洪爱真
- 作品数：7 被引量：20H指数：3
- 供职机构：上海市计划生育科学研究所更多>>
- 发文基金：上海市自然科学基金国家自然科学基金浙江省医药卫生科学研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人卵透明带蛋白huZP3a^(22～176)和huZP3b^(177～348)肽段在大肠杆菌中的表达及其纯化被引量：9
- 2004年
- 目的:探索将huZP3a22~348蛋白编码基因拆分成两段,分别表达的可行性,并研究表达产物的免疫原性。方法:用PCR技术, 将去N-端信号肽和C-端跨膜区的huZP322~348蛋白编码基因拆成大小相近的两段, 以完整阅读框的形式分别重组插入热诱导型pBV221的多克隆区。结果:大肠杆菌分别特异地表达了可单独或复合应用的huZP3a22~176和huZP3b177~348,在经过抗人ZP3不同抗原区合成肽抗体的蛋白印迹鉴定后, 用改良的制备性PAGE方法分离纯化这两种表达产物。同时用兔抗猪ZP IgGs蛋白印迹试验表明, huZP3a和pZP3b的几个共同线性抗原表位都存在于其肽链的前半区域。结论:通过基因重组技术可获得足够量的huZP3a和huZP3b,这为开展huZP3a和huZP3b的免疫原性以及huZP3诱发人精子顶体胞吐的功能域等研究奠定了基础。
- 徐万祥何亚萍洪爱真季朝能钱吉王曙谢毅Elvira HinschKlaus-Dieter Hinsch
- 关键词：基因表达免疫印迹纯化
- 人卵透明带蛋白ZP3a和ZP3b肽段的免疫原性及其抗血清体外抑制人精子-半透明带结合的研究
- ＜正＞哺乳动物卵透明带（zona pellucida,ZP）蛋白一般由ZP1、ZP2和ZP3三种糖蛋白组成,其中电泳分子量最小的ZP3蛋白已被鉴定为包括人类在内大多数物种精子与卵子结合的第一受体,它同时具有诱导精子顶体反...
- 宋力雯汪玉宝倪崖何亚萍洪爱真Elvira HinschKlaus-D Hinsch周思畅袁玉英石其贤徐万祥
- 文献传递
- 多表位hCG嵌合肽(CP1和CP10)抗原的构建及其免疫原性被引量：2
- 2006年
- 本研究设计了CP1和CP10两种嵌合肽免疫原,它们由人绒毛膜促性腺激素β亚单位(β- hCG)3个线性B细胞表位(BCE)以及包括来自乙肝表面抗原和破伤风类毒素2个广谱性T细胞表位(TCE)的6个TCEs组合而成。编码CP1及其衍生物CP10的人工基因分别重组插入热诱导pBV221载体后,均能在大肠杆菌中以约占细菌总蛋白1％的比例被表达。在蛋白印迹试验中,在SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳凝胶上显示约为16．5 kD分子量的CP1和CP10表达蛋白,能被抗各插入表位单克隆或多克隆抗体识别。各表达蛋白可用制备性PAGE方法一步纯化,纯化产物均显示95％以上的电泳均一性,纯化得率可达到每升培养液1-2mg水平。以它们为抗原主动免疫小鼠,都能分别产生识别CP1或CP10和天然β-hCG的抗血清,并都能在它们的抗血清中检测到各插入抗原表位的抗体。hCG CPs的可获得性及其能诱导各表位抗体生成特征,有可能成为研制hCG抗生育和肿瘤治疗性疫苗的新的候选免疫原。
- 徐万祥何亚萍邱德义廖矛川洪爱真季朝能顾少华陈金中谢毅
- 关键词：原核表达免疫应答
- 两种hCG嵌合肽CP12和CP22的免疫原性研究
- ＜正＞作为早先以靶抗原1或2个B细胞表位（B cell epitope,BCE）为主的化学合成肽,以及后期演化成掺入自身/外源T辅助细胞表位（ThCE）的化学合成嵌合肽（CP）疫苗研究的延伸,近年来以提高合成肽疫苗的有效...
