杨红宇
- 作品数：65 被引量：391H指数：12
- 供职机构：暨南大学更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学轻工技术与工程农业科学更多>>
- 牛奶中过敏原组分的分离纯化及主要过敏原的鉴定被引量：22
- 2008年
- 目的:分离纯化并鉴定牛奶中引起过敏反应的主要致敏原组分,并分析其与组胺释放的关系。方法:等电点沉淀、Sephadex G-50凝胶层析和DEAE-Sepharose离子交换层析等技术分离纯化牛奶过敏原组分。脱脂乳浸液免疫C57/BL6小鼠制备抗血清。Western-Blotting分析脱脂乳致敏原组分。间接ELISA检测抗血清中sIgE和sIgG;同时荧光法检测各致敏组分体外诱发免疫小鼠腹腔肥大细胞组胺释放率。结果:分离纯化出酪蛋白、β-乳球蛋白、α-乳白蛋白等致敏组分(纯度>90%)。免疫印迹表明酪蛋白是主要致敏原组分。抗血清sIgG水平差异显著,sIgE水平没有大的变化;组胺释放率与sIgG水平是一致的,而与sIgE水平没有明显相关性。酪蛋白抗血清sIgG效价最高为1∶25 600,组胺释放率高达(73.28±9.31)%。结论:牛奶中主要过敏原组分鉴定为酪蛋白,对牛奶过敏症的体外诊断治疗以及低/无过敏原配方奶的研制有一定的意义。
- 蒋红玲向军俭王宏邓宁刘婉莹杨红宇凌钦婕
- 关键词：食品过敏原牛奶蛋白纯化组胺
- 伊马替尼耐药CML患者ABL基因激酶区突变检测被引量：4
- 2011年
- 目的研究伊马替尼(imatinib,IM)治疗慢性粒细胞白血病(chronic myeloid leukemia,CML)耐药患者ABL酪氨酸激酶区突变情况。方法用巢式PCR扩增对IM治疗耐药的56例CML患者骨髓样本ABL基因激酶区序列,通过测序和序列同源性检索分析ABL激酶区突变情况。结果 56例患者检出突变17例,其中14例为点突变,包括T315I、N358D、F359V、T389A、P441L、E450K、S410G、F486S;3例检测出插入突变c.1423-1424ins 35bp(p.C475YfsX11)。慢性期患者突变12例(28.6%),加速期、急性期突变者分别为4例和1例。。IM急变期、加速期患者突变率高于慢性期,但差异无显著性(χ2=0.253,P>0.05)。结论 ABL基因激酶区点突变是CML患者对IM耐药的重要原因,通过检测ABL基因激酶区突变有助于预测IM疗效并及时调整治疗方案。
- 宋其芳瞿燕春杨红宇王宏
- 关键词：伊马替尼慢性粒细胞白血病突变
- 噬菌体展示技术筛选bFGF抗原表位被引量：10
- 2003年
- 目的:以抗-bFGF单克隆抗体GF22为目标,用噬菌体随机七肽库进行筛选。经三轮筛选后的噬菌体阳性克隆能特异地抑制bFGF与CF22结合。测序结果表明与CF22结合的序列高度保守,为LP(P/L)GH(F/I)K,LPPGHFK与bFGF分子(155氨基酸)上22-27位氨基酸一致,表明该序列在bFGF上是一个主要的抗原表位。用此序列的阳性噬菌体克隆免疫小鼠,发现此序列摸拟肽能诱导抗bFGF抗体反应,且序列LPLGHIK诱导的抗体反应比LPPCHFK序列强三倍,序列LPLGHIK可能作为一种有价值的肽疫苗诱导抗bFGF抗体的产生。
- 向军俭钟振宇杨红宇黄峙黄竞荷
- 关键词：碱性成纤维细胞生长因子单克隆抗体噬菌体展示技术抗原表位
- 食品过敏原体外激发小鼠致敏肥大细胞组胺释放被引量：14
- 2005年
- 目的检测食品过敏原体外激发小鼠致敏肥大细胞的组胺释放率,探讨食品过敏原鉴定与评价方法。方法以河虾蛋白和鸡卵清蛋白,氢氧化铝佐剂免疫Balb/c小鼠,建立IgE高反应性食物过敏动物模型。间接ELISA测定激发后第7,14,21天血清中过敏原sIgE水平;并在激发后第14天分离小鼠腹腔肥大细胞,过敏原体外激发,荧光光度法检测组胺释放量,计算释放率,Student’s统计分析显著性意义。结果①模型组小鼠血清sIgE水平比对照组明显升高,且在过敏原激发后第14天sIgE效价最高,河虾和鸡卵清蛋白组分别达到1/6400和1/3200。②鸡卵清蛋白组定向组胺释放率达60.75%;河虾组腹腔或皮下免疫分别达到71.53%和88.48%,所有模型组与对照组比较均呈显著差异(P<0.05)。结论利用小鼠过敏模型,检测食品过敏原体外激发组胺释放率可能成为食品过敏原鉴定与评价的方法。
