王庆忠
- 作品数：47 被引量：110H指数：5
- 供职机构：潍坊学院生物与农业工程学院更多>>
- 发文基金：山东省自然科学基金潍坊市科技发展计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- GDNF对体外培养小鼠精原干细胞增殖的影响
- 2012年
- 为了研究胶质细胞原性神经营养因子(GDNF)对体外培养小鼠精原干细胞增殖与分化的影响,试验采用差速贴壁法分离小鼠精原干细胞(SSCs)和支持细胞(sertoli),以sertoli为饲养层接种精原干细胞,用免疫荧光染色法对精原干细胞进行鉴定,并将精原干细胞分为2组,试验组培养基中加入GDNF,对照组不加,测定精原干细胞的生长增殖情况,检测精原干细胞生长周期。结果表明:共培养6,9,12,15天时,试验组精原干细胞吸光度值明显高于对照组(P<0.05或0.01)。随着共培养时间的延长,试验组精原干细胞S期染色质含量逐渐增多,然后又逐渐下降,开始另一个分裂周期;与试验组比较,对照组精原干细胞S期染色质含量增长缓慢(P<0.05)。说明GDNF能促进体外分离培养的小鼠精原干细胞的更新增殖。
- 刘慧莲王庆忠
- 关键词：精原干细胞小鼠
- 石榴叶提取物的抑菌杀虫活性被引量：2
- 2014年
- 以75%乙醇为溶剂,采用索氏提取法提取石榴(Punica granatun L.)叶的有效成分,并对该提取物的抑菌作用进行了测定。结果表明,石榴叶提取物对白色葡萄球菌抑菌活性明显,对黑腹果蝇成虫有明显的毒害作用,且毒性效果与浓度呈正相关。石榴叶提取物对槐蚜防治效果明显,当石榴叶提取物浓度为60 mg/mL时,24 h后槐蚜校正死亡率达96.72%。石榴叶提取物具有广谱抑菌杀虫活性。
- 王东方王庆忠谷鹏柏显首
- 关键词：提取物生物活性
- 昆明白小鼠精原干细胞的体外培养被引量：3
- 2007年
- 建立了一种小鼠精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs)的分离、纯化和培养体系,主要包括SSCs的差异贴壁分选(differential adherence selection)、无血清培养基和MEF(mouse embryonic fibro-blast)饲养层。无血清培养基以StemPro-34 SFM为基础培养液,补充多种添加剂和GDNF(glial cell line-derived neurotrophic factor)、可溶性GFRα1(soluble GDNF family receptorα-1)和bFGF(basic fibroblastgrowth factor)等因子。昆明白小鼠(KMmice)幼鼠的生精细胞在这一培养体系中能够培养和增殖1个月。RT-PCR检测还表明培养的细胞同时表达Oct4和Sox2,说明SSCs与ESCs两者的自我复制可能享有共同的维持机制。
- 王庆忠刘慧莲
- 关键词：精原干细胞无血清培养基昆明白小鼠
- Knockout^(TM) SR无血清培养基支持小鼠精原干细胞的短期存活(简报)被引量：3
- 2008年
- 精原干细胞（spermatogonial stem cells，SSCs）是睾丸内具有自我复制和分化为精子潜能的干细胞，它的体外培养是精子发生机理研究和制作转基因动物等的新途径。近几年的研究表明，SSCs在体外的自我增殖需要GDNF（glial cell line—derived neurotrophic factor）因子和饲养层细胞等的支持，并且睾丸支持细胞（Sertoli’s cells）和血清都导致培养的SSCs分化。因此，使用无血清培养基培养高度纯化的SSCs是培养成败的关键之一。
- 王庆忠韩春生
- 关键词：小鼠精原干细胞SR无血清培养基
- 中药豨莶草的化学成分研究被引量：9
- 2014年
