王茂淋
- 作品数：8 被引量：12H指数：2
- 供职机构：华中农业大学生命科学技术学院农业微生物学国家重点实验室更多>>
- 发文基金：转基因生物新品种培育专项国家重点实验室开放基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学医药卫生更多>>
- 粘红酵母ATP:柠檬酸裂解酶基因的克隆表达和酶学性质被引量：2
- 2011年
- 从粘红酵母(Rhodotorula glutinis)中克隆得到ATP:柠檬酸裂解酶基因两个亚基acl1和acl2,转化毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115进行诱导表达,通过Ni柱纯化目的蛋白,以实时波长扫描对重组蛋白的酶学性质进行测定。SDS-PAGE分析表明,两个亚基ACL1和ACL2的分子量分别为66 kDa和55 kDa。重组蛋白的酶学测定表明,经毕赤酵母表达后,单个亚基酶活性不到1.0 U.mg-1,双亚基混合后具有较高的酶活性,当混合质量比为1∶1时全酶的酶比活力达到最大,为6.5 U.mg-1,酶反应的最佳条件为:pH值8.5、37℃反应10 min。为提高油料作物油脂含量提供了新的转基因材料。
- 赵检王旭颖王茂淋郑世学喻子牛张吉斌
- 关键词：粘红酵母克隆酶特性
- 结核分枝杆菌螺旋酶GyrA与GyrB互作区域的缺失突变体对酶功能的影响
- DNA螺旋酶是唯一一种可以引入DNA负超螺旋的type II拓扑异构酶,它是原核细胞所必须的基本酶类,参与了细胞内DNA的生理活动,如DNA复制、转录、基因重组、染色体重组等生理活动,因人体不存在DNA螺旋酶,螺旋酶被开...
- 王茂淋
- 关键词：缺失突变体
- 文献传递
- 一种亮斑扁角水虻抗菌肽及制备方法和应用
- 本发明公开了一种亮斑扁角水虻新抗菌肽StomoxynZH1及制备方法和应用。抗菌肽的制备步骤是：首先提取昆虫亮斑扁角水虻的总RNA为模板，通过RT-PCR得到cDNA第一链来作为模板，通过PCR扩增，得到PCR产物；其次...
- 张吉斌周定中王茂淋左怀雨喻子牛
- 文献传递
- 与GyrA相互作用的GyrB结构域突变对结核分枝杆菌螺旋酶功能的影响
- 2017年
- DNA螺旋酶中的GyrA与GyrB亚基只有互作重组后才有酶活性。为寻找GyrB亚基和GyrA亚基相互作用的关键区域,构建了不同的GyrB亚基突变体,分析GyrB各突变体与GyrA亚基的相互作用对全酶活性的影响。结果显示:GyrB亚基C端是其与GyrA相互作用的主要结构域,结合GyrB的二维结构,提出GyrB中第531~550位氨基酸是影响螺旋酶功能的关键区域,并可能是理想的新药设计靶标。
- 王茂淋黄友谊左怀雨张吉斌
- 抗耻垢分枝杆菌菌株的筛选及活性物质的初步研究被引量：1
- 2016年
- 从80株深海细菌和425株植物根际细菌中分离得到2株对耻垢分枝杆菌有稳定拮抗作用的细菌,其中多粘类芽胞杆菌KM2501-1的拮抗效果最佳;对其活性物质的理化性质进行研究,发现该活性物质能被硫酸铵沉淀、耐高温、对部分蛋白酶敏感、在pH值2.0~8.0范围内和紫外环境下稳定,分子量在10~30kDa之间,初步判断该活性物质可能是蛋白类物质;对该活性物质进行初步分离纯化,SDS-PAGE电泳结果显示,该活性物质中有蛋白存在;初步纯化的蛋白类活性物质的最小抑菌浓度在125~250μg·mL-1之间,具有深入研究的价值。
- 王茂淋程万里余晨张吉斌
- 关键词：耻垢分枝杆菌理化特性最小抑菌浓度
- 海洋细菌Bacillus mojavensis 1A00437 β-1,3-1,4-葡聚糖酶基因的克隆、表达及功能研究
- 2014年
- Bacillus mojavensis 1A00437是分离自太平洋的一株芽胞杆菌,成功克隆了该菌的β-1,3-1,4-葡聚糖酶基因并在原核系统获得高效表达。测序结果表明,该基因的ORF全长681bp,编码一条226个氨基酸的蛋白,蛋白大小25.3kDa。该酶的最适pH值及最适反应温度分别为6.5、60℃。研究表明,1mmol·L-1 Ca2+、Mn2+可显著抑制该重组酶活性,该重组酶对稻瘟病菌无抗性,但对小麦纹枯病菌及水稻纹枯病菌具有明显抑制作用。饲料体外消化实验表明,该重组酶对稻糠、玉米粉具有显著降解效果。为该酶用作抗真菌剂及饲料添加剂提供了理论基础。
- 左怀雨王茂淋邵宗泽李光玉徐柳喻子牛张吉斌
- 关键词：BACILLUS葡聚糖酶基因克隆饲料添加剂
- 一种亮斑扁角水虻抗菌肽及制备方法和应用
- 本发明公开了一种亮斑扁角水虻新抗菌肽StomoxynZH1及制备方法和应用。抗菌肽的制备步骤是：首先提取昆虫亮斑扁角水虻的总RNA为模板，通过RT-PCR得到cDNA第一链来作为模板，通过PCR扩增，得到PCR产物；其次...
- 张吉斌周定中王茂淋左怀雨喻子牛
- 黑水虻肠道细菌抗菌筛选及其活性物质分子鉴定被引量：9
- 2012年
- 【目的】从昆虫黑水虻分离的肠道细菌进行抗植物病原菌的拮抗菌筛选,对获得有拮抗活性的肠道细菌进行活性物质的分子鉴定。【方法】用稀释涂布法从水虻肠道中分离菌株,采用平板对峙法进行抗菌筛选,对有抗菌活性的菌株通过生理生化实验、16S rRNA鉴定和进化树分析确定其种属。参考已知脂肽合成关键基因设计引物,以拮抗菌总DNA为模板进行PCR扩增,对目的片段进行测序。【结果】通过抗菌筛选获得一株对水稻黄单胞菌以及小麦纹枯病病原菌等有很强抑制效果的水虻肠道细菌BSF-CL,经鉴定为枯草芽胞杆菌。脂肽合成关键基因PCR结果显示BSF-CL菌株具有脂肽Iturin和Surfactin合成的关键基因。推测BSF-CL很可能合成脂肽Iturin和Surfactin。【结论】从水虻肠道中分离出对水稻黄单胞菌有很强抑菌活性的菌株,分离菌被鉴定为一种枯草芽胞杆菌,通过活性物质的分子克隆鉴定初步推测其活性物质可能为脂肽Iturin和Surfactin。
- 周定中曹露王茂淋喻子牛张吉斌
- 关键词：枯草芽胞杆菌脂肽分子鉴定
