杨远
- 作品数：31 被引量：14H指数：3
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- 熊果酸对尼洛替尼耐药细胞株K562/R细胞的增敏作用及其机制研究
- 李燕王季石马丹杨远胡秀英王娅婷
- 利用国际细胞治疗协会最低标准鉴定人骨髓间充质干细胞
- 目的:采用密度梯度离心法分离人骨髓间充质干细胞,培养传代后以国际细胞治疗协会(ISCT)提出的最低标准进行鉴定。方法:用密度为1.073g/ml的percoll分离(400g×20min)人骨髓MSCs,取界面处细胞层,...
- 杨远张巍王季石
- 文献传递
- CYP286、CTP2C9、CYP3^4真核表达载体的构建及体外联合环磷酰胺抗肿瘤效应的比较研究
- 目的:CYP3A4是CYP450基因家族中一个重要的酶,涉及了许多药物的代谢过程,环磷酰胺(CPA)便是其中一个重要的代谢底物。体外无活性的CPA可经CYP3A4活化生成磷酰胺氮芥,从而与DNA烷化,进而抑制肿瘤细胞的生...
- 张巍杨远王季石
- 文献传递
- 苯乙基异硫氰酸酯逆转K562/A02细胞多药耐药机制研究
- 目的：探讨苯乙基异硫氰酸酯(PEITC)对人白血病耐药细胞株K562/A02的耐药逆转，并探讨逆转机制。方法：采用MTT法检测不同浓度PEITC和阿霉素(ADM)单独或联合使用24 h对K562/A02和K562细胞增殖...
- 王娅婷王李石杨远胡秀英马丹李燕
- 关键词：多药耐药机制
- 文献传递
- 间充质干细胞介导“酶一前药基因”CYPIA2靶向抗肿瘤效应研究被引量：1
- 2009年
- 目的将人细胞色素P4501A2（CYP1A2）基因转染骨髓间充质干细胞（BMSC），检测转基因BMSC协同化疗前药达卡巴嗪（DTIC）对人恶性淋巴瘤细胞株Raji细胞的靶向促凋亡作用，为以间充质干细胞为载体的“基因介导的酶-前药双靶向抗肿瘤策略”提供体外实验依据。方法从人肝细胞中克隆CYP1A2基因，构建真核表达载体，分离、鉴定并培养BMSC，脂质体法将CYP1A2基因导入BMSC和Raji细胞中，RT—PCR和Western blot法检测CYP1A2基因的表达，Trans well法检测BMSC的肿瘤靶向性，MTF法检测转基因Raji细胞对DTIC敏感性的改变，Annexin V／PI染色标记法检测转基因BMSC联合DTIC诱导Raji细胞凋亡的作用。结果成功克隆CYP1A2基因并将构建的真核表达载体转染BMSC和Raji细胞，流式细胞术检测体外诱导分化结果符合BMSC特性，RT-PCR和Westernblot检测到转基因细胞中CYP1A2表达，Transwell迁移实验证实BMSC有肿瘤趋向性，MTT法检测显示DTIC呈剂量依赖性抑制转CYPIA2基因的Raji细胞生长，而转CYP1A2基因的BMSC细胞对DTIC相对耐受（IC50值分别为1．67mmol／L和7．53mmol／L，P〈0．01）。AnnexinV／PI染色法显示CYP1A2能够使细胞在体外代谢DTIC，产生细胞毒效应使肿瘤细胞凋亡，而且具有旁观者效应。结论CYP1A2可使细胞在体外代谢DTIC产生细胞毒效应。以BMSC为载体的CYP1A2-DTIC酶-前药系统可发挥双靶向抗肿瘤作用，在体外诱导人恶性淋巴瘤细胞凋亡。
- 杨远王季石张巍袁军杨明方琴
- 关键词：基因CYP1A2达卡巴嗪
- 逆转录病毒介导的HO-1基因在尼洛替尼诱导K562／A02耐药细胞凋亡中的作用被引量：4
- 2012年