- 向军俭张在军毛露甜邓宁杨红宇
- 关键词：食品体外组胺释放IGE水平腹腔肥大细胞蛋白组分
- 人bFGF单克隆抗体的制备及MabF7对黑色素瘤B16的体外抗瘤效应被引量：12
- 2008年
- 目的:制备抗人碱性成纤维细胞生长因子(basicfibroblastgrowthfactor,bFGF)单克隆抗体,并探讨其体外对黑色素瘤细胞B16的抗肿瘤效应。方法:以rhbFGF免疫Balb/C小鼠,用杂交瘤技术制备单克隆抗体;间接ELISA法筛选阳性杂交瘤细胞株,测定腹水型单抗的效价及其Ig亚类;用RT-PCR、细胞免疫组化和双抗体夹心等方法检测黑色素瘤B16细胞中bFGF的表达;用MTT法检测单抗MabF7对B16细胞的体外抑瘤效应;用流式细胞术及DNA琼脂糖电泳技术检测细胞凋亡。结果:共获得19株稳定分泌抗bFGF单抗的杂交瘤细胞株;ELISA效价>105;除MabF8、MabF9为IgG2a外,其余为IgG1;黑色素瘤细胞B16中有bFGFmRNA及其蛋白的表达,且可在细胞培养液中检测到bFGF;经蛋白A纯化的MabF7对B16细胞的抑制作用呈剂量及时间累计效应,抑制率为(39±4.12)%,P<0.01。流式细胞术结果显示,随抗体浓度增加及作用时间延长,肿瘤细胞在G1期前出现明显的亚二倍体期;DNA电泳结果显示,抗体作用后的细胞DNA呈明显的梯度条带。结论:MabF7具有体外抑制黑色素瘤B16细胞增殖作用,其机制与诱导细胞凋亡有关。
- 向军俭靳英杰黄红亮王宏杨红宇唐勇
- 关键词：成纤维细胞生长因子碱性抗体单克隆黑色素瘤
- Dot-ELISA法同时检测多种食品过敏原的实验研究被引量：21
- 2005年
- 通过花生、虾、蛋清过敏原浸液皮下免疫复制小鼠过敏模型,获特异性IgE的小鼠血清进行方法学研究。将不同的过敏原以适当浓度点状吸附于硝酸纤维素膜(NC膜)上,与待检血清作用,再依次与生物素化羊抗鼠IgE第二抗体,亲和素偶联的辣根过氧化物酶反应,DAB显色。结果表明:获得了小鼠抗花生、虾、蛋清过敏原高效价特异性IgE血清。Dot-ELISA法各种过敏原最适包被量为2μL(10μg蛋白),待检抗血清最佳稀释度为1∶80,通过肉眼观察NC膜上斑点的显色即可确定待检血清中相应过敏原特异性IgE,且3种过敏原之间无交叉反应性。不同时间同批试剂重复检测结果完全一致,包被过敏原的NC膜4℃可稳定保存3个月。实验初步建立了用含有过敏原特异性IgE的小鼠血清同时检测多种过敏原的Dot-ELISA实验方案,该法简便、特异、稳定、重复性好,可成为食品过敏原鉴定与评价的新方法。
- 张在军毛露甜向军俭邓宁黄峙杨红宇
- 关键词：DOT-ELISA食品过敏原特异性IGE
- 五种赤潮藻单克隆抗体的制备被引量：7
- 2003年
- 目的:建立分泌抗海洋褐胞藻(Chattonellamarina)、卵圆褐胞藻(Chattonellaovata)、赤潮异弯藻(Heterosigmaakashiwo)、具齿原甲藻(Prorocentrumdentatum)、尖刺拟菱形藻(Pseudonitzschiapungens)等5种藻的高特异性单克隆抗体杂交瘤细胞株.方法:利用细胞融合技术制备杂交瘤细胞,并通过反相间接血凝、间接酶联免疫吸附测定(ELISA)等方法筛选克隆阳性杂交瘤细胞株.结果:获得15CA7、23BG2和23BG9等3株杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体与5种藻具有一定的特异性,但抗体的亲和力较低,仅与海洋褐胞藻具有较高的亲和力;而获得的M18杂交瘤细胞株分泌的单克隆抗体可与以上除尖刺拟菱形藻外4种藻产生高效价的明显交叉反应.结论:获得了3株分泌对5种藻具有一定的特异性较低亲和力抗体;而M18细胞株分泌的单抗与除尖刺拟菱形藻外4种藻产生明显的高效价的交叉反应,显示此单抗可代替5种海洋藻的抗血清.
