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可区分HBV B型和非B型的双探针实时定量PCR法: 本发明涉及一种双探针实时荧光定量PCR方法，更具体涉及一种可区分HBV B型和非B型的双探针实时定量PCR法。本发明建立了一种基于型特异性碱基设计的双探针实时定量PCR法，适用于B、C基因型流行的亚洲和太平洋地区HBV感...; 欧启水王炜曾勇彬; 文献传递

基于PCR的少量突变检测技术的应用被引量：2: 2013年; 随着现代分子生物学和分子遗传学的发展，现代医学对少量突变的检测提出了更高的要求。近年来基于PCR原理相继发展了多种少量突变检测技术，包括扩增阻滞突变系统、PCR夹技术、焦磷酸解激活的聚合反应技术、低变性温度共扩增PCR技术、数字PCR技术等，这些技术已经或者必将使遗传病的分子诊断、肿瘤监测、无创性产前诊断等进入一个全新的阶段。现将此类技术的基本原理及优缺点综述如下，以期为该类技术的应用提供借鉴。（手华，捡验医学杂志，2013，36：40-45）; 王炜欧启水; 关键词：DNA突变分析聚合酶链反应转变温度

HBVDNA定量与基因分型双重分子信标实时PCR方法的建立及初步应用被引量：3: 2013年; 目的研究建立同时进行HBVDNA定量与基因分型检测的双重分子信标实时PCR法（以下简称“定量与分型PCR法”），并探讨其应用价值。方法构建B、c基因型重组质粒作为标准品，通过设计B、c基因型特异性引物和分子信标（B、c基因型分子信标5’端分别标记FAN和Hex荧光基团），建立在1个反应体系中同时定量与分型PER法。然后，用10倍梯度稀释的B、c基因型标准品（10。～1011 kIU／L）评价其检测线性范围和灵敏度；用丙型肝炎病毒感染者、单纯疱疹病毒感染者、人类乳头瘤病毒感染者、健康志愿者血清各5份评价其检测特异性；用高、中、低3份不同浓度的B、c基因型质粒标准品（10、106、104 kIU／L）进行同批次和不同批次各10次重复检测，分别计算批内及批间ct值的变异系数（CV）评价其检测重复性。然后，以湖南圣湘生物科技有限公司HBV核酸定量测定试剂盒为HBVDNA定量参照方法，申友公司HBV基因分型试剂盒为HBV基因分型参照方法，同定量与分型PCR法平行检测132例HBV感染者血清标本，评价自建定量和分型PCR法的准确性。最后，将132例HBV感染者分为无症状携带组（21例）、慢性乙型肝炎组（77例）、肝硬化组（25例）、肝癌组（9例），分析评价基因型、疾病进展的不同阶段与DNA载量间的相关性。结果用自建定量与分型PCR法检测B、c基因型的灵敏度均为103 kIU／L；线性范围均为103一1011 kIU／L；检测B基因型批内CV为1．51％～1．80％，批间CV为2．11％～3．03％，检测C基因型批内CV为1．79％～1．95％，批问CV为2．53％～2．91％；对其他病毒感染者和健康志愿者血清检测结果均为阴性。定量与分型PCR法检On．0132例HBV感染者的基因分型结果与HBV测序分型试剂盒总符合率为90．9％（120／132，Kappa=0．832，P〈0．05）；其DNA定量结果[5．07（3．89～6．33）lgkIU／L]与HBV; 王炜陈晓江凌刘灿商红艳欧启水杨滨; 关键词：肝炎病毒乙型病毒聚合酶链反应

可区分HBV B型和非B型的双探针实时定量PCR法: 本发明涉及一种双探针实时荧光定量PCR方法，更具体涉及一种可区分HBVB型和非B型的双探针实时定量PCR法。本发明建立了一种基于型特异性碱基设计的双探针实时定量PCR法，适用于B、C基因型流行的亚洲和太平洋地区HBV感染...; 欧启水王炜曾勇彬; 文献传递

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王炜

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