林方
- 作品数：15 被引量：22H指数：3
- 供职机构：军事医学科学院微生物流行病研究所更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学自动化与计算机技术更多>>
- 实时荧光定量RT-PCR检测东部马脑炎病毒和西部马脑炎病毒的试剂盒
- 本发明公开了实时荧光定量RT-PCR检测东部马脑炎病毒和西部马脑炎病毒的试剂盒。本发明所提供的检测马脑炎病毒的试剂盒，包括如下(1)和(2)所示的引物对：(1)EEEV上游引物：TGTGCGTACCTCCTCATCGTT...
- 康晓平杨银辉李裕昌刘洪林方蔡绪禹户义李靖常国辉祝庆余
- 单克隆抗体-2A10在蛋白芯片技术检测黄病毒属病毒中的应用
- 目的：本研究拟探讨一株黄病毒属特异的单克隆抗体2A10作为检测抗体在同时检测五种黄病毒属病毒的蛋白芯片中的应用价值.方法：将病毒的特异性单抗作为捕获抗体进行点样,制备用于检测五种黄病毒属病毒的抗体芯片,然后分别加入拟检测...
- 康晓平李裕昌刘洪林方祝庆余杨银辉
- 关键词：蛋白芯片高通量黄病毒属单克隆抗体
- 实时荧光定量RT-PCR检测东部马脑炎病毒和西部马脑炎病毒的试剂盒
- 本发明公开了实时荧光定量RT-PCR检测东部马脑炎病毒和西部马脑炎病毒的试剂盒。本发明所提供的检测马脑炎病毒的试剂盒，包括如下(1)和(2)所示的引物对：(1)EEEV上游引物：TGTGCGTACCTCCTCATCGTT...
- 康晓平杨银辉李裕昌刘洪林方蔡绪禹户义李靖常国辉祝庆余
- 文献传递
- 医学RNA病毒属水平基因芯片筛查技术的研究
- 本研究目的是建立能够在属水平对医学RNA病毒进行快速筛查的基因芯片技术，在出现新(突)发传染病疫情或公共卫生事件时，能利用该芯片，快速将病毒性病原体筛查到属水平，为进一步进行病原体的分离培养、鉴定及传染病疫情的防控提供有...
- 杨银辉康晓平李永强刘洪孙庆歌林方祝庆余
- 关键词：RNA病毒免疫学检验基因芯片
- 文献传递
- 人类流感病毒多重PCR分型方法的建立被引量：3
- 2010年
- 目的建立一种可以同时检测人类A型流感病毒,B型流感病毒及A型流感病毒H1,H3,H5亚型的多重RT-PCR方法。方法根据人类流感病毒的特异性基因设计并合成多对特异性引物,建立可同时扩增出人类流感病毒亚型特异性片段的多重PCR的方法。同时,对该方法的特异性和敏感性进行了评价,并利用该方法对39份疑似swineH1N1的临床标本进行检测。结果该方法可同时扩增出A型流感病毒M基因203bp,B型流感病毒M基因296bp,A型流感病毒亚型的HA基因片段长度分别为362bp(H1),112bp(H3),188bp(H5),494bp(swineH1)。该实验最低可检测新甲型H1N1(A/Beijing/501/2009)病毒RNA0.5TCID50。该方法的特异性实验结果显示,在多重PCR检测中未检出非特异扩增的PCR产物。同时,使用该方法从39份疑似新甲型H1N1的临床咽拭子标本中检测出新甲型H1N1阳性的标本4份(10.2%),季节性H1N1亚型2份(5.1%),H3N2亚型12份30.7%,本次实验结果与WHO通过实时PCR方法检测的结果一致。结论本研究建立的多重PT-PCR方法快速、敏感,特异性强,可用于人类流感病毒的分型检测。
- 林方熊伟康晓平李永强刘洪李辉祝庆余杨银辉
- 关键词：人类流感病毒病毒分型多重PCR
- 6种虫媒病毒蛋白芯片检测方法的建立被引量：1
- 2011年
