王兰岚
- 作品数：44 被引量：428H指数：16
- 供职机构：中国科学院遗传与发育生物学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学电子电信医药卫生更多>>
- 用微束激光穿刺技术将商陆抗病毒蛋白(PAP)cDNA导入马铃薯的研究被引量：22
- 2000年
- 以马铃薯 (Solanum tuberosum L.)品种“津引 8号”微薯切片作为外植体 ,采用微束激光穿刺技术获得了商陆抗病毒蛋白 (PAP) c DNA的导入、整合与表达 .实验首次利用庆大霉素筛选马铃薯再生苗 ,庆大霉素筛选浓度为 80 mg/ L ,共得到 65株庆大霉素抗性苗 ,全部移栽成活 .PCR扩增和 PCR-Southern杂交分析表明 ,PAP c DNA已经稳定整合到马铃薯基因组 .攻毒实验发现 ,多数转基因植株生长健康 ,对供试病毒 PVX具有高度抗性 .
- 傅道林王兰岚张海燕陈正华
- 关键词：马铃薯
- 植物染色体微分离、微克隆及其DNA文库的构建
- 1999年
- 陈正华王兰岚胡赞民周奕华党本元崔丽华王槐
- 关键词：单染色体植物染色体微克隆微分离DNA文库扩增产物
- 激光微束切割小冰麦异附加系染色体的研究被引量：24
- 1997年
- 利用微束激光并选用适当的功率密度，可将小冰麦异附加系花粉母细胞染色体切割成２～３段。这个技术的建立，使激光微束应用于染色体片段、ＤＮＡ。
- 王兰岚宋桂英徐正平陆仲康梁宏
- 关键词：小麦小冰麦异附加系激光微束染色体
- 王百合单条染色体和染色体片段的分离被引量：39
- 1997年
- 本研究利用显微操作器建立了简单、有效地分离王百合单条染色体和染色体片段并将其放人Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ管中的方法。与前人方法相比，主要改进之处在于：（１）制片简单。不需要对盖片硅化处理，压片在截片和盖片之间进行。（２）所需设备简单。不需要倒置显微嵕担恍枰胍牵⑾覆Ａд肟稍诰凭莆⒒鹕侠啤＃ǎ常┎僮骷虻ィ矢摺Ｔ诒瓯旧霞訊一滴无菌水即可将染色体挑出。在２ｈ之内。
- 胡赞民崔丽华王兰岚李良才陈正华
- 关键词：染色体
- 将商陆抗病毒蛋白(PAP)cDNA导入油菜获得抗病毒转基因植株被引量：53
- 1998年
- 以子叶柄为材料,分别采用农杆菌介导法与激光微束穿刺法,将损伤诱导型启动子控制之下的商陆抗病毒蛋白(PAP)cDNA导入甘蓝型油菜(Brassica napus L.)“双低”品种H165,经庆大霉素筛选,获得了抗性再生植株.PCR扩增检测及Southern杂交分析表明,PAPcDNA连同损伤诱导型启动子已稳定整合至油菜基因组.攻毒实验表明,PAP的表达受损伤诱导型启动子的控制,转基因油菜植株对供试病毒TuMV具有不同程度的抗性.
- 张海燕周奕华党本元蓝海燕宋桂英王兰岚刘桂珍张丽华陈正华田颖川
- 关键词：油菜子转基因油菜
- 利用微束激光穿刺法将菜豆几丁质酶基因导入油菜的研究被引量：21
- 1999年
- 本文以甘蓝型“双低”油菜新品种Ｈ１６５为实验材料，以子叶柄为外植体，研究了微束激光转化系统中的一些关键因素：如取材时间以播种后４—５天为宜；高渗液预处理２０—４０分钟者最佳；外源ＤＮＡ浓度以０．０５—０．１μｇ／μｌ获得转基因植株最有利等等。已建立一种操作简便，重复性好，并能准确定位于靶体细胞的转化体系。并用这个转化体系成功地将菜豆几丁酶基因导入油菜，并获得转基因植株，经ＰＣＲ扩增检测为阳性，实验结果表明外源菜豆几丁酶基因确已整合到油菜基因组中。
- 杨仲毅王兰岚宋桂英徐正平张丽华刘桂珍陈正华
- 关键词：微束激光油菜几丁质酶基因
- 微束激光转基因技术研究进展被引量：17
- 1999年
- 本文叙述了激光微速穿刺法导入外源ＤＮＡ的基本原理及其有关影响因素等。利用该转化方法，现已成功地获得了多种动植物细胞外源基因的转化。实验证明，激光微束穿刺转化技术简便有效、重复性好、靶体选择性强，对靶体无损伤等优点。随着转化技术自动化水平的提高。光镊技术的渗透和结合。
- 付道林王兰岚
- 关键词：激光微束
- 激光微束穿刺法获得抗虫转基因油菜及其后代的研究被引量：11
- 2001年
- 利用激光微束穿刺法将苏云金芽孢杆菌的毒蛋白 (δ endotoxin)基因导入了油菜 ,经聚合酶催化链式反应(PCR)和PCRSouthern杂交证明抗虫基因已导入油菜基因组中并能在T1 代得到遗传。对转基因植株进行了抗虫性测试 ,结果表明某些植株具有较好的抗虫性 ,并且这种抗虫性在T1 代仍能保持。实验结果表明抗虫基因已整合进油菜基因组并得到了稳定的遗传。
- 侯丙凯周奕华刘桂珍宋桂英王兰岚陈正华
- 关键词：抗虫基因油菜转基因植株
- 利用激光微束穿刺法将外源基因导入小麦的研究被引量：59
- 1995年
- 用激光微束穿刺法将携带有新霉素磷酸转移酶（ＮＰＴ－Ⅱ）基因的质粒ｐＪＩＴ１０１导入京花１号小麦幼胚细胞。方法是将小麦幼胚细胞进行高渗缓冲液预处理，用微米级的激光微束处理，然后在卡那霉素培养基上筛选出具抗性的愈伤组织及绿色小植株。第一年，从１５０个小麦幼胚中，在卡那霉素培养基上筛选出４株绿苗，取两株进行ＮＰＴ－Ⅱ酶活性分析，测到了ＮＰＴ－Ⅱ酶的活性。第二年重复实验，从２４５个小麦幼胚中，经筛选获得１株绿苗，进行了叶片ＤＮＡＰＣＲ扩增检测，转化的绿色小苗扩增出所导入的ＮＰＴ－Ⅱ基因编码的片段。结果表明，外源ＮＰＴ－Ⅱ基因已导入了小麦，并实现了整合表达。
- 王兰岚傅荣昭宋桂英张健徐正平孙勇如
- 关键词：小麦激光微束外源基因
- 玉米单染色体的分离和体外扩增被引量：40
- 1998年
- 建立了玉米单染色体的分离及体外扩增的方法。取95％乙醇固定后经果胶酶和纤维酶酶解的根尖制备染色体标本，用自制的微细玻璃针在倒置显微镜下挑取目的染色体。染色体DNA经Sau3A酶切后与人工合成的Sau3A连接接头连接，经两次PCR扩增获得足以用于构建单染色体DNA文库的扩增产物。片段大小为0．3～5kb，多数为0．5～3．5kb．与前人研究方法相比，所需底物量少（只需1条染色体），扩增片段大，为植物中小型染色体分离、体外扩增进而进行单染色体DNA文库构建奠定了基础。
- 胡赞民党本元周奕华崔丽华王兰岚张铁汉李良材陈正华
- 关键词：玉米染色体DNA扩增
