王世达
- 作品数：7 被引量：9H指数：2
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所更多>>
- 发文基金：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所所长基金哈尔滨市科技攻关计划项目中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 伪狂犬病毒对小鼠肝脏线粒体氧化应激和细胞凋亡影响的研究被引量：1
- 2022年
- 为了研究伪狂犬病毒(PRV)感染对小鼠肝脏线粒体氧化应激相关因子的影响,本实验将36只6周龄BALB/c小鼠随机分成4组,感染组经皮下接种200μL浓度为1×103TCID50/100μL PRV,对照组注射等量的PBS,分别于感染后48 h、72 h、96 h迫杀小鼠,采集新鲜的肝脏组织提取线粒体,通过ROS检测试剂盒检测各组小鼠线粒体活性氧(ROS),结果显示,与对照组相比,感染组小鼠肝脏线粒体ROS水平极显著增加(P<0.01)。采用分光光度法检测线粒体中的丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶体系(GSH-Px)和过氧化氢酶系统(CAT)变化,结果显示,与对照组相比,各感染组小鼠肝脏中线粒体MDA水平均显著增加(P<0.01),GSH水平显著降低(P<0.01)。采用线粒体膜电位MitoScreen检测试剂盒检测各组小鼠线粒体膜电位,结果显示感染组小鼠线粒体膜电位相较对照组出现了显著的去极化(P<0.01)。利用荧光定量PCR检测各组小鼠肝脏中氧化应激相关酶的基因转录水平,结果显示,感染组小鼠的SOD、GSH-Px和CAT 3种酶的基因转录水平相较于对照组均显著下调(P<0.01)。利用细胞凋亡检测试剂盒检测各组小鼠肝细胞凋亡情况,结果显示,与对照组比较,随着感染时间的延长,各感染组小鼠肝细胞凋亡比例显著或极显著增加(P<0.05,P<0.01)。本研究首次证实PRV感染小鼠后会导致肝脏线粒体出现氧化应激,从而造成肝细胞凋亡和线粒体膜电位降低,该结果为进一步研究PRV致病机理提供了一定的数据参考。
- 孙伟刘杉杉周佳王世达王靖飞董彦强
- 关键词：伪狂犬病毒线粒体氧化应激细胞凋亡
- 新城疫病毒通过候鸟途径跨境传入我国的风险定量评估
- 2020年
- 为评估我国家禽经候鸟途径导致感染新城疫病毒的风险,为疫病发生提供预警,本研究基于情景树方法,以斑头雁、白枕鹤及宗头鸥3种候鸟做为传播媒介,以候鸟携带病毒概率、候鸟存活概率、候鸟在目标区域出现/停留概率、候鸟与家禽有接触概率、候鸟与家禽有效接触概率、免疫覆盖率及免疫保护效率7个因素为主要风险节点构建了新城疫病毒通过候鸟途径传入我国家禽的风险评估模型。针对情景树中的关键风险节点进行数据采集及评估,以县级行政区划为空间单元、月份为时间单元对新城疫病毒通过候鸟途径引入风险进行了定量分析。分析结果表明,每年1—2月以及11—12月相对高风险区域主要集中在我国南部沿海地区,3—4月以及9—10月,处于候鸟迁徙路线上的中部东部地区家禽感染新城疫病毒的相对风险较高;5—6月我国东北地区以及中部地区为家禽通过候鸟途径感染新城疫病毒的相对高风险地区,7—8月,在我国华东地区出现了一个集中的相对高风险区域。整体而言,我国东部及中部地区风险高于西部地区。敏感性分析显示疫苗免疫是降低候鸟将新城疫病毒传播至家禽风险的主要因素。该研究为以风险评估为基础的疫病监测提供技术方案,为基于风险预警的新发新城疫疫情防控提供了理论依据。
- 王世达魏丽丽魏丽丽
- 关键词：风险评估新城疫候鸟病毒
- 黑龙江省猪繁殖与呼吸障碍综合征流行状况初步调查
- 猪繁殖与呼吸障碍综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome，PRRS)是猪重要传染病之一，它是由猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(Porcine reproductive...