- 向军俭朱小兵吕颂辉杨红宇凌钦婕沈晓涛
- 关键词：赤潮异弯藻具齿原甲藻尖刺拟菱形藻单克隆抗体酶联免疫吸附测定
- 甲酸钠对辐射损伤的抑制作用被引量：4
- 1999年
- 目的：研究甲酸钠对辐射损伤的抑制作用。方法：采用溶血试验，受照小鼠肝、肾组织谷胱甘肽测定，受照质粒 Ｐ Ｕ Ｃ１９ Ｄ Ｎ Ａ 链断裂测定作为检测指标。结果：甲酸钠能明显抑制紫外线致红细胞溶血作用（ Ｐ＜ ００１） ；明显提高经６０ Ｃｏ γ射线照射的小鼠肝、肾组织谷胱甘肽水平（ Ｐ＜ ００５ 或 Ｐ＜ ００１） ；明显抑制经６０ Ｃｏ γ射线照射的质粒 Ｐ Ｕ Ｃ１９ 超螺旋构象百分率的下降（ Ｐ＜ ００５ 和 Ｐ＜００１） 。结论：甲酸钠能清除辐射引起的自由基损伤，具有防辐射作用。
- 蒋建伟严玉霞杨红宇
- 关键词：甲酸钠谷胱甘肽自由基损伤
- 穿梭质粒pGFP-1与CMV启动子重组体的构建被引量：4
- 2000年
- 构建并筛选出能在哺乳细胞表达的重组质粒。方法：以含ＧＦＰｃＤＮＡ报告者基因的穿梭质粒ｐＧＦＴ，－１为载体，选用人巨细胞病毒启动子，采用基因重组技术构建重组质粒。结果：重组质粒及其酶切液的琼脂糖凝胶电泳图谱表明重组质粒的构建成功。结论：该研究技术路线设计合理，以构建的重组质粒为分子工具，可望建立以ＧＦＰ基因为基础的有效的基因标记系统。
- 杨红宇曾耀英曹艳英狄静芳
- 关键词：细胞移植
- 抗rh-bFGF嵌合抗体真核表达载体的构建与表达被引量：7
- 2004年
- 目的 :构建并在真核细胞中表达抗人重组碱性成纤维生长因子 (rh bFGF)人 鼠嵌合抗体。方法 :从分泌抗rh bFGF鼠单抗(mAb) 1F11的杂交瘤细胞中扩增、克隆VL、VH 基因 ,从质粒pMDHC和pMDLC中扩增、克隆CL、CH 基因 ,测序鉴定后插入真核表达载体 ,并转化二氢叶酸还原酶缺陷型中国仓鼠卵巢(CHO dhfr- )细胞进行表达。采用间接ELISA检测表达产物的人源性和其抗原结合活性。结果 :序列测定表明所克隆的抗体基因是功能性抗体的V区基因 ,在转化细胞的培养上清中可检测到抗rh bFGF嵌合抗体的表达。ELISA试验证实 ,该嵌合抗体具有人源C区 ,并具有鼠mAb 1F11的抗原结合活性。结论 :在真核细胞中成功地表达抗rh bFGF的人 鼠嵌合抗体 。
- 向军俭李洪庆邓宁杨红宇童贻刚李建民
- 关键词：碱性成纤维生长因子嵌合抗体基因表达CHO细胞
