王卫彪
- 作品数：3 被引量：7H指数：2
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- 骨髓间充质干细胞体外诱导分化为心肌样细胞的实验研究被引量：3
- 2008年
- 目的:研究兔骨髓间充质干细胞(MSCs)的体外分离、培养及向心肌细胞诱导分化的条件。方法:抽取兔髂骨骨髓,用密度梯度离心法和贴壁培养法分离、纯化MSCs,第3代细胞(P3)用流式细胞术检测细胞表面抗原CD34、CD45、CD11b,CD90、CD29。以10μmol/L5-氮胞苷(5-aza)进行诱导分化,4周后,用倒置显微镜、透射电镜观察MSCs形态学变化及超微结构特征,RT-PCR检测心肌特异性β-肌球蛋白重链(β-MHC)、肌钙蛋白I(cTnI)的表达。结果:兔MSCs呈贴壁集落生长,流式细胞术检测显示P3细胞均一性在97%以上,纯度较高。诱导后细胞体积较诱导前增大,更加细长。14天后细胞之间出现连接,排列方向渐趋一致。4周后,透射电镜下有肌丝、心房特殊颗粒及线粒体等心肌细胞超微结构形成。RT-PCR显示β-MHC、cTnI呈阳性反应。结论:MSCs在体外经5-aza诱导可以向心肌细胞进行分化。
- 王卫彪姜敏辉姜胜华姚蓓
- 关键词：骨髓间充质干细胞5-氮胞苷分化心肌样细胞
- 5-氮胞苷体外诱导骨髓间充质干细胞向心肌样细胞的分化被引量：2
- 2009年
- 目的:研究5-氮胞苷(5-Aza)对培养人骨髓间充质干细胞(MSC)的作用,并对分化后的心肌样细胞进行鉴定。方法:采用密度梯度离心法分离到骨髓单个核细胞(MB-MNC),用含200 ml/L胎牛血清的低糖型DMEM培养液进行培养。采用差速贴壁法纯化MSC,用流式细胞仪检测细胞表面抗原。以5-Aza诱导第3代MSC 24 h后继续培养。培养4周,用免疫细胞化学染色法检测肌系标记抗原:α-肌动蛋白(α-actin)及心肌细胞特异性标记抗原:肌钙蛋白T(cTnT);在透射电镜下观察细胞的超微结构。结果:MSC经5-Aza诱导分化后,可表达α-actin和cTnT,未经诱导的同培养天数的MSC中均未见表达。透射电镜可观察到肌丝等心肌细胞的特异性结构。结论:5-Aza可诱导MSC分化为心肌样细胞。
- 曹京燕程月新姜敏辉胡桂萍王卫彪姜胜华
- 关键词：骨髓间充质干细胞心肌样细胞
- 兔骨髓间充质干细胞移植治疗心肌梗死的实验研究被引量：2
- 2008年
- 目的:探讨骨髓间充质干细胞(mesenehymal stem cells,MSCs)移植对兔心肌梗死(myoeardial infarction,MI)的治疗作用。方法:大耳白兔38只,2只用于提供MSCs,余36只随机分为对照组、MI组和MSCs移植组。采用结扎左冠状动脉前降支方法制作MI模型,在MI后1小时将DAPI标记的MSCs移植至梗死区,对照组注射等量PBS。术前、术后2周、4周分别做超声心动图检查其心功能变化。术后4周处死兔.取心梗区组织进行组织学观察。结果:心梗4周后,MSCs组心肌组织冷冻切片中可以观察到DAPI标记细胞存在。MSCs组心功能和毛细血管密度与MI组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:经5-aza诱导的MSCs同种异体移植入兔MI模型的受损心肌后能存活并改善宿主的心功能。
- 姜敏辉王卫彪曹京燕
- 关键词：心肌梗死骨髓间充质干细胞
