王颉
- 作品数：7 被引量：10H指数：2
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- 光动力疗法对子宫内膜癌Ishikawa细胞系细胞周期和凋亡的影响被引量：1
- 2015年
- 目的探讨光动力疗法(PDT)对子宫内膜癌Ishikawa细胞系细胞周期及凋亡的影响。方法以四甲基吡啶卟啉(TMPy P)为光敏剂的PDT处理Ishikawa细胞,显微镜观察细胞形态;细胞计数试剂盒CCK-8检测细胞的存活率;流式细胞术检测细胞周期;使用Annexin V-FITC/PI凋亡检测试剂盒及流式细胞术检测细胞的凋亡;蛋白免疫印迹法检测Bcl-2、NF-κB P65及磷酸化NF-κB P65的表达。结果 PDT可以改变Ishikawa细胞的形态,降低细胞存活率(P<0.05),并与光敏剂TMPy P的浓度和激光能量密度有关;PDT引起细胞S期阻滞(P<0.05),诱导Ishikawa细胞发生凋亡(P<0.05),降低Bcl-2蛋白的表达和NF-κB P65的磷酸化水平(P<0.05)。结论 PDT可能通过下调Bcl-2、NF-κB的活性引起Ishikawa细胞S期阻滞和细胞凋亡。
- 宗丽菊王颉刘洪丽冯进波张友忠
- 关键词：光动力疗法细胞周期
- 核仁素表达下调对宫颈癌细胞Hela生物学行为的影响被引量：2
- 2013年
- 目的探讨核仁素表达下调对宫颈癌Hela细胞增殖、凋亡、侵袭等生物学行为的影响。方法实验分4组:3个靶向人核仁素基因的实验组(siN1组、siN2组、siN3组)及1个阴性对照组(NC组)。体外化学合成各组siRNA并转染HeLa细胞;利用荧光实时定量RT-PCR法和Western blotting法分别从mRNA和蛋白水平检测核仁素基因的干扰效率,并筛选出干扰效率最高的片段;利用细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒(CCK-8)法检测核仁素下调对HeLa细胞增殖活性的影响;利用流式细胞学Annexin V-FITC检测转染后HeLa细胞凋亡率的改变;Transwell实验检测转染后细胞侵袭能力的改变。结果与NC组相比,各实验组核仁素mRNA表达水平均下降(P<0.05);蛋白表达水平也相应下调(P<0.05)。成功筛选出最佳干扰片段siN2,用于后续实验。siN2组HeLa细胞生长速率明显受到抑制(P<0.05);流式细胞学Annexin V-FITC检测siN2组HeLa细胞凋亡率明显高于NC组(P<0.05);Transwell实验显示siN2组HeLa细胞侵袭能力减弱(P<0.05)。结论核仁素表达下调明显抑制宫颈癌Hela细胞增殖与侵袭能力,促进细胞凋亡,为宫颈癌的基因治疗提供了理论依据。
- 刘洪丽张友忠吕昌帅丁佰娟王颉
- 关键词：HELA细胞小分子干扰核仁素
- 早期宫颈癌患者术后预后不良因素的Meta分析
- 韩赛张友忠李艺宗丽菊李姗王颉胡睿
- 四甲基吡啶卟啉-光动力疗法对人宫颈永生化上皮H8细胞的作用被引量：2
- 2015年
- 目的探讨四甲基吡啶卟啉-光动力疗法(TMPy P4-PDT)对人宫颈永生化上皮H8细胞增殖和凋亡的影响。方法显微镜下观察TMPy P4-PDT后H8细胞形态学变化;采用细胞活力试剂盒(CCK-8)检测细胞的增殖活力;Annexin V-FITC/PI双染试剂盒检测细胞凋亡率;免疫细胞化学SABC法检测TMPy P4-PDT对H8细胞p16INK4a蛋白的表达变化;蛋白免疫印迹法(Western blotting)检测人端粒酶逆转录酶(hTERT)、p21蛋白的表达。结果 TMPy P4-PDT可抑制H8细胞的增殖,诱导细胞凋亡,且在一定范围呈TMPy P4剂量依赖性;免疫细胞化学SABC法结果显示,TM Py P4-PDT可降低细胞p16INK4a蛋白的阳性率;Western blotting结果表明,TMPy P4-PDT下调hTERT的表达,上调p21的表达。结论 TM Py P4-PDT可抑制H8细胞的增殖,诱导H8细胞的凋亡,其作用机制可能与下调p16INK4a、hTERT及上调p21的表达有关。
