王瑾雯
- 作品数：15 被引量：90H指数：6
- 供职机构：中山大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金“九五”国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学建筑科学更多>>
- 云芝多糖对巨噬细胞氧化LDL的抑制作用与iNOS基因表达被引量：19
- 1999年
- 目的和方法为揭示云艺多糖（PSK）的抗动脉粥样硬化机理，用RT-PCR和Westernblot等方法研究了PSK对巨噬细胞氧化低密度脂蛋白（LDL）的影响。结果PSK处理小鼠的巨噬细胞对LDL的氧化作用明显降低，NO分泌明显增加；PSK增强了IFN-Y对巨噬细胞LDL的抑制作用，减弱了一氧化氮合酶抑制剂N-Arg和DPI对细胞氧化LDL的增强作用；同时PSK能增强IFN-Y对细胞分泌NO的诱导作用，减弱N-Arg对细胞分泌NO的抑制作用；PSK能增强Raw264.7细胞iNOSmRNA和蛋白表达。结论PSK能抑制巨噬细胞对LDL的氧化，其作用机制可能与其能诱导iNOS基因表达有关。
- 王瑾雯陈瑗周玫莫永炎张宝
- 关键词：云芝多糖LDLINOS巨噬细胞
- 抑制性消减杂交分析肌动蛋白细胞骨架和细胞外基质基因在膀胱癌中的表达下调被引量：7
- 2002年
- 目的 分析膀胱移行细胞癌的差异表达基因 ,探讨肿瘤行为的分子生物学基础及筛选有效的肿瘤标记。方法 应用抑制性消减杂交 (SSH)方法构建在正常膀胱组织和膀胱癌组织中差异表达序列的消减文库 ,用差异筛选技术分离差异表达基因。结果 从消减文库中共获得了 9个在正常膀胱组织中高表达、在膀胱癌组织中表达下调的基因 ,分别属于细胞外基质成分和肌动蛋白细胞骨架体系。结论 细胞外基质和肌动蛋白细胞骨架体系中相关基因的表达下调可能反映了肿瘤细胞在细胞粘附、细胞间相互作用、迁移及运动等诸多过程中的异常 ,可能与癌细胞的侵袭和转移密切相关 ,对发展成为膀胱癌的分子标记物具有潜在价值 ;gelsolin。
- 刘晓琼付捷杨林王瑾雯龙綮新王珣章秦杨吕任奇
- 关键词：肌动蛋白细胞骨架膀胱癌基因表达
- 斜纹夜蛾核多角体病毒p49基因在大肠杆菌中的表达及其在昆虫细胞中的表达时相分析被引量：2
- 2004年
- 利用PCR方法从斜纹夜蛾核多角体病毒 (SpltMNPV)基因组中扩增获得了细胞凋亡抑制基因p4 9的完整ORF并将其克隆于pMD1 8 T载体 ,其序列分析结果与文献报道一致。将基因重组于硫氧还蛋白融合表达载体pThioHisC ,在大肠杆菌BL2 1 (DE3)中获得了稳定表达 ,表达的P4 9融合蛋白占菌体总蛋白 30 %左右 ,主要以包涵体形式存在。分离纯化重组表达的SpltMNPVP4 9蛋白作为抗原 ,免疫家兔制备得到效价高于 1∶1 0 0 0 0的抗重组P4 9蛋白多克隆抗体。应用制备的抗体对受SpltMNPV感染的Sl细胞中P4 9蛋白的表达时相进行分析 ,结果显示P4 9蛋白在细胞感染后 3h内便可检测到 。
- 曾美珍王瑾雯李镇龙綮新王珣章
- 关键词：SPLTMNPV凋亡抑制多克隆抗体
- 豉甲科及水生肉食亚目的分子系统发育学分析(昆虫纲：鞘翅目)被引量：3
- 2008年
- 利用PAUP和MrBayes软件,对线粒体COⅠ基因序列3个密码子位置的数据模块分别进行了豉甲科（Gyrinidae）和水生肉食亚目（Hydradephaga）在亚科或科水平上的系统发育学分析,结果表明第二密码子数据模块获得了理想的分析结果。由PAUP生成的豉甲科最优树来自第二密码子数据模块的分析,而由MrBayes生成的最优树来自全部密码子数据模块的分析。此外,用对应的氨基酸序列生成的ME和MP树与第二密码子数据模块分析的结果也一致。亚科Orectochilinae和Gyrininae以高的支持率形成了单系。然而,来自亚科Enhydrinae的种Porrorhynchus landaisi landaisi呈现了异常的位置。