- 王世达
- 关键词：猪繁殖与呼吸障碍综合征流行率病毒基因分子进化流行病调查
- 文献传递
- 禽流感病毒NS1蛋白在杆状病毒表达系统中的表达被引量：3
- 2012年
- 为获得纯化的禽流感病毒(AIV)的NS1蛋白,将A/chicken/Guangxi/10/99(H9N2)(CK/GX/10/99)NS1全长核苷酸克隆至杆状病毒转移载体pFastBacHTA中,构建了重组转移载体pFastBacHTA-NS1,然后转化入DH10Bac感受态细胞中制备重组杆粒,在脂质体介导下转染sf9昆虫细胞,获得表达NS1基因的重组杆状病毒。用重组杆状病毒转染昆虫细胞sf9进行NS1蛋白的表达,通过SDS-PAGE电泳、Western blot、间接免疫荧光(IFA)对表达的目标蛋白进行分析。结果表明,构建了含NS1基因的重组杆状病毒,分子质量约30ku的重组蛋白得到了表达,为NS1的相关功能研究奠定了基础。
- 李东卫郭莹莹刘在斯王世达沈楠文辉强焦同路王靖飞
- 关键词：蛋白纯化
- 黑龙江省猪繁殖与呼吸综合征血清流行病学调查与风险因素分析被引量：2
- 2013年
- 为了研究黑龙江省部分地区猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)血清学流行情况,采用ELISA方法对采集于72个猪场共计1 237份血清样品(仔猪653份,母猪584份)中的猪繁殖与呼吸系统综合征病毒(PRRSV)抗体进行了检测,并通过调查问卷对猪场感染PRRSV的潜在风险因素进行识别。结果表明:免疫猪群中仔猪PRRSV抗体流行率为61.5%[95%置信区间(CI):58.6,64.4],母猪为81.7%(95%CI:79.3,84.1);未免疫猪群中仔猪PRRSV抗体流行率为52.3%(95%CI:49.8,54.8),母猪为63.6%(95%CI:61.0,66.2);猪群PRRSV抗体流行率为92.9%(95%CI:89.0,96.8)。没有发现与该地区猪场感染PRRSV相关联的风险因素。
- 王世达孙伟文辉强王靖飞
- 关键词：血清学
- 表达H5亚型禽流感病毒HA蛋白的重组禽痘病毒的构建被引量：3
- 2012年
- 为构建表达H5亚型禽流感病毒(AIV)A/Duck/Anhui/1/06(H5N1)(简称AH/06)HA蛋白的重组禽痘病毒,本研究利用感染-转染的方法通过转移载体pSY681-gfp-gpt将AIV株AH/06的HA基因同源重组到禽痘病毒(FPV)中,并利用gfp和gpt双重筛选标记在鸡胚成纤维细胞中经过多轮筛选,得到纯化的重组禽痘病毒(rFPV-gfp-gpt-AHHA)。通过PCR、序列测定和western blot的方法对rFPV-gfp-gpt-AHHA进行鉴定和抗原活性分析。结果表明AH/06的HA基因稳定的重组到rFPV-gfp-gpt-AHHA中,其表达的HA蛋白能够与AH/06的阳性血清反应,显示出了良好的抗原性。同时病毒的生长曲线也显示外源HA基因的插入并没有影响亲本病毒的复制。这些结果为进一步的免疫效力研究奠定了基础。
- 焦同路王靖飞赵双成王世达常晓飞田石柳金雄李雁冰姜永萍陈化兰
- 关键词：H5亚型禽流感病毒重组禽痘病毒HA基因
- 盖塔病毒SC483株cDNA感染性克隆的构建
- 2023年
- 【背景】盖塔病毒(Getah virus,GETV)是一种由蚊虫传播的病毒,分类学上属于披膜病毒科甲病毒属成员。该病毒宿主范围广,可感染猪、马、牛、狐狸等多种哺乳动物,人也可以感染,但在人群中造成的危害尚不知晓。动物感染主要临床表现为发热、皮疹、关节炎、繁殖障碍和死胎。GETV在世界范围内流行较为广泛,近年来在我国的流行呈上升趋势,2018年我国南方多个猪场爆发该病,GETV在畜禽养殖及公共卫生方面的危害渐渐受到人们的关注。目前,尚无用于预防和治疗盖塔病毒感染的商业化疫苗和药物。由于对GETV研究较少,其生物学特性、对不同物种的致病性和致病机制以及流行趋势在很大程度上均是未知的。【目的】建立高效的GETV反向遗传操作平台,为深入研究GETV基因组结构与功能、致病机制以及开发新型疫苗奠定基础。【方法】采取化学合成的方式人工合成了两端分别含有锤头状核酶(HamRz)和丁肝病毒核酶(HdvRz)序列的GETV SC483株基因组全长,并克隆至低拷贝pOK12-CMV载体中,从而获得含有GETV SC483株基因组全长cDNA克隆的重组质粒pGETV-SC483。将纯化的重组质粒pGETV-SC483转染BHK-21细胞进行病毒拯救。对拯救病毒进行连续传代、鉴定以及生物学特性分析,并对感染性克隆质粒pGETV-SC483在大肠杆菌中的遗传稳定性进行验证。【结果】重组质粒pGETV-SC483转染BHK-21细胞后,48 h即可观察到GETV感染引起的典型细胞病变,获得的拯救病毒命名为rSC483。分别提取拯救病毒和亲本病毒基因组RNA,对病毒基因组进行RT-PCR扩增、Not I酶切以及序列测定。结果表明,拯救病毒不同于亲本病毒,其含有人为引入以消去Not I酶切位点的G4332A突变的分子标记。使用GETV特异性抗体作为检测抗体的间接免疫荧光试验和病毒粒子形态学电镜负染观察结果进一步表明,GETV拯救成功。噬斑形成试验和一步�
- 杜炳辰王铭刘春国王世达魏新宇路雅曼孙振钊刘在斯魏丽丽王靖飞杨德成
- 关键词：盖塔病毒病毒拯救