- 宗丽菊张友忠王颉吴淑霞刘洪丽张璐
- 关键词：人端粒酶逆转录酶P21蛋白P16INK4A蛋白
- 慢病毒介导的hTERT-shRNA联合光动力治疗对宫颈癌细胞SiHa的影响被引量：2
- 2015年
- 目的探讨慢病毒介导的人端粒酶逆转录酶(hTERT)联合四甲基吡啶卟啉(TMPy P4)及光动力疗法对宫颈癌细胞Si Ha的影响。方法实验分4组:空白对照组、单纯基因治疗组、单纯光动力治疗组、联合治疗组。体外化学合成Lenti-hTERT-shRNA并转染Si Ha细胞,确定最适感染复数(MOI)值,成功稳定转染后给予浓度为7.5μmol/L的TM Py P4行光动力治疗。RT-PCR法检测hTERT、p53、HPV-16 E6、Caspase-8 mRNA的表达;免疫荧光检测hTERT蛋白的表达;细胞增殖及细胞毒性(CCK-8)检测各组中人宫颈癌细胞Si Ha的抑制作用;Annexin V-PE/7-AAD双染试剂盒检测各组细胞的凋亡率;Transwell实验检测各组细胞侵袭能力的改变。结果与空白对照组比较,其他3组hTERT、HPV-16 E6、Caspase-8 mRNA的表达水平均下降,p53mRNA的表达水平升高,hTERT蛋白表达水平相应下降,其中联合治疗组最明显(P<0.05);联合治疗组较其他组明显抑制Si Ha细胞的增殖(P<0.05);流式细胞学Annexin V-PE/7-AAD和Transwell实验检测结果显示,联合治疗组较单纯基因治疗组和单纯光动力治疗组的凋亡率明显升高,细胞侵袭能力明显减弱(P<0.05)。结论慢病毒介导的hTERT-shRNA联合光动力治疗明显抑制宫颈癌Si Ha细胞的增殖和侵袭能力,并促进细胞凋亡。
- 王颉张友忠冯进波刘洪丽宗丽菊
- 关键词：SIHA细胞人端粒酶逆转录酶光动力治疗
- 新型光动力学疗法联合核仁素沉默对宫颈癌SiHa细胞的光动力学效应被引量：4
- 2014年
- 目的:研究新型光敏剂阳离子卟啉(TMPyP4)介导的光动力学疗法(PDT)联合人核仁素基因沉默对人宫颈癌SiHa细胞的体外抑瘤效应,探讨有效的宫颈癌联合治疗方案。方法:SiHa细胞分为空白对照组、RNAi组、PDT组和联合治疗组(PDT-RNAi组)。采用细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒(CCK8)法检测各组细胞增殖活性;采用流式细胞术定量检测各组细胞凋亡率;采用Tranwell实验检测各组细胞侵袭能力。结果:与空白对照组比较,RNAi组、PDT组和PDT-RNAi组细胞的生长抑制率明显升高(P<0.01);PDT-RNAi组细胞生长抑制率明显高于RNAi组和PDT组(P<0.05),Q值等于1.27。与空白对照组比较,各实验组细胞凋亡率增加(P<0.05),PDT-RNAi组晚期细胞凋亡率明显增加,PDT-RNAi组细胞凋亡率与RNAi组和PDT组比较差异也有统计学意义(P<0.05)。与空白对照组比较,各实验组细胞侵袭性均减弱(P<0.05);PDT-RNAi组细胞侵袭性减弱最为显著,且与RNAi组和PDT组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:新型PDT对SiHa细胞具有良好的体外光动力效应,可抑制宫颈癌SiHa细胞的增殖和侵袭,促进其凋亡。核仁素基因沉默对SiHa细胞的PDT具有协同增效作用,PDT联合核仁素沉默可能成为治疗肿瘤的新方案。
- 刘洪丽吕昌帅丁佰娟王颉李姗张友忠
- 关键词：SIHA细胞
- 核仁素表达下调对宫颈癌细胞HeLa生物学行为的影响
- 目的 探讨核仁素表达下调对宫颈癌Hela细胞增殖、凋亡、侵袭等生物学行为的影响.方法 体外化学合成靶向人核仁素的siRNA,转染HeLa细胞;利用荧光实时定量RT-PCR法和Western blotting 法分别从mR...
- 刘洪丽张友忠吕昌帅丁佰娟王颉