SH-test检验也支持该异常位置,表明这个种可能代表了一个科。在来自第二密码子数据模块的水生肉食亚目最优ML树中,整个Hydradephaga树呈现单系,豉甲科位于树的基部,表明了该科在水生肉食亚目中是一个早期的分支。在树中还产生了一个单系的Dytiscoidea总科,由Dytiscidae、Hygrobiidae、Noteridae和Amphizoidae 4个科组成,单系的Haliplidae与之成为姐妹群。此外线粒体分子钟的结果表明豉甲科的5对相近种间的分化是一个短时期内发生的（0.01~1.81百万年前）,这点可能与它们的特殊地理分布有关。
- 习欠云邓日强王瑾雯贾凤龙王珣章
- 关键词：系统发育学
- 日本血吸虫新基因——蛋白酶体激活因子PA28亚单位的发现与克隆被引量：2
- 2001年
- 目的将用EST策略及同源性搜索发现的日本血吸虫新基因——蛋白酶体激活因子PA28亚单位（proteasome activatorPA28 subunit,PA28）cDNA克隆到表达质粒pET32a（+）上,为下一步对该基因进行功能研究做准备。方法将插入于pTrip1Ex2质粒上的cDNA进行测序,测序结果经BLASTx程序搜索,发现该插入cDNA序列所编码的蛋白与小鼠肌肉内的PA28亚基蛋白高度同源。根据表达质粒pET32a（+）上的克隆位点及该cDNA序列设计PCR引物,将PCR产物纯化后连接到pMD 18-T载体上,将重组T载体经EcoRI/XhoI双酶切后切下的SjPA28基因导入原核可溶性表达质粒pET32a（+）中。结果所发现的cDNA所编码的蛋白与小鼠肌肉内的PA28亚基蛋白的同一性达41％,PCR产物的片段长度与预期大小一致,重组T载体及表达质粒经EcoRI/XhoI双酶切后证明具有与目标片段长度相符的插入片段。结论本研究所发现的cDNA所编码的蛋白与小鼠肌肉内的PA28亚基蛋白高度同源,并且已成功地构建出重组表达质粒pET32a（+）-SjPA28。
- 彭鸿娟王瑾雯陈晓光高锦雄
- 关键词：日本血吸虫曼氏血吸虫
- PRV闽A株gE基因抗原编码区片段在昆虫细胞中的表达研究被引量：4
- 2004年
- 伪狂犬病病毒(PRV)糖蛋白E是一种在伪狂犬病的根除计划中具有重要作用的糖蛋白。将伪狂犬病病毒闽A株gE基因抗原编码区片段克隆到杆状病毒Bac＿to＿Bac系统表达载体pFastBacHTa中,获得的重组表达载体pFastBacHTa＿FS转化大肠杆菌DH10BAC感受态细胞后,得到的重组BacmidDNA在脂质体介导下转染粉蚊夜蛾Hi5细胞,通过细胞内同源重组,获得了含目的片段的重组病毒。此重组病毒感染Hi5细胞后72h,细胞总蛋白的SDS＿PAGE与Western＿Blot结果表明,gE基因抗原编码区片段在Hi5细胞中得到了正确表达,表达产物约35000,占细胞总蛋白的9 31%。溶解性分析显示该片段在Hi5细胞中为不可溶性表达。
- 敖敬群王瑾雯陈新华王珣章龙綮新
- 关键词：伪狂犬病病毒杆状病毒基因表达
- 位点特异性频率模型在昆虫分子系统发育分析中的应用
- 2007年
- 根据位点特异性频率模型(site-specific rate model),利用PAUP软件,对线粒体COI基因序列不同密码子位点的数据模块分别进行了豉甲科和水生肉食亚目在亚科或科水平上的系统发育学分析,结果表明第二密码子数据模块获得的系统分析结果与形态学分析结果一致。表明位点特异性频率模型在线粒体COI基因作为标记来进行昆虫分子系统发育分析上获得了更好的效果。
- 习欠云杨洁邓日强王瑾雯贾凤龙张永亮江青艳王珣章
- 关键词：线粒体COI基因系统发育
- 一氧化氮、超氧阴离子和过氧亚硝酸的作用和相互关系的研究进展被引量：21
- 1998年
- 一氧化氮、超氧阴离子和过氧亚硝酸的作用和相互关系的研究进展王瑾雯陈瑗周玫（第一军医大学自由基医学研究室，广州５１０５１５）关键词一氧化氮超氧阴离子过氧亚硝酸阴离子一氧化氮（ＮＯ）、超氧阴离子自由基（Ｏ－２·）和过氧亚硝酸（ＨＯＯＮＯ／·ＯＯＮＯ），三...