- 徐万祥何亚萍洪爱真廖矛川孙志达季朝能顾少华应康谢毅
- 文献传递
- NDRG3对前列腺癌细胞致癌潜能的影响被引量：2
- 2008年
- 目的:研究过表达外源性和RNA干扰内源性NDRG3对前列腺癌细胞克隆形成的影响。方法:将NDRG3表达质粒稳定转染人类PC3前列腺癌细胞株,用1个NDRG3稳定表达亚克隆与做为对照的亲代和空质粒转染的PC3细胞进行克隆形成实验;同时利用RNA干扰技术沉默CL-1细胞的内源性NDRG3,并用Western blotting技术进行鉴定,在对照组、GFP-siRNA组和NDRG3-siRNA组进行克隆形成实验。结果:过表达外源性NDRG3的PC3细胞形成的克隆数明显多于亲代和空质粒转染的PC3细胞株;在RNA干扰实验中,CL-1对照组和GFP-siRNA组形成的总克隆数和大克隆数均明显多于NDRG3-siRNA组(P<0.05)。结论:NDRG3可以提高前列腺癌细胞的致癌潜能和克隆形成能力。
- 王伟群李扬李玉华洪爱真李润生
- 关键词：N-MYC下游调节基因前列腺肿瘤
- NDRG3表达对前列腺癌细胞生长及抗药性的促进作用被引量：4
- 2008年
- 目的:探讨NDRG3在人体前列腺细胞中的表达及外生性NDRG3对前列腺癌细胞的致癌潜能。方法:将NDRG3表达质粒稳定转染人类PC3前列腺癌细胞株,用一个NDRG3稳定表达亚克隆与做为对照的亲代和空质粒转染的PC3细胞,通过RT-PCR技术检测NDRG3基因在不同PC3人体前列腺细胞株中的表达情况。结果:NDRG3蛋白在2种前列腺癌细胞(PC3和DU145)和一种永生化前列腺间质细胞(WPMY-1)中都有表达,外源性的NDRG3能够显著地促进PC3细胞的增长率;NDRG3表达抑制美伐他汀引起的细胞凋亡。结论:NDRG3具有肿瘤促进功能并在前列腺癌的发生、发展中起一定作用。
- 王伟群李玉华洪爱真林标扬李扬李润生
- 关键词：前列腺癌
- 人卵透明带蛋白ZP3a和ZP3b肽段的免疫原性及其抗血清体外抑制人精子-半透明带结合被引量：7
- 2005年
- 分析大肠杆菌表达的重组人卵透明带-3(r-huZP3)蛋白两个肽段(r-huZP3a22-176及r-huZP3b177-348)的免疫原性,比较两者抗血清体外抑制人精子-半透明带结合的能力。以制备性聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)纯化的大肠杆菌表达蛋白为抗原, 主动免疫新西兰兔产生抗huZP3a22-176及huZP3b177-348抗血清;通过ELISA测定比较两者的抗体应答水平:以蛋白印迹和免疫组化方法测定两者抗血清同重组表达蛋白、天然人卵ZP以及卵巢组织的反应性;通过竞争性半透明带结合试验 (hemizona assay,HZA)观察两者抗血清体外抑制人精子-ZP结合能力。结果显示:未与大分子蛋白载体耦联的r-huZP3a22-176 和r-huZP3b177-348抗原都在免疫兔中产生了较高的抗体滴度,而且它们的抗血清可识别大肠杆菌表达的各自重组ZP3肽以及人卵细胞表面天然ZP,两者抗血清也都能在体外抑制人精子-ZP结合。由此可见,r-huZP3a22-176及r-huZP3b177-348蛋白具有良好免疫原性,所产生抗血清也都显示出细胞和组织特异性。因此,单一或合并两个huZP3肽段均可作为抗原研制检测不明原因性不孕妇女中是否存在抗自身ZP抗体的诊断试剂盒,另外它们的抗血清也能用于鉴定已知huZP3表位肽段的最小B-细胞表位基序。
- 宋力雯汪玉宝倪崖何亚萍洪爱真Elvira HinschKlaus-Dieter Hinsch周思畅袁玉英石其贤徐万祥
- 关键词：抗血清