- 采用正相硅胶柱色谱、重结晶等方法对中药豨莶草进行了化学成分研究,并运用波谱方法对分离得到的化合物进行了结构鉴定。结果从豨莶草乙酸乙酯部位中分离并鉴定了18个化合物,分别为3,4＇-二甲氧基槲皮素（1）,3,3＇,4＇-三甲氧基槲皮素（2）,3,3＇-二甲氧基槲皮素（3）,7,3＇,4＇-三甲氧基木犀草素（4）,乌苏酸（5）,2β,19α-二羟基乌苏酸（6）,2β-羟基乌苏酸（7）,豆甾醇-7-酮（8）,3β-羟基-5α,8α-过氧-6,22-麦角甾二烯（9）,β-谷甾醇（10）,3,3＇-二羟基-4,4＇-二甲氧基二苯基四氢呋喃骈四氢呋喃木脂素（11）,乙酸橙酰胺（12）,3-（对甲氧基-间羟基苯基）-N-（2＇-对羟基苯乙基）-2E-丙烯酰胺（13）,对羟基苯甲醛（14）,间羟基对甲氧基苯甲醛（15）,3,4,5-三甲氧基苯甲酸（16）,丙二酸单乙酯（17）,对羟基肉桂酸（18）。其中,化合物1~9,11~18均为首次从该植物中分离得到。
- 王瑞师彦平王庆忠曹慧
- 关键词：菊科豨莶草化学成分
- 潍坊市面鲜奶吧巴氏鲜奶质量跟踪检测与评价被引量：1
- 2018年
- 目的:跟踪检与测评价研究2015—2018年间潍坊鲜奶吧巴氏鲜奶质量。方法:以《食品安全国家标准-巴氏杀菌乳》(GB19645-2010)为参考标准,对巴氏鲜奶的感官、理化指标、微生物含量、抗生素含量等方面进行检测。结果:所测样品绝大多数指标符合国家标准,仅有1个样品中检出β-内酰胺类抗生素。结论:潍坊巴氏奶质量总体可靠。
- 王建刚王庆忠
- 关键词：巴氏鲜奶
- 日光温室对土壤动物群落的影响被引量：3
- 2008年
- 对山东青州蔬菜种植区内栽培年限分别为1、3、5、7、9年和已废弃1、3年的日光温室及农田中土壤动物进行了为期一年的调查,结果表明,日光温室长期应用有使动物类群数减少、密度降低、多样性指数变小的趋势,温室废弃3年后,土壤动物群落结构可自行调整恢复。
- 王庆忠
- 关键词：日光温室土壤动物多样性
- 小鼠gdnf基因在真核细胞NIH-3T3中的表达被引量：1
- 2009年
- 为了得到超量表达胶质细胞源神经营养因子(glial cell line-derived neuotrophic factor,GDNF)的NIH-3T3细胞株,用于制作精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs)培养的饲养层,通过RT-PCR方法成功地从幼年小鼠睾丸中克隆了gdnf基因,构建了真核表达载体pcDNA3.1-gdnf,并用其转染NIH-3T3细胞.对筛选出的阳性细胞克隆进行的免疫荧光染色、RT-PCR和Western blotting的结果表明,获得了超量表达gdnf基因的NIH-3T3细胞株,这为精原干细胞的培养奠定了基础.
- 王庆忠潘智芳石玉强
- 关键词：GDNFRT-PCRNIH-3T3基因表达
- 一步酶消化贴壁筛选法快速分离纯化大鼠精原干细胞
- 2013年
- 为了快速分离、纯化大鼠精原干细胞,试验采用一步酶消化法制备睾丸细胞悬液,用贴壁筛选法富集和纯化大鼠精原干细胞,用添加了胶质细胞源神经营养因子(GDNF)、可溶性胶质细胞源神经营养因子受体α1(GFRα1)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的DMEM/F12无血清培养基和小鼠胚胎成纤维细胞饲养层对纯化的细胞进行了培养。结果表明:培养的细胞具有精原干细胞活性。说明一步酶消化贴壁筛选法能快速分离、纯化大鼠精原干细胞。
- 王庆忠刘慧莲王汉海
- 关键词：精原干细胞纯化
- 利用培养的小鼠精原干细胞生产转基因小鼠
- 王庆忠刘慧莲王汉海刘世武王东方
- 该项目由潍坊市科技发展计划2007(41)号(2007028)所立项。主要研究内容是采用差异贴附分选方法从新生小鼠睾丸细胞中分离和纯化小鼠精原干细胞，设计适于小鼠精原干细胞体外存活和增殖的培养基并对所分离的干细胞进行体外...
- 关键词：
- 关键词：转基因小鼠精子