- 王瑾雯陈瑗周玫
- 关键词：一氧化氮超氧阴离子动脉粥样硬化
- 一氧化氮在低密度脂蛋白氧化中的双向作用被引量：3
- 2000年
- 为观察一氧化氮与低密度脂蛋白氧化的关系 ,揭示一氧化氮在动脉粥样硬化发病和防治中的作用 ,给小鼠腹腔注射云芝多糖 ,再用干扰素γ、脂多糖和L -精氨酸刺激小鼠腹腔巨噬细胞 ,然后检测一氧化氮释放量与脂氢过氧化物浓度。结果发现 ,一氧化氮与低密度脂蛋白氧化间有一个量的相关关系 (r =0 .75 3,P <0 .0 5 ) ,一定范围内 (≤ 5 0 μmol/L)的一氧化氮释放量与脂氢过氧化物的量呈负相关 ,即抑制细胞对低密度脂蛋白的氧化 ;当一氧化氮产生过多时 (≥ 90 μmol/L) ,脂氢过氧化物的量随之增加 ,则促进低密度脂蛋白的氧化。结果提示 ,一氧化氮在低密度脂蛋白氧化中发挥双重作用 ,它对低密度脂蛋白的氧化起抑制或促进作用取决于它的释放量。
- 王瑾雯陈瑗周玫王珣章
- 关键词：一氧化氮脂蛋白低密度巨噬细胞氧化修饰
- 伪狂犬病病毒闽A株gE基因去信号肽片段在Pichia pastoris中的表达被引量：1
- 2003年
- 伪狂犬病病毒囊膜糖蛋白E是一种在伪狂犬病根除计划中具有重要作用的糖蛋白 .将伪狂犬病病毒闽A株 gE基因去信号肽片段克隆到巴斯德毕赤酵母 (Pichiapastoris)表达载体pPICZαA中 ,获得的重组表达载体pPICZαA FL电击转化野生型酵母菌SMD116 8后 ,得到多株酵母工程菌SMD116 8/ pPICZαA FL .经高浓度ZeocinTM筛选、表型鉴定、工程菌的诱导表达及表达产物的鉴定 ,最后得到高效表达 gE基因去信号肽片段的酵母工程菌SMD116 8/ pPICZαA FL 7.工程菌 72h培养上清的SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳与蛋白质印迹结果显示 ,gE基因去信号肽片段表达产物大小约为 80ku ,比预期的 6 3 8ku大 .凝胶薄层扫描结合Bradford蛋白质总含量测定结果表明 ,表达产物占工程菌培养上清总蛋白的 13 4 9% ,表达量可达 11 7mg/L .间接ELISA结果表明重组表达产物具有良好的抗原性 。
- 敖敬群王瑾雯陈新华王珣章龙綮新娄高明
- 关键词：伪狂犬病病毒GE基因信号肽