- 目的 建立针对6种虫媒病毒的蛋白芯片检测方法,用以检测流行性乙型脑炎病毒、蜱传脑炎病毒、登革病毒（1～4型）、西尼罗病毒、西部马脑炎病毒和东部马脑炎病毒的特异性抗体.方法 将病毒特异性抗原作为捕获抗原点样制备蛋白芯片,利用双抗夹心ELISA原理检测血清中的病毒特异性抗体.首先利用免疫兔血清进行特异性诊断抗原的筛选,并对抗体芯片检测条件进行优化,然后采用56份临床疑似的阳性血清标本及阴性对照标本对该方法进行验证,并与常规ELISA方法进行比对.结果 共筛选出11个特异性较好的重组诊断抗原.抗原点样浓度在0.125 ～0.900mg/ml时可获得良好的检测效果,血清检测范围为1：100～1：1000.对26份临床疑似的蜱传脑炎病毒血清标本,22份登革病毒血清标本及8份流行性乙型脑炎病毒临床血清标本的检测结果为：共检测出蜱传脑炎病毒IgG阳性血清标本20份,阳性检出率为76.9％,IgM阳性血清标本17份,阳性检出率65.3％,与ELISA检测符合率分别为96.1％和84.6％.乙型脑炎病毒IgG阳性血清4份,阳性检出率50.0％,IgM阳性血清5份,阳性检测率62.0％,与ELISA检测符合率分别为87.5％和100％.登革病毒IgG阳性血清标本13份,阳性检出率63.6％,IgM阳性血清标本14份,阳性检测率68.1％,与ELISA检测符合率分别为86.3％和90.1％,结果经一致性Kappa检验后,与ELISA检测结果一致性良好.阴性对照血清结果显示检测特异性为100％.结论 本研究建立的虫媒病毒抗体芯片检测方法具有较高的特异性和可靠性,可用于6种虫媒病毒抗体的临床检测.
- 林方康晓平李裕昌朱晓磊范丽魏婧靖杨银辉祝庆余
- 关键词：虫媒病毒抗体芯片
- 检测脑炎类病毒的ELISA-Array方法及其专用试剂盒
- 本发明公开了一种检测脑炎类病毒的ELISA-Array方法及其专用试剂盒。本发明提供的试剂盒，包括6种捕获抗体，每种所述捕获抗体为将抗体与点样液混合得到的混合液，每种所述捕获抗体中所述抗体在对应的所述捕获抗体溶液中的浓度...
- 康晓平李裕昌杨银辉林方范丽魏婧靖户义李靖常国辉祝庆余
- 文献传递
- 单克隆抗体2A10在蛋白芯片技术检测黄病毒属病毒中的应用被引量：1
- 2010年
- 目的 本研究拟探讨1株黄病毒属特异的单克隆抗体2A10作为检测抗体在同时检测5种黄病毒属病毒的蛋白芯片中的应用价值.方法 将病毒的特异性单抗作为捕获抗体进行点样,制备用于检测5种黄病毒属病毒的抗体芯片,然后分别加入拟检测的病毒灭活抗原,捕获病毒颗粒后,加入荧光染料CY3标记的2A10检测抗体进行孵育,通过扫描并分析芯片上不同抗体的荧光强度,确定2A10检测抗体的效价和可检测的病毒滴度,并对2A10的检测效果进行评价.结果 蛋白芯片检测结果表明,2A10可作为检测抗体用于对5种黄病毒属病毒的检测,CY3标记的2A10效价为1∶160,以脾传脑炎（TBE）病毒为例,可检测的病毒滴度为1250 PFU.结论 单克隆抗体2A10作为一株黄病毒属特异的单抗,可以用于蛋白芯片技术检测黄病毒属病毒.
- 孙婷婷李裕昌刘洪康晓平林方祝庆余杨银辉鲁承
- 关键词：蛋白芯片高通量黄病毒属单克隆抗体
- 一种用于鉴别甲型流感病毒亚型的试剂盒
- 本发明公开了一种用于鉴别甲型流感病毒亚型的试剂盒。试剂盒包括如下引物对：一条引物序列如序列表中序列5所示，另一条引物序列如序列表中序列6所示；所述甲型流感病毒亚型为新甲型H1N1亚型、甲型H1N1亚型、甲型H5N1亚型或...
- 杨银辉林方熊伟康晓平李永强刘洪李裕昌常国辉祝庆余蔡绪禹孙婷婷
- 文献传递
- 检测脑炎类病毒的ELISA-Array方法及其专用试剂盒
- 本发明公开了一种检测脑炎类病毒的ELISA-Array方法及其专用试剂盒。本发明提供的试剂盒，包括6种捕获抗体，每种所述捕获抗体为将抗体与点样液混合得到的混合液，每种所述捕获抗体中所述抗体在对应的所述捕获抗体溶液中的浓度...
- 康晓平李裕昌杨银辉林方范丽魏婧靖户义李靖常国辉祝庆余