- 目的研究逆转录病毒介导的血红素加氧酶-1（HO-1）基因在尼洛替尼（Nilotinib，AMN107）诱导慢性髓性白血病（CML）耐药细胞凋亡中的作用。方法制备高病毒滴度的逆转录病毒载体pQCXIP-EGFP-HO-1，建立稳定转染HO-1基因的K562／A02细胞。采用RT-PCR鉴定K562／A02细胞中HO-1基因的表达。liT-PCR和Westernblot法检测AMN107作用24h后K562／A02细胞中HO-1mRNA和蛋白的表达，采用MTT法观察细胞增殖变化，通过实时荧光定量PCR（RQ-PCR）法检测bcr-abl融合基因的表达，通过流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期分布。结果成功构建重组逆转录病毒载体，并建立稳定转染HO-1基因的K562／A02细胞系；证实转基因组细胞HO-1mRNA显著表达。AMN107作用3组细胞后，转基因组细胞HO-1mRNA和蛋白的表达明显高于转空载体组和未转染组，差异有统计学意义（P〈0．05）；MTY法检测显示AMN107处理后细胞增殖受抑，而转基因组细胞存活率明显高于转空载体组和未转染组，差异有统计学意义（P〈0．05）；RQ-PCR法检测结果显示，10μmol／LAMN107抑制bcr-abl基因的表达，但转基因组的bcr-abl基因表达水平（Ct值18．15±0．18）高于转空载体组（20．32±0．20）和未转染组（20．51±0．21），差异有统计学意义（P〈0．05）；流式细胞术检测结果显示10ixmol／LAMN107作用24h后，转基因组、转空载体组、未转染组细胞凋亡率分别为（17．26±0．23）％、（39．47±0．17）％、（41．84±0．09）％，未加药转基因组、未加药未转染组细胞凋亡率分别为（3．74±0．03）％、（5．91±0．08）％；细胞周期分析结果显示经AMN107处理后，G0／G1期和S期细胞明显减少，细胞阻滞在G2／M期，而转基因细胞组细胞周期改变不如转空载体组、未转染组明显。结论AMN107可抑制CML耐药细胞增殖且诱导细胞凋亡，HO-1基因在CML耐药细胞凋亡过程中起保护作�
- 陈珵王季石秦东杨远于艳艳方琴
- 关键词：逆转录病毒载体尼洛替尼K562/A02细胞
- 苯乙基异硫氰酸酯对多药耐药细胞株K562/A02耐药逆转作用及其机制研究
- 王娅婷王季石韦四喜杨远柴其翔李燕
- 体外诱导K562细胞尼洛替尼耐药及其机制的初步探讨
- 目的：体外建立对尼洛替尼(nilotinib,AMN107)耐药的白血病细胞株K562-rn,并初步探讨其耐药机制。方法：以药物浓度递增的方法诱导人白血病细胞株K562对AMN107产生耐药性,MTT法确定其耐药倍数。流...
- 王季石杨畅万琴陈珵杨远胡秀英
- 关键词：尼洛替尼耐药机制流式细胞术
- 文献传递
- 恶性血液病患者骨髓单个核细胞AKT1表达的研究
- 目的了解恶性血液病患者骨髓单个核细胞 (BMMNC)AKT1 的表达情况,探讨 AKT1与血液肿瘤发生的关系。方法应用半定量 RT-PCR 检测6 例正常人,8例再生障碍性贫血(AA),5例骨髓纤维
- 卢英豪王季石梅丽娜杨远鲍丽艳
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- 细胞色素P450 2C9体外催化环磷酰胺抗肿瘤作用研究
- 目的:细胞色素P450 2C9(CYP2C9)是抗肿瘤药物环磷酰的代谢酶,体内代谢环磷酰胺生成有细胞毒的物质。CYP2C9基因可作为"基因介导的酶前药治疗策略"(GDEPT)的候选基因用于抗肿瘤研究。本研究检测该基因在细...
- 杨远张巍王季石
- 文献传递
