王雪琦
- 作品数：1 被引量：1H指数：1
- 供职机构：暨南大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技支撑计划广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 人Aurora B基因的克隆、原核表达及生物信息学分析被引量：1
- 2012年
- 目的:克隆出人Aurora B基因,并将其于大肠杆菌Rosetta(DE3)菌株中表达,获得重组蛋白。方法:利用TRIzol Reagent法提取食管癌ECa 109细胞总RNA,RT-PCR后以其cDNA为模板PCR扩增Aurora B基因,构建pET 28a(+)-Aurora B重组质粒,将其转化Rosetta(DE3)菌株,IPTG体外诱导表达重组蛋白。利用生物信息学工具对Aurora B的核酸序列和蛋白功能结构进行分析。结果:成功构建了pET 28a(+)-Aurora B重组质粒,经序列比对,与GenBank上公布的人Aurora B基因序列同源性达到了99%;获得Aurora B蛋白,大小约39kDa,蛋白表达量约占菌体总蛋白的28%。结论:对人Aurora B基因进行克隆、原核表达及生物信息学分析,为深入研究Aurora B在细胞周期调控中的作用机制及后续Aurora B抑制剂的体外筛选奠定基础。
- 邱贤秀周莹王雪琦丁伟超刘忠王绍祥王一飞
- 关键词：克隆原核表达生物信息学
