行
- 关键词：腺病毒淀粉样Β-蛋白阿尔茨海默病
- 文献传递
- 转染NEP基因对Aβ_(25-35)诱导神经元凋亡的保护作用被引量：1
- 2008年
- 目的研究转染NEP基因对神经毒物质Aβ25-35诱导神经元凋亡的保护作用。方法培养大鼠脑皮层神经元,用Aβ25-35作用神经元制备凋亡模型,NEP基因转染神经元。通过MTT法及流式细胞分析法观察NEP基因过表达对Aβ诱导神经元凋亡的保护作用。通过RT-PCR检测目的基因NEP,APP,以及凋亡相关基因Bcl-2和Bax mRNA的表达,Western-Blot测定APP和Aβ的蛋白表达。结果MTT和流式细胞分析法观察,发现在Aβ25-35作用下转染NEP组神经元活,性显著增高(P<0.05),凋亡率降低。RT-PCR及Western Blot结果显示,转染NEP组神经元APP基因的表达明显减少,Aβ的生成减少;同时促凋亡基因Bax表达降低,Bcl-2基因表达增高。结论转染NEP基因能保护Aβ所致的神经元凋亡。
- 张亚伦丁岩邵世滨杨玲玲任凯段珊曾季平崔行
- 关键词：神经元原代培养中性内肽酶
- 神经特异性启动子PDGF-EGFP载体的构建及组织表达特异性鉴定被引量：4
- 2009年
- 目的构建含有神经特异性启动子PDGF的绿色荧光蛋白真核表达载体,并进行组织特异性鉴定。方法提取人外周血基因组DNA,采用PCR技术扩增PDGF-B链上游启动子序列,将其定向克隆至增强型绿色荧光蛋白报告基因表达质粒pEGFP-1中,构建真核表达载体pPDGF-EGFP。将重组载体转染至人神经母细胞瘤细胞SK-N-SH,以及4种其他组织来源细胞系,观察绿色荧光蛋白表达以鉴定其神经特异性。结果成功构建表达载体pPDGF-EGFP,经转染显示pPDGF-EGFP在人神经母细胞瘤细胞SK-N-SH中高表达,而在其它4种非神经组织来源细胞株中极少量表达或未见表达。结论重组真核表达载体pPDGF-EGFP有较高的神经组织特异性,为进一步研究神经系统疾病的靶向基因治疗奠定了基础。
- 任凯丁岩崔云燕杨玲玲张静崔行
- 关键词：血小板源性生长因子细胞株
- p35基因对MnCl_2诱导PC12细胞凋亡的作用被引量：6
- 2004年
- 目的:探讨p35基因对氯化锰(MnCl2)诱导的PC12细胞凋亡的作用。方法:将p35基因转染PC12细胞得到可稳定表达p35基因的PC12/p35细胞株,使用相差显微镜观察、MTT染色和流式细胞分析等方法检测p35基因对MnCl2诱导的PC12细胞凋亡的作用。结果:p35基因在PC12细胞中的稳定表达可以有效地抑制MnCl2诱导的PC12细胞凋亡。结论:p35基因对MnCl2诱导的PC12细胞具有保护作用。
- 曾季平王立祥胡晓燕秦文孔峰杨玲玲崔行刘新垣
- 关键词：氯化锰PC12细胞细胞凋亡
- 褪黑素对氧自由基诱导的PC12细胞凋亡的保护作用被引量：2
- 2004年
- 目的:探讨氧自由基在阿尔茨海默病(AlzheimerDisease熏AD)发生中的作用及可能机制,评价褪黑素(Melatonin熏MT)的临床应用价值。方法:采用超氧自由基产生系统黄嘌呤/黄嘌呤氧化酶系统(X/XO)作用于PC12细胞,以褪黑素拮抗其作用,观察细胞的形态学变化;MTT法检测细胞存活率,DNA电泳和流式细胞术分析细胞凋亡情况,RT鄄PCR技术测定凋亡相关基因bcl鄄2、bax的表达。结果:X/XO作用后,PC12细胞出现凋亡特征性改变,凋亡率增加,电泳呈现DNAladders,凋亡相关基因bax上调;而10-5M褪黑素即能改善凋亡情况。结论:氧自由基可诱导神经元凋亡从而促进AD发生,其机制与促凋亡相关基因Bax表达增高有关;褪黑素可减缓神经元凋亡,可用于临床预防与治疗。
- 杨玲玲付振涛孔峰胡晓燕曾季平崔行
- 关键词：活性氧阿尔茨海默病细胞凋亡
- 转染PHGPx基因对Aβ及H_2O_2诱导PC_(12)细胞凋亡的保护作用被引量：1
- 2004年
- 目的 观察转染磷脂过氧化氢谷胱甘肽过氧化物酶 (PHGPx)基因对神经毒物质Aβ及H2 O2 诱导细胞凋亡的保护作用。方法 通过基因转染和筛选得到稳定高表达PHGPx基因的PC1 2 细胞 ,加入神经毒物质Aβ及H2 O2 ,采用电镜、DNA片段化测定、MTT比色微量分析及流式细胞凋亡率分析等方法观察转基因后抗逆变致凋亡的能力。结果 加入神经毒物质Aβ或H2 O2 后 ,未转染PHGPx基因的PC1 2 细胞出现凋亡的特征性形态学改变 ,电泳可见断裂的DNA片段 ,流式细胞仪检测细胞凋亡率较转染组明显增加。MTT比色微量分析显示细胞活力下降 (均P <0 0 1 )。结论 Aβ及H2 O2 能够诱导神经细胞凋亡。转染PHGPx基因能对抗Aβ、H2 O2 的神经毒性 ,保护Aβ、H2 O2 所致的神经细胞损伤凋亡 。
- 付振涛杨玲玲郝建荣曾季平孔峰钟华崔行
- 关键词：AΒX基因转染PC12细胞DNA片段